一种含硫化汞药物中可溶性汞的质量控制方法

本发明涉及质量控制，具体涉及一种含硫化汞药物中可溶性汞的质量控制方法。

背景技术：

1、通常而言，可溶性汞含量与汞的肠道吸收密切相关，只有可溶性汞才能被肠道吸收。现有技术检测可溶性汞的方法存在以下三方面问题：首先，高无机汞背景样本(含硫化汞药物是一种高无机汞背景样本)甲基汞含量检测存在正干扰问题；其次，对于含硫化汞药物中可溶性汞含量检测仅使用了人工胃液和人工肠液，忽视了hg2+与巯基的高度亲和性，未将肠道中的小分子巯基化合物引入其可溶性汞含量检测；最后，未建立含硫化汞药物中可溶性汞含量与汞的体内组织分布之间的关联并与每日允许暴露剂量的可溶性汞进行对比以确定限度标准。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种含硫化汞药物中可溶性汞的质量控制方法，本发明提供的质量控制方法更加准确合理。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、本发明提供了一种含硫化汞药物中可溶性汞的质量控制方法，包括以下步骤：

4、测定含硫化汞药物中甲基汞含量；若所述含硫化汞药物中检出甲基汞，则所述含硫化汞药物为不合格；

5、若所述含硫化汞药物中未检出甲基汞，则测定所述含硫化汞药物分别在人工胃液、人工肠液和含l-半胱氨酸人工肠液中的汞溶出度，以及灌胃给予所述含硫化汞药物后肾脏汞含量的增加值，进行多元线性回归分析，建立式i：

6、y＝β1×a+β2×b+β3×c，式i；

7、所述式i中，β1、β2、β3为加权系数，β1＝0.5407，β2＝1.279，β3＝0.356；a为含硫化汞药物在人工胃液中的汞溶出度，单位为ng/g；b为含硫化汞药物在人工肠液中的汞溶出度，单位为ng/g；c为含硫化汞药物在含l-半胱氨酸人工肠液中的汞溶出度，单位为ng/g；y为灌胃给予所述含硫化汞药物后肾脏汞含量的增加值，单位为ng/g；

8、若y不大于2.414ng/g，则所述含硫化汞药物为合格；所述y的限度值2.414ng/g来源于灌胃给予每日允许暴露剂量的氯化汞后测得的肾脏汞含量的增加值。

9、优选地，所述测定含硫化汞药物中甲基汞含量包括以下步骤：

10、将含硫化汞药物和含硫粉的巯基化合物缓冲液混合，静置后得到上清液；

11、使用液相色谱-原子荧光联用方法测定所述上清液中的甲基汞含量，得到含硫化汞药物中甲基汞含量。

12、优选地，所述含硫粉的巯基化合物缓冲液的制备原料包括硫粉、巯基化合物和基础缓冲溶液；所述硫粉的粒径为1～500μm；所述基础缓冲溶液的ph值为5～10；所述含硫粉的巯基化合物缓冲液中巯基化合物的浓度为2～100μg/ml。

13、优选地，所述含硫粉的巯基化合物缓冲液中的巯基化合物包括l-半胱氨酸、谷胱甘肽和巯基乙醇中的一种或几种。

14、优选地，所述液相色谱-原子荧光联用方法的检出限为0.05ng/ml；

15、所述液相色谱-原子荧光联用方法的检测条件包括：

16、液相色谱条件：色谱柱为c18色谱柱，柱长150mm，内径4.6mm，填料粒径5μm；流动相为含有5vol％甲醇、0.06mol·l-1乙酸铵和0.1wt％l-半胱氨酸的水溶液；所述流动相的流速为1ml·min-1；进样量为100μl；

17、原子荧光光谱条件：原子化方式为冷蒸气发生；氩气流速为400ml·min-1；辅助气流速为200ml·min-1；载流剂为5vol％hcl水溶液；还原剂为含有0.2wt％硼氢化钾和0.5wt％氢氧化钾的水溶液；灯电流为40ma；负高压为300v；测定波长为253.7nm。

18、优选地，所述含l-半胱氨酸人工肠液中的l-半胱氨酸的浓度为50～500μg/ml。

19、优选地，所述含硫化汞药物包括中药安宫牛黄丸、苏合香丸、朱砂安神丸、天王补心丸、人参再造丸、藏药七十味珍珠丸、仁青常觉、仁青芒觉、二十五味珊瑚丸和蒙药孟根乌苏十八味丸中的一种或几种。

20、优选地，所述灌胃给予含硫化汞药物和灌胃给予每日允许暴露剂量的氯化汞的给药方式包括：进入夜间照明前给药，提前0.5～2小时；给药前禁食6～10小时；给药1～3小时恢复供食；给药周期为3～21天。

21、本发明提供了一种含硫化汞药物中可溶性汞的质量控制方法，本发明首先测定含硫化汞药物中甲基汞含量，然后建立含硫化汞药物在体外溶出体系(人工胃液、人工肠液和含l-半胱氨酸人工肠液)中的可溶性汞含量与灌胃后的体内组织分布的关联公式，并通过与每日允许暴露剂量的氯化汞对比，确定含硫化汞药物中可溶性汞限度，形成含硫化汞药物中可溶性汞的质量控制方法。

技术特征：

1.一种含硫化汞药物中可溶性汞的质量控制方法，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于，所述测定含硫化汞药物中甲基汞含量包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的质量控制方法，其特征在于，所述含硫粉的巯基化合物缓冲液的制备原料包括硫粉、巯基化合物和基础缓冲溶液；所述硫粉的粒径为1～500μm；所述基础缓冲溶液的ph值为5～10；所述含硫粉的巯基化合物缓冲液中巯基化合物的浓度为2～100μg/ml。

4.根据权利要求2或3所述的质量控制方法，其特征在于，所述含硫粉的巯基化合物缓冲液中的巯基化合物包括l-半胱氨酸、谷胱甘肽和巯基乙醇中的一种或几种。

5.根据权利要求2所述的质量控制方法，其特征在于，所述液相色谱-原子荧光联用方法的检出限为0.05ng/ml；

6.根据权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于，所述含l-半胱氨酸人工肠液中的l-半胱氨酸的浓度为50～500μg/ml。

7.根据权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于，所述含硫化汞药物包括中药安宫牛黄丸、苏合香丸、朱砂安神丸、天王补心丸、人参再造丸、藏药七十味珍珠丸、仁青常觉、仁青芒觉、二十五味珊瑚丸和蒙药孟根乌苏十八味丸中的一种或几种。

8.根据权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于，所述灌胃给予含硫化汞药物和灌胃给予每日允许暴露剂量的氯化汞的给药方式包括：进入夜间照明前给药，提前0.5～2小时；给药前禁食6～10小时；给药1～3小时恢复供食；给药周期为3～21天。

技术总结
本发明提供了一种含硫化汞药物中可溶性汞的质量控制方法，涉及质量控制技术领域。本发明首先测定含硫化汞药物中甲基汞含量，然后建立含硫化汞药物在体外溶出体系(人工胃液、人工肠液和含L‑半胱氨酸人工肠液)中的可溶性汞含量与灌胃后的体内组织分布的关联公式，并通过与每日允许暴露剂量的氯化汞对比，确定含硫化汞药物中可溶性汞限度，形成含硫化汞药物中可溶性汞的质量控制方法。

技术研发人员：张明,魏立新,赵静,李彩霞,毕宏涛,周文斌
受保护的技术使用者：中国科学院西北高原生物研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/4/17