一种蜂胶酊的抑菌实验方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种抑菌实验方法，具体是一种蜂胶町的抑菌实验方法。
【背景技术】
[0002] 蜂胶是蜜蜂从植物幼芽或树干破伤部位采集的树脂，混入上飄腺分泌物和蜂蜡等 加工而成的一种具有芳香味的胶状固体物，具有收敛、止泻、消炎、止痛、止血、抗病毒、增进 机体免疫功能及促进机体组织再生等多种生物学功能，已被广泛应用于医学、植物保护、食 品防腐和日用化工等方面。蜂胶是非常珍贵的蜜蜂产品之一，被誉为"紫色黄金"。蜂胶含 有大量黄酬类化合物，具有多方面的生理和药理活性；蜂胶含有40多种微量元素，包含动 物生存必需的38种微量元素，而且含量丰富；蜂胶还有丰富的维生索和多种氨基酸，该些 都为蜂胶的神奇功效发挥着积极的作用。蜂胶在畜牧兽医上应用也很广泛，功效显著。在 养猪生产中各种类型的腹泻，W传染性疾病的发病率最高，危害最严重，是引起仔猪死亡的 重要病因之一，给养猪业造成重大经济损失，是兽医工作者和养猪经营者需要解决的问题。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种蜂胶町的抑菌实验方法，W解决上述【背景技术】中提出 的问题。
[0004] 为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
[0005] 一种蜂胶町的抑菌实验方法，包括W下步骤：
[0006] (1)把实验室用的普通滤纸用打孔器打成0.5-lcm直径的圆片，装在试管中密封 灭菌；
[0007] (2)将已经培养好的大肠杆菌制成一定浓度的悬浮液，取1ml所述悬浮液至灭菌 过的培养皿中，倒入适量已灭菌的培养基，轻轻转动培养皿，使培养基与悬浮液混匀，静置 凝成平板；
[000引 做将用于试验的蜂胶町配制成5%、10%、15%、20%四个浓度，分别用无菌綴 子夹起一片步骤（1)中已灭菌的滤纸放入蜂胶町5%、10%、15%、20%四个浓度中浸透，夹 出时在容器边缘停靠片刻，滤掉多余的溶液，把滤纸片放在步骤（2)所述平板中凝好的培 养基的中屯、，用綴子稍用力按一下，使之与培养基充分紧贴；
[0009] (4)按步骤（3)的方法将蜂胶町每个浓度重复做2-4次，W灭菌水浸湿的滤纸片做 空白对照；
[0010] 妨在37°c下恒温培养24小时后观察，用直尺测量抑菌圈的大小，得出20%浓度 的蜂胶町的抑菌圈较大且比较明显。
[0011] 作为本发明进一步的方案；步骤（1)中所述的密封灭菌的温度为12rc，时间为20 分钟。
[0012] 与现有技术相比，本发明的有益效果是；20%浓度的蜂胶町有效治疗仔猪由细菌 引起的腹泻，效果十分理想，不仅绿色环保，且不影响仔猪的正常生长发育。
【具体实施方式】
[0013] 下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述， 显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的 实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都 属于本发明保护的范围。
[0014] 本发明实施例中，一种蜂胶町的抑菌实验方法，包括W下步骤：
[0015] (1)把实验室用的普通滤纸用打孔器打成0.5cm直径的圆片，装在试管中密封灭 菌，灭菌温度为12rc，时间为20分钟；
[0016] (2)将已经培养好的大肠杆菌制成一定浓度的悬浮液，取1ml该悬浮液至灭菌过 的培养皿中，倒入适量已灭菌的培养基，轻轻转动培养皿，使培养基与悬浮液混匀，静置凝 成平板；
[0017] 做将用于试验的蜂胶町配制成5%、10%、15%、20%四个浓度，分别用无菌綴子 夹起一片步骤（1)中已灭菌的滤纸放入蜂胶町5%、10%、15%、20%四个浓度中浸透，夹出 时在容器边缘停靠片刻，滤掉多余的溶液，把滤纸片放在步骤（2)所述平板中凝好的培养 基的中屯、，用綴子稍用力按一下，使之与培养基充分紧贴；
[001引 （4)按步骤做的方法将蜂胶町每个浓度重复做3次，W灭菌水浸湿的滤纸片做空 白对照；
[0019] (5)在37°C下恒温培养24小时后观察，用直尺测量抑菌圈的大小。
[0020] 通过抑菌试验可W看出20%浓度的蜂胶町的抑菌圈较大且比较明显，如下表1。 [002U表1不同浓度下抑菌圈测量结果（抑菌圈直径，mm)
[0022]
[0023] 对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在 不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够W其他的具体形式实现本发明。因此，无论 从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权 利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有 变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何标记视为限制所设及的权利要求。
[0024] 此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加W描述，但并非每个实施方式仅包 含一个独立的技术方案，说明书的该种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当 将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可W经适当组合，形成本领域技术人员 可W理解的其他实施方式。
【主权项】
1. 一种蜂胶酊的抑菌实验方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 把实验室用的普通滤纸用打孔器打成0.5-lcm直径的圆片，装在试管中密封灭菌； (2) 将已经培养好的大肠杆菌制成一定浓度的悬浮液，取Iml所述悬浮液至灭菌过的 培养皿中，倒入适量已灭菌的培养基，轻轻转动培养皿，使培养基与悬浮液混匀，静置凝成 平板； (3) 将用于试验的蜂胶酊配制成5%、10%、15%、20%四个浓度，分别用无菌镊子夹起 一片步骤⑴中已灭菌的滤纸放入蜂胶酊5%、10%、15%、20%四个浓度中浸透，夹出时在 容器边缘停靠片刻，滤掉多余的溶液，把滤纸片放在步骤（2)所述平板中凝好的培养基的 中心，用镊子稍用力按一下，使之与培养基充分紧贴； (4) 按步骤（3)的方法将蜂胶酊每个浓度重复做2-4次，以灭菌水浸湿的滤纸片做空白 对照； (5) 在37°C下恒温培养24小时后观察，用直尺测量抑菌圈的大小，得出20%浓度的蜂 胶酊的抑菌圈较大且比较明显。2. 根据权利要求1所述的一种蜂胶酊的抑菌实验方法，其特征在于，步骤（1)中所述的 密封灭菌的温度为121°C，时间为20分钟。
【专利摘要】本发明公开了一种蜂胶酊的抑菌实验方法，将所分离大肠杆菌均匀涂抹在平板上，制作含不同浓度蜂胶酊的试纸片，并将之贴在涂抹大肠杆菌的平板上过夜培养，通过观察抑菌环的大小评价不同浓度蜂胶酊对大肠杆菌的抑菌情况，本发明的试验方法得出20％浓度的蜂胶酊有效治疗仔猪由细菌引起的腹泻，效果十分理想，不仅绿色环保，且不影响仔猪的正常生长发育。
【IPC分类】G01N33/00
【公开号】CN104977387
【申请号】CN201510227445
【发明人】樊瑞泉, 武新燕, 张振晓, 任继武, 高钰锋, 张峰, 王志芳, 王长春, 王宙, 麻慧芳, 郝华正
【申请人】山西省农业科学院经济作物研究所
【公开日】2015年10月14日
【申请日】2015年5月3日