本发明属于检测领域，涉及免疫层析试纸条及其用途，具体涉及一种侧流免疫层析试纸条及用于检测大肠杆菌o157:h7的用途。

背景技术：

1、大肠杆菌o157:h7是危害最严重的食源性病原体之一，易引起血性腹泻、溶血性尿毒综合征等多种疾病。中国药典明确规定药品需严格控制大肠杆菌污染，不得检出或需符合特定限量标准，但目前国内外对于大肠杆菌o157:h7的检测需3～5天的预增菌、选择性增菌及生化确认步骤，难以满足冷链物流或短保质期产品的“当日放行”需求。

2、随着分子生物学的发展，研究者们建立了一系列方法检测大肠杆菌o157:h7，如实时荧光定量聚合酶链反应（pcr）、环介导等温扩增（lamp）荧光检测法等，缩短了检测时间，并展现极高灵敏度，但难以摆脱对精密仪器设备以及专业技术人员的依赖，检验流程仍然繁琐。公众对兼具操作便捷性、检测时效性、便携性、高灵敏度及高特异性的致病菌检测技术的需求持续提升。

3、侧流免疫层析（lateral flow immunoassay，lfia）是一种基于免疫试剂对于抗原特异性识别，利用信号指示剂对抗原进行快速定性与定量的检测方式，已在对于妊娠、新冠病毒的检测上取得巨大的商业成功。近年来，许多设计已验证lfia在微生物检测中同样有巨大潜力。

4、但是，lfia中应用最广的信号标记物金纳米球（aunp）虽具备成本低、易修饰的优势，但受限于比色信号灵敏度不足，难以满足准确定量需求；同时，单一信号输出易受复杂基质干扰，存在假阳性风险。

5、为了克服现有技术中存在的不足，特提出本发明创造。

技术实现思路

1、本发明第一目的在于提供一种侧流免疫层析试纸条，第二目的在于提供该侧流免疫层析试纸条用于检测大肠杆菌o157:h7的用途。

2、本发明上述目的通过如下技术方案实现：

3、本发明提供一种侧流免疫层析试纸条，包括背板、样品垫、层析膜和吸收垫，所述样品垫、层析膜和吸收垫沿样品层析方向依次搭接贴合固定于所述背板表面，所述层析膜上设置有检测线和质控线；

4、所述样品垫上设有用于添加待测样品与特异性免疫标记花状纳米金复合物预混液的加样区间，所述特异性免疫标记花状纳米金复合物可与待测样品中的目标检测物特异性结合，形成免疫复合物；

5、所述检测线固定有可与所述免疫复合物中目标检测物特异性结合的捕获抗体以及荧光可被所述特异性免疫标记花状纳米金复合物猝灭的量子点材料；

6、所述质控线固定有可与所述免疫复合物中特异性免疫标记花状纳米金复合物特异性结合的捕获抗体以及荧光可被所述特异性免疫标记花状纳米金复合物猝灭的量子点材料。

7、在一个具体实施例中，所述特异性免疫标记花状纳米金复合物通过在花状纳米金表面结合可与待测样品中的目标检测物特异性结合的抗体形成。

8、在一个具体实施例中，所述花状纳米金的制备包括如下步骤：将金纳米球、氯金酸、柠檬酸钠和对苯二酚加入到水中加热搅拌反应，离心收集沉淀，用柠檬酸钠溶液复溶，得到花状纳米金溶液。

9、在一个具体实施例中，所述金纳米球的制备包括如下步骤：向加热的氯金酸水溶液中加入柠檬酸钠，搅拌反应，冷却，得到金纳米球溶液。

10、在一个具体实施例中，所述花状纳米金表面未被所述抗体结合的位点用牛血清白蛋白封闭。

11、在一个具体实施例中，所述量子点材料均为cdse/zns量子点材料。

12、在一个具体实施例中，所述特异性免疫标记花状纳米金复合物具备可见光区特征吸收，可见光照射下显色可视。

13、在一个具体实施例中，所述目标检测物为大肠杆菌o157:h7。

14、本发明提供上述侧流免疫层析试纸条（目标检测物为大肠杆菌o157:h7）用于检测样品中是否含有大肠杆菌o157:h7的用途。

15、在一个具体实施例中，所述样品选自中药材、中药饮片、提取物和中成药中的一种。

16、有益效果：

17、本发明基于花状纳米金与量子点提供一种比色-荧光双模式侧侧流免疫层析试纸条，利用花状纳米金的高消光系数与强荧光猝灭性能，实现对目标检测物（如大肠杆菌o157:h7）的快速、灵敏、双信号定量检测。在检测大肠杆菌o157:h7时，经非目标食源性致病菌干扰检验及多批次重复性验证，证明该试纸条对目标菌具有良好的特异性识别能力与稳定的批间一致性；中药基质加标回收实验表明，方法抗干扰能力强、准确度满足现场快速检测要求。本发明试纸条基于双模式策略，两种信号输出可相互印证，有效提升了检测的可靠性，为中药微生物限度现场筛查、食品安全的快速检测提供了新的技术路径。

技术特征：

1.一种侧流免疫层析试纸条，包括背板、样品垫、层析膜和吸收垫，所述样品垫、层析膜和吸收垫沿样品层析方向依次搭接贴合固定于所述背板表面，所述层析膜上设置有检测线和质控线，其特征在于：

2.根据权利要求1所述的侧流免疫层析试纸条，其特征在于：所述特异性免疫标记花状纳米金复合物通过在花状纳米金表面结合可与待测样品中的目标检测物特异性结合的抗体形成。

3.根据权利要求2所述的侧流免疫层析试纸条，其特征在于，所述花状纳米金的制备包括如下步骤：将金纳米球、氯金酸、柠檬酸钠和对苯二酚加入到水中加热搅拌反应，离心收集沉淀，用柠檬酸钠溶液复溶，得到花状纳米金溶液。

4.根据权利要求3所述的侧流免疫层析试纸条，其特征在于：所述金纳米球的制备包括如下步骤：向加热的氯金酸水溶液中加入柠檬酸钠，搅拌反应，冷却，得到金纳米球溶液。

5.根据权利要求2所述的侧流免疫层析试纸条，其特征在于：所述花状纳米金表面未被所述抗体结合的位点用牛血清白蛋白封闭。

6.根据权利要求1所述的侧流免疫层析试纸条，其特征在于：所述量子点材料均为cdse/zns量子点材料。

7.根据权利要求1所述的侧流免疫层析试纸条，其特征在于：所述特异性免疫标记花状纳米金复合物具备可见光区特征吸收，可见光照射下显色可视。

8.根据权利要求1至7任一所述的侧流免疫层析试纸条，其特征在于：所述目标检测物为大肠杆菌o157:h7。

9.权利要求8所述的侧流免疫层析试纸条用于检测样品中是否含有大肠杆菌o157:h7的用途。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于：所述样品选自中药材、中药饮片、提取物和中成药中的一种。

技术总结
本发明公开了一种侧流免疫层析试纸条及用于检测大肠杆菌O157:H7的用途。本发明基于花状纳米金与量子点提供一种比色‑荧光双模式侧侧流免疫层析试纸条，利用花状纳米金的高消光系数与强荧光猝灭性能，实现对目标检测物（如大肠杆菌O157:H7）的快速、灵敏、双信号定量检测。在检测大肠杆菌O157:H7时，经非目标食源性致病菌干扰检验及多批次重复性验证，证明该试纸条对目标菌具有良好的特异性识别能力与稳定的批间一致性；中药基质加标回收实验表明，方法抗干扰能力强、准确度满足现场快速检测要求。本发明试纸条基于双模式策略，两种信号输出可相互印证，有效提升了检测的可靠性。
技术研发人员：宗晨,盖欣凝,王玉淼,陈怡欢,刘新梅
受保护的技术使用者：中国药科大学
技术研发日：
技术公布日：2026/9/4