一种检测C1酯酶抑制剂效价的方法与流程

本发明具体涉及一种检测c1酯酶抑制剂效价的方法。

背景技术：

1、人c1抑制剂(c1inh)，也称为c1-酯酶抑制剂，是一种重要的多功能血浆糖蛋白，参与补体，凝血和纤维蛋白溶解系统的调节。c1inh是目前已知的唯一一种既能通过经典途径，又能通过凝集素途径对补体系统进行调节的血浆蛋白酶抑制物，其在补体系统、激肽释放酶—激肽系统、纤溶系统和凝血系统中发挥重要的调节作用。目前，c1inh被批准用于治疗及预防遗传性血管性水肿，这是一种罕见的常染色体显性遗传性疾病，临床表现为血管通透性增加和水肿的复发性急性发作，严重影响患者的日常生活。

2、由于c1inh的广泛应用，c1inh的效价检测成为科学家关注的重点。效价是药品产生特定生物学效应的能力，是评价药品有效性最关键的质量指标。因此，c1inh效价检测的方法开发在药物研发过程中至关重要。

技术实现思路

1、为解决上述问题，本发明提供了一种检测c1酯酶抑制剂效价的方法，它是使用全自动凝血仪检测，具体包括如下步骤：

2、(1)供试品溶液、标准品溶液和c1酯酶溶液的制备：分别取c1酯酶抑制剂、c1-inh标准品和c1酯酶，加样品稀释液混匀，即得；

3、所述样品稀释液是含人血白蛋白的ph 7.4±0.1的缓冲溶液；

4、(2)底物溶液的制备：取显色底物c1e 5603，加底物稀释液混匀，即得；

5、所述底物稀释液是ph 8.5±0.1的缓冲溶液；

6、(3)取供试品溶液、标准品溶液、样品稀释液、c1酯酶溶液和底物溶液放入全自动凝血仪，检测条件为：

7、供试品溶液、标准品溶液或样品稀释液与c1酯酶溶液和底物溶液的体积比1：1：3

8、检测波长：405nm；

9、反应温度：37℃，时间：240s。

10、进一步地，步骤(1)所述供试品溶液的效价检测范围1.25～0.25iu/ml。

11、进一步地，步骤(1)所述标准品溶液的效价1.5iu/ml。

12、进一步地，步骤(1)所述c1酯酶溶液的浓度28～40mmol/ml。

13、进一步地，步骤(1)所述样品稀释液是含0.1％人血白蛋白，6.1g/l tris，15g/lnacl的ph 7.4±0.1的水溶液。

14、进一步地，步骤(2)所述底物溶液的浓度为2mmol/l。

15、进一步地，步骤(2)所述底物稀释液是含6.1g/l tris，15g/l nacl的ph8.5±0.1的水溶液。

16、进一步地，步骤(3)所述检测波长：405nm。

17、本发明建立了一种基于显色底物法，stago全自动凝血分析仪检测c1inh的方法，该方法缩短了检测周期，降低了检测成本，提高了检测效率。

18、显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

19、以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

技术特征：

1.一种检测c1酯酶抑制剂效价的方法，其特征在于：它是使用全自动凝血仪检测，具体包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)所述供试品溶液的效价检测范围1.25～0.25iu/ml。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)所述标准品溶液的效价1.5iu/ml。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)所述c1酯酶溶液的浓度28～40mmol/ml。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)所述样品稀释液是含0.1％人血白蛋白，6.1g/l tris，15g/l nacl的ph 7.4±0.1的水溶液。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)所述底物溶液的浓度为2mmol/l。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)所述底物稀释液是含6.1g/ltris，15g/l nacl的ph8.5±0.1的水溶液。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(3)所述检测波长：405nm。

技术总结
本发明公开了一种检测C1酯酶抑制剂效价的方法，它是使用全自动凝血仪检测，具体包括如下步骤：(1)供试品溶液、标准品溶液和C1酯酶溶液的制备；(2)底物溶液的制备；(3)取供试品溶液、标准品溶液、样品稀释液A、C1酯酶溶液和底物溶液放入全自动凝血仪检测。本发明建立了一种基于显色底物法，STAGO全自动凝血分析仪检测C1INH的方法，该方法缩短了检测周期，降低了检测成本，提高了检测效率。

技术研发人员：陈川,柳宁,谢一舟,吴佳君,姜晓
受保护的技术使用者：成都蓉生药业有限责任公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/27