复方一枝蒿片指纹图谱的检测方法及应用与流程

本发明属于中药检测领域，尤其涉及复方一枝蒿片指纹图谱的检测方法及应用。

背景技术：

1、复方一枝蒿片是由新疆一枝蒿、大青叶、板蓝根三味药加辅料压制而成，在传统的维医中，具有清除“乃孜来”解毒利咽的功效，用于“乃孜来”导致的感冒发烧、咽喉肿痛、解表祛风、凉血解毒。复方一枝蒿片现有的质量标准仅通过薄层法对处方中的一枝蒿和板蓝根进行定性鉴别，而中药复方成分复杂，现有质量标准无法全面反映质量整体特征，无法从整体上控制产品的质量。因此，开发一种尽可能多地反映复方一枝蒿片所含成分的指纹图谱检测方法对于复方一枝蒿片的质量检测和评价非常重要。

技术实现思路

1、本发明提供了复方一枝蒿片指纹图谱的检测方法及应用，用于复方一枝蒿片的质量检测和评价。

2、具体的，复方一枝蒿片指纹图谱的检测方法，包括以下步骤：

3、步骤(1)、采用不同批次的复方一枝蒿片制备供试品溶液；

4、步骤(2)、混合对照品溶液的制备；

5、步骤(3)、分别精密吸取混合对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；

6、步骤(4)、将供试品溶液指纹图谱从仪器导出，导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，选择不同批次复方一枝蒿片的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成复方一枝蒿片的对照指纹图谱；计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积；并与混合标准品图谱进行比对，指认主要成分峰。

7、优选的是，所述步骤(1)中供试品溶液的制备方法为:将不同批次的复方一枝蒿片去除薄膜衣片，研细，精密称定1.00g-3.00g，置于锥形瓶中，后精密吸取一定量甲醇溶液密塞，称定重量，超声(250w，频率40khz)30min，取出，放冷，再称定重量，用甲醇溶液补足减失重量，摇匀，滤过，用滤膜过滤后得到供试品。

8、上述任一方案中优选的是，步骤(1)中，将不同批次的复方一枝蒿片去除薄膜衣片，研细，精密称定质量在1.00g-3.00g范围内的任意值，如1.00g，2.00g，3.00g等。

9、上述任一方案中优选的是，所述步骤(1)中，超声功率250w，频率40khz，时间为30min。

10、上述任一方案中优选的是，所述步骤(2)中混合对照品溶液的制备方法为:精密称定一枝蒿酮酸、木犀草素、靛玉红、绿原酸、(r,s)-告依春对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成混合对照品溶液。

11、上述任一方案中优选的是，所述步骤(3)中分别精密吸取步骤(1)制备的供试品溶液和步骤(2)制备的混合对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图。

12、上述任一方案中优选的是，所述步骤(3)中，色谱条件为：色谱柱：资生堂shiseidocapcell pak c18，4.6×250nm，5μm；流动相：甲醇(a)-(0.1-0.2)甲酸溶液(b)；梯度洗脱条件：0～5min，5％a～10％a，5～10min，10％a～17％a，10～20min，17％a～23％a，20～25min，23％a～34％a，25～40min，34％a～42％a，40～60min，42％a～55％a，60～70min，55％a～55％a，70～100min，55％a～85％a，100～105min，85％a～95％a，105～110min，95％a～5％a，110～120min，5％a～5％a；流速：(0.6-1.0)ml·min-1；紫外检测波长：(210-350)nm。

13、上述任一方案中优选的是，所述步骤(4)中，将步骤(3)中获得的复方一枝蒿片供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012a，生成指纹图谱相似度评价系统，计算其对照指纹图谱的相似度，当相似度不低于0.9，即判断质量为合格的复方一枝蒿片。

14、上述任一方案中优选的是，所述步骤(5)中，选择不同批次复方一枝蒿片的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成复方一枝蒿片的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分。

15、上述任一方案中优选的是，所述复方一枝蒿片的药味组成和用量配比为：一枝蒿：大青叶：板蓝根＝1：1：1。

16、上述任一方案中优选的是，所述复方一枝蒿片的药味组成和配比为：一枝蒿1份，大青叶1份，板蓝根1份。

17、本发明还公开一种上述复方一枝蒿片指纹图谱的检测方法得到的色谱图在表征复方一枝蒿片质量方面的应用。

18、有益效果

19、本发明公开了复方一枝蒿片的指纹图谱的检测方法及应用，包括步骤(1)、供试品溶液的制备；步骤(2)、混合对照品溶液的制备:步骤(3)、分别精密吸取混合对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；步骤(4)，将供试品溶液指纹图谱从仪器导出，导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，选择不同批次复方一枝蒿片的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成复方一枝蒿片的对照指纹图谱；计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积；并与混合标准品图谱进行比对，指认主要成分峰。本发明指纹图谱，能全面，客观地表征复方一枝蒿片的质量。检测方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点。

技术特征：

1.复方一枝蒿片指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.权利要求1所述的复方一枝蒿片指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中供试品溶液的制备方法为:将不同批次的复方一枝蒿片去除薄膜衣片，研细，精密称定1.00g-3.00g，置于锥形瓶中，后精密吸取一定量甲醇溶液密塞，称定重量，超声，取出，放冷，再称定重量，用甲醇溶液补足减失重量，摇匀，滤过，用滤膜过滤后得到供试品。

3.权利要求2所述的复方一枝蒿片指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述超声功率250w，频率40khz，时间为30min。

4.权利要求1所述的复方一枝蒿片指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中混合对照品溶液的制备方法为:精密称定一枝蒿酮酸、木犀草素、靛玉红、绿原酸、(r,s)-告依春对照品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成混合对照品溶液。

5.权利要求1所述的复方一枝蒿片指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中分别精密吸取步骤(1)制备的供试品溶液和步骤(2)制备的混合对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图。

6.权利要求1所述的复方一枝蒿片指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述步骤(3)中，色谱条件为：色谱柱：资生堂shiseido capcell pak c18，4.6×250nm，5μm；流动相：甲醇(a)-(0.1-0.2)甲酸溶液(b)；梯度洗脱条件：0～5min，5％a～10％a，5～10min，10％a～17％a，10～20min，17％a～23％a，20～25min，23％a～34％a，25～40min，34％a～42％a，40～60min，42％a～55％a，60～70min，55％a～55％a，70～100min，55％a～85％a，100～105min，85％a～95％a，105～110min，95％a～5％a，110～120min，5％a～5％a；流速：(0.6-1.0)ml·min-1；紫外检测波长：(210-350)nm。

7.权利要求1所述的复方一枝蒿片指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述步骤(4)中，将步骤(3)中获得的复方一枝蒿片供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012a，生成指纹图谱相似度评价系统，计算其对照指纹图谱的相似度，当相似度不低于0.9，即判断质量为合格的复方一枝蒿片。

8.权利要求1所述的复方一枝蒿片指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述步骤(5)中，选择不同批次复方一枝蒿片的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成复方一枝蒿片的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的复方一枝蒿片指纹图谱的检测方法得到的指纹图谱在表征复方一枝蒿片质量方面的应用。

技术总结
本发明公开了复方一枝蒿片的指纹图谱的检测方法及应用，包括步骤(1)、供试品溶液的制备；步骤(2)、混合对照品溶液的制备:步骤(3)、分别精密吸取混合对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；步骤(4)，将供试品溶液指纹图谱从仪器导出，导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，选择不同批次复方一枝蒿片的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成复方一枝蒿片的对照指纹图谱；计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积；并与混合标准品图谱进行比对，指认主要成分峰。本发明指纹图谱，能全面，客观地表征复方一枝蒿片的质量。检测方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点。

技术研发人员：杨瑞,李中军,田腾云,孙国香,孙雅泉
受保护的技术使用者：江苏黄河药业股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/27