一种乌帕替尼中间体中相关物质的检测方法与流程

本发明涉及药物分析，尤其涉及一种乌帕替尼中间体中相关物质的检测方法。

背景技术：

1、乌帕替尼是一种高效、有选择性的jak1抑制剂，用于治疗一些自身免疫性疾病如治疗特应性皮炎、风湿性关节炎、银屑病、溃疡性结肠炎等。其中，乌帕替尼中间体，n-[5-[(4-甲基苯基)磺酰基]-5h-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基]氨基甲酸乙酯(cas号：1869118-24-0，分子量：360.39，分子式：c16h16n4o4s)是制备乌帕替尼的重要起始物料。

2、

3、目前，乌帕替尼中间体合成工艺如下所示：

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5、合成过程中可能引入的副产物及杂质主要有以下所列出的杂质a(ima)、杂质b(imb)和杂质c(imc)。

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7、乌帕替尼中间体中所含杂质以及这些杂质在后续反应中的转化产物可能会带入到原料药中，从而直接影响原料药乌帕替尼的质量和安全。因此，杂质含量控制是保证药品安全可靠的一个重要质量控制指标。

8、目前，中国药典及国外药典未收录乌帕替尼中间体中上述有关物质测定方法，现有技术中也未有相关报道和研究。因此，有必要建立一种快速、精确检测乌帕替尼中间体中杂质a、杂质b、杂质c等杂质的方法，以实现简便、快速、精准控制乌帕替尼中间体质量的目的。

技术实现思路

1、基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种乌帕替尼中间体中相关物质的检测方法。

2、本发明提出的一种乌帕替尼中间体中相关物质的检测方法，所述乌帕替尼中间体的结构式如式(ⅰ)所示：

3、

4、其特征在于，采用高效液相色谱法进行检测；

5、所述色谱检测条件为：

6、色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；

7、流动相：流动相a为ph＝6.0-8.0的磷酸二氢盐溶液，流动相b为甲醇；

8、洗脱方式：梯度洗脱；

9、采用紫外检测，检测波长为230-250nm。

10、进一步地，所述相关物质包括：

11、杂质a：

12、杂质b：

13、杂质c：

14、进一步地，所述色谱柱选自agilent eclipse xdb c18；规格为5μm，250mm x4.6mm。

15、进一步地，所述梯度洗脱程序为：0-15min，流动相中流动相a的体积百分占比由55-65％逐步递减至25-35％；15-30min，流动相a的体积百分占比由25-35％逐步递减至5-15％；30-40min，流动相a的体积百分占比为5-15％；40-41min，流动相a的体积百分占比由5-15％递增至55-65％；41-50min，流动相a的体积百分占比为55-65％。

16、优选地，所述梯度洗脱程序为：0-15min，流动相中流动相a的体积百分占比由60％逐步递减至30％；15-30min，流动相a的体积百分占比由30％逐步递减至10％；30-40min，流动相a的体积百分占比为10％；40-41min，流动相a的体积百分占比由10％递增至60％；41-50min，流动相a的体积百分占比为60％。

17、进一步地，所述磷酸二氢盐溶液为磷酸二氢钾溶液，其浓度为10-30mmol/l，用氢氧化钾调节ph至6.0-8.0。

18、进一步地，所述流速为0.8-1.2ml/min，柱温为30-45℃，进样体积为10-20μl。

19、本发明中，流速优选1ml/min，柱温优选40℃、进样体积优选10μl。

20、本发明中，所述自动进样室温度为4-30℃，优选25℃。

21、进一步地，所述检测方法包括以下步骤：

22、s1、配制相关杂质对照品单标溶液：精密称取各相关杂质对照品，分别置于不同容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释，配制成各相关杂质对照品单标溶液；

23、s2、配制乌帕替尼中间体对照品溶液：精密称取乌帕替尼中间体对照品，置于容量瓶中，加稀释剂溶解并稀释，得到乌帕替尼中间体对照品溶液；

24、s3、配制线性检测溶液：精密量取各相关杂质对照品单标溶液和乌帕替尼中间体对照品溶液，混合，加稀释剂进行稀释，配制成线性检测溶液，采用高效液相色谱法进行检测，绘制标准曲线，得到线性回归方程；

25、s4、配制供试品溶液：将乌帕替尼中间体供试品用稀释剂溶解，配制成供试品溶液，采用高效液相色谱法进行检测，根据线性回归方程计算样品中各相关杂质的含量。

26、优选地，所述稀释剂为乙腈。

27、优选地，所述供试品溶液中乌帕替尼中间体的浓度为0.1-2.0mg/ml。

28、有益效果：本发明提出了一种乌帕替尼中间体中相关物质的检测方法，通过色谱条件筛选，能够同时检测出乌帕替尼中间体合成中可能引入的3种杂质成分，分离度高，方法专属性强，为乌帕替尼中间体的质量控制、杂质研究提供了一种简便合理的检测方法，该方法适用于乌帕替尼中间体中有关物质的测定和样品检验。

技术特征：

1.一种乌帕替尼中间体中相关物质的检测方法，所述乌帕替尼中间体的结构式如式(ⅰ)所示：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述相关物质包括：

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述色谱柱选自agilent eclipse xdbc18；规格为5μm，250mm x 4.6mm。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱程序为：0-15min，流动相中流动相a的体积百分占比由55-65％逐步递减至25-35％；15-30min，流动相a的体积百分占比由25-35％逐步递减至5-15％；30-40min，流动相a的体积百分占比为5-15％；40-41min，流动相a的体积百分占比由5-15％递增至55-65％；41-50min，流动相a的体积百分占比为55-65％。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱程序为：0-15min，流动相中流动相a的体积百分占比由60％逐步递减至30％；15-30min，流动相a的体积百分占比由30％逐步递减至10％；30-40min，流动相a的体积百分占比为10％；40-41min，流动相a的体积百分占比由10％递增至60％；41-50min，流动相a的体积百分占比为60％。

6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述磷酸二氢盐溶液为磷酸二氢钾溶液，其浓度为10-30mmol/l，用氢氧化钾调节ph至6.0-8.0。

7.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，所述流速为0.8-1.2ml/min，柱温为30-45℃，进样体积为10-20μl。

8.根据权利要求1-7任一项所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述稀释剂为乙腈。

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述供试品溶液中乌帕替尼中间体的浓度为0.1-2.0mg/ml。

技术总结
本发明公开了一种乌帕替尼中间体中相关物质的检测方法，涉及药物分析技术领域，是采用高效液相色谱法进行检测；所述色谱检测条件为：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱；流动相：流动相A为pH＝6.0‑8.0的磷酸二氢盐溶液，流动相B为甲醇；洗脱方式：梯度洗脱；采用紫外检测，检测波长为230‑250nm。本发明通过色谱条件筛选，能够同时检测出乌帕替尼中间体合成中可能引入的3种杂质成分，分离度高，方法专属性强，为乌帕替尼中间体的质量控制、杂质研究提供了一种简便合理的检测方法，该方法适用于乌帕替尼中间体中有关物质的测定和样品检验。

技术研发人员：丁青竹,方明山,王奇,刘洋,李丹丹
受保护的技术使用者：安徽迪合永欣药业有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/17