本发明属于药物化学,具体涉及一种多糖铁复合物中游离铁离子的检测方法。
背景技术:
1、多糖铁复合物(polysaccharide-iron complex)是一种三价铁离子与淀粉水解产生的单糖和低聚糖形成的络合物,是治疗缺铁性贫血的第三代补铁剂。由美国kremersurban pharmaceuticals inc.生产进口引入,商品名称为niferex(力蜚能)。
2、多糖铁复合物作为铁元素补充剂,可迅速提高血铁水平与升高血红蛋白。对于胃肠黏膜刺激性轻,可连续给药。在消化道中能以分子形式被吸收,且吸收率不受胃酸减少、食物成分的影响,可迅速提高血红蛋白水平。本药对胃肠黏膜无刺激和腐蚀作用,避免了各种消化道的不良反应,用于防治缺铁性贫血。
3、多糖铁复合物制备方法主要是采用单糖、低聚糖等糖与铁盐反应制备生产。us3821192、zl201310590326.x和zl201310591380.6报道采用玉米糊精水溶液或糖浆水溶液与六水三氯化铁溶液混合,加入碱性溶液制备得到多糖铁复合物。zl202011539831.8报道三氯化铁中加入碱性物质制备氢氧化铁胶体,再与糖浆进行络合制备多糖铁复合物。
4、目前,对制备得到的多糖铁复合物中铁含量的测定有多种检测方法,相关文献报道的检测方法均为多糖铁复合物及胶囊中铁含量检测。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一种多糖铁复合物中游离铁离子的检测方法,通过加酸性溶液将多糖铁复合物中游离铁离子溶解,再加入醇类溶剂将多糖铁复合物沉淀后,将溶液中游离铁离子全部还原为二价铁离子后采用紫外-可见分光光度法进行检测,所述方法的溶解及沉降过程中不会对络合物破坏而导致产生新的游离铁离子,检测方法的专属性、重复性、耐用性较好,适用于多糖铁复合物中的游离铁离子的检测。
2、为达到以上目的,本发明采用的技术方案是:一种多糖铁复合物中游离铁离子的检测方法,所述方法包括如下步骤:
3、s1、制备标准曲线贮备液:取设定量的三氯化铁对照品,精密称定后置于第一容量瓶中,加有机酸溶液溶解并稀释至刻度,摇匀得到三氯化铁溶液;精密量取一定量所述三氯化铁溶液,置于第二容量瓶中,采用所述有机酸溶液稀释至刻度,摇匀,获得所述标准曲线贮备液;
4、s2、配制亚铁离子标准曲线溶液,获得亚铁离子浓度-吸光度标准曲线:按设定等间隔量分别精密量取一系列所述标准曲线贮备液,并分别置于相应浓度标记的容量瓶中,加入醇类、乙酸-乙酸钠缓冲溶液、盐酸羟胺溶液、邻菲罗啉溶液,用水稀释至容量瓶刻度,摇匀、静置,获得一系列亚铁离子标准曲线溶液;然后在510nm波长处测定所述亚铁离子标准曲线溶液的吸光度,进而获得亚铁离子浓度-吸光度标准曲线;
5、s3、制备供试品溶液:取指定量的供试品,精密称定后置于第三容量瓶中,加5ml水溶解,加所述有机酸溶液,摇匀,用醇类稀释至刻度,摇匀,离心;取一定量上清液置于第四容量瓶中,加乙酸-乙酸钠缓冲液、盐酸羟胺溶液、邻菲罗啉溶液,用水稀释至刻度,摇匀、静置,得到所述供试品溶液;
6、s4、测定供试品溶液中游离铁离子浓度:测定所述供试品溶液在510nm波长处的吸光度,并根据所述亚铁离子浓度-吸光度标准曲线,获得供试品溶液中游离铁离子浓度。
7、进一步,步骤s1中,所述三氯化铁对照品为485mg,所述第一容量瓶的规格为100ml。
8、进一步,步骤s1中,所述第二容量瓶的规格为100ml;精密量取1ml所述三氯化铁溶液置于第二容量瓶中,采用所述有机酸溶液稀释至刻度,摇匀,获得所述标准曲线贮备液。
9、进一步,步骤s2中,分别精密量取所述标准曲线贮备液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml,并分别置于相应浓度标记的25ml容量瓶中,加入醇类4ml、乙酸-乙酸钠缓冲溶液5ml、盐酸羟胺溶液1.5ml、邻菲罗啉溶液5ml,用水稀释至刻度,摇匀,静置10分钟,获得对应的亚铁离子标准曲线溶液浓度分别为:0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4μg/ml。
10、进一步,步骤s3中,所述供试品为多糖铁复合物,所述供试品为150mg,所述第三容量瓶的规格为50ml;
11、所述有机酸溶液加入量为0.5ml~2.5ml。
12、进一步,步骤s3中,取5ml所述上清液置于第四容量瓶中,所述第四容量瓶规格为25ml;加入乙酸-乙酸钠缓冲液5ml、盐酸羟胺溶液1.5ml、邻菲罗啉溶液5ml,用水稀释至刻度,摇匀,静置10分钟,得到所述供试品溶液。
13、进一步,步骤s1、s3中,所述有机酸溶液选自甲酸、乙酸中的一种。
14、进一步,步骤s1、s3中,所述有机酸溶液的质量百分比浓度为1%~5%。
15、进一步,步骤s2、s3中,所述醇类选自甲醇、乙醇中的一种。
16、进一步,步骤s2、s3中,所述乙酸-乙酸钠缓冲溶液的ph值范围为3~6;
17、所述盐酸羟胺溶液的质量百分比浓度为1%~3%;
18、所述邻菲罗啉溶液的质量百分比浓度为0.2%~2%。
19、本发明的有益效果在于:采用本发明所提供的一种多糖铁复合物中游离铁离子的检测方法,包括如下步骤:制备标准曲线贮备液;配制亚铁离子标准曲线溶液,获得亚铁离子浓度-吸光度标准曲线;制备供试品溶液;测定供试品溶液中游离铁离子浓度;可以通过加酸性溶液将多糖铁复合物中游离铁离子溶解,然后加入醇类溶剂将多糖铁复合物沉淀,再将溶液中游离铁离子全部还原为亚铁离子后,采用紫外-可见分光光度法检测亚铁离子吸光度,并结合亚铁离子浓度-吸光度标准曲线,获得多糖铁复合物中游离铁离子的浓度。本发明提供的方法中,溶解及沉降过程中不会对复合物破坏而导致产生新的游离铁离子,避免了游离铁离子检测时络合铁的干扰;而且,本发明提供的方法的专属性、重复性、及耐用性良好,检测结果准确,适用于多糖铁复合物中游离铁离子的检测。
1.一种多糖铁复合物中游离铁离子的检测方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种多糖铁复合物中游离铁离子的检测方法,其特征在于,步骤s1中,所述三氯化铁对照品为485mg,所述第一容量瓶的规格为100ml。
3.根据权利要求2所述的一种多糖铁复合物中游离铁离子的检测方法,其特征在于,步骤s1中,所述第二容量瓶的规格为100ml;精密量取1ml所述三氯化铁溶液置于第二容量瓶中,采用所述有机酸溶液稀释至刻度,摇匀,获得所述标准曲线贮备液。
4.根据权利要求3所述的一种多糖铁复合物中游离铁离子的检测方法,其特征在于,步骤s2中,分别精密量取所述标准曲线贮备液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml,并分别置于相应浓度标记的25ml容量瓶中,加入醇类4ml、乙酸-乙酸钠缓冲溶液5ml、盐酸羟胺溶液1.5ml、邻菲罗啉溶液5ml,用水稀释至刻度,摇匀,静置10分钟,获得对应的亚铁离子标准曲线溶液浓度分别为:0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4μg/ml。
5.根据权利要求4所述的一种多糖铁复合物中游离铁离子的检测方法,其特征在于,步骤s3中,所述供试品为多糖铁复合物,所述供试品为150mg,所述第三容量瓶的规格为50ml;
6.根据权利要求5所述的一种多糖铁复合物中游离铁离子的检测方法,其特征在于,步骤s3中,取5ml所述上清液置于第四容量瓶中,所述第四容量瓶规格为25ml;加入乙酸-乙酸钠缓冲液5ml、盐酸羟胺溶液1.5ml、邻菲罗啉溶液5ml,用水稀释至刻度,摇匀,静置10分钟,得到所述供试品溶液。
7.根据权利要求1所述的一种多糖铁复合物中游离铁离子的检测方法,其特征在于,步骤s1、s3中,所述有机酸溶液选自甲酸、乙酸中的一种。
8.根据权利要求1所述的一种多糖铁复合物中游离铁离子的检测方法,其特征在于,步骤s1、s3中,所述有机酸溶液的质量百分比浓度为1%~5%。
9.根据权利要求1所述的一种多糖铁复合物中游离铁离子的检测方法,其特征在于,步骤s2、s3中,所述醇类选自甲醇、乙醇中的一种。
10.根据权利要求1所述的一种多糖铁复合物中游离铁离子的检测方法,其特征在于,步骤s2、s3中,所述乙酸-乙酸钠缓冲溶液的ph值范围为3~6;