一种球虫孢子化检测方法与流程

本发明涉及虫卵检测的，具体涉及一种球虫孢子化检测方法。

背景技术：

1、球虫病作为家禽上重要而常见的一种寄生虫疾病，是由胞内寄生的艾美耳球虫感染所致，在世界范围内的家禽生产点广泛流行并造成巨大的经济损失。球虫病会显著破坏家禽肠上皮细胞的完整性，从而严重的影响家禽的日增重和饲料利用率，进而造成生产绩效下降和经济效益损失。球虫病的发生还会对梭菌性肠炎有明显的促发作用。据全球性数据统计，球虫病每年给全球家禽业造成约30亿美金的经济损失

2、球虫是一种单细胞的宿主特异性的寄生虫，禽类上大多数球虫属于复顶门、艾美耳属，艾美耳球虫一般依据随感染宿主粪便排出的卵囊(球虫的合子)形态进行描述。卵囊被一个厚的外壳包裹，由一个单细胞构成，对外界环境具有非常强的抵抗力，一般市售的消毒药基本都不能杀灭球虫卵囊，使得球虫卵囊可以在家禽生产周围环境中普遍存活。卵囊通过孢子化，约24～72小时内达到感染性阶段，主要流行的球虫种类在48小时内即可产生感染性。感染性的卵囊具有4个孢子囊，每个孢子囊含有2个子孢子。

3、球虫卵囊通常存在于宿主粪便中，从粪便中分离球虫卵囊的方法有饱和食盐溶液飘浮法、饱和蔗糖溶液漂浮法，其中最常用的方法为饱和食盐溶液飘浮法。其原理悬浮溶液密度高于卵囊密度，而低于粪便中大多数杂质的密度，经离心或静置沉淀后，大部分杂质沉淀在容器底部，卵囊漂浮在悬浮溶液表面，然后收集表层漂浮物；由于卵囊比重大于水的比重，所以表层漂浮物再用水稀释离心后，卵囊沉淀将富集于离心管底部，我们可得到大量球虫卵囊。

4、球虫检测目前均是基于麦克马斯特计数板或血细胞计数板，在显微镜下进行人工检测。既要对球虫进行计数，以获取虫卵浓度，还需要对虫卵进行计数和孢子化程度分析，过程既费时费力，人为误差也无法控制。。

技术实现思路

1、本发明的目的提供一种球虫孢子化检测方法，解决上述现有技术问题中的一个或者多个。

2、根据本发明的一种球虫孢子化检测方法，包括：包括制备样品、加入计数板、拍摄多视野样本图像、al图像识别以及显示数据和报告步骤，其中，所述al图像识别步骤包括：

3、s1、将用来训练bp网络的样本进行预处理后计算出它们的不变矩值，然后将计算出的不变矩值进行统一处理后来训练bp网络，将bp网络训练到稳定判定球虫孢子化和未孢子化两种不变矩值的状态；

4、s2、在bp网络训练完成之后，把拍摄的样本按照相同的方法计算出不变矩值，利用训练好的bp网络进行拍摄的样本不变矩值的判别，并且把判别结果以计数形式的结果输出。

5、在一些实施方式中，所述结果至少包括拍摄样本中球虫的数量、孢子化球虫的数量以及未孢子化球虫的数量。

6、在一些实施方式中，所述用来训练bp网络的样本至少包括了堆形艾美尔球虫103的卵囊、布氏艾美尔球虫c的卵囊、巨型艾美尔球虫l的卵囊、和缓艾美尔球虫30的卵囊、毒害艾美尔球虫df的卵囊、早熟艾美尔球虫d的卵囊以及柔嫩艾美尔球虫mc的卵囊的一种或多种。

7、在一些实施方式中，所述用来训练bp网络的样本中每种虫卵都选取了超过100幅不同的数字图像。

8、在一些实施方式中，所述预处理的计算方法为傅立叶不变矩算法或其他预处理算法。

9、在一些实施方式中，所述bp网络为3层及以上网络结构，输出的结果为图像中球虫卵囊的像素直径、图像坐标位置、孢子化判断概率等信息。

10、有益效果：

11、本发明利用al图像识别来分析球虫卵囊的方法，可以快速、准确的分析球虫样本的浓度、孢子化率等参数，极大减少人为误差，大大提高分析的准确性和稳定性。

技术特征：

1.一种球虫孢子化检测方法，其特征在于，包括制备样品、加入计数板、拍摄多视野样本图像、al图像识别以及显示数据和报告步骤，其中，所述al图像识别步骤包括：

2.根据权利要求1所述的一种球虫孢子化检测方法，其特征在于，所述结果至少包括拍摄样本中球虫的数量、孢子化球虫的数量以及未孢子化球虫的数量。

3.根据权利要求1所述的一种球虫孢子化检测方法，其特征在于，所述用来训练bp网络的样本至少包括了堆形艾美尔球虫103的卵囊、布氏艾美尔球虫c的卵囊、巨型艾美尔球虫l的卵囊、和缓艾美尔球虫30的卵囊、毒害艾美尔球虫df的卵囊、早熟艾美尔球虫d的卵囊以及柔嫩艾美尔球虫mc的卵囊的一种或多种。

4.根据权利要求3所述的一种球虫孢子化检测方法，其特征在于，所述用来训练bp网络的样本中每种虫卵都选取了超过100幅不同的数字图像。

5.根据权利要求1所述的一种球虫孢子化检测方法，其特征在于，所述预处理的计算方法为傅立叶不变矩算法或其他图像预处理方法。

6.根据权利要求1所述的一种球虫孢子化检测方法，其特征在于，所述bp网络为3层及以上网络结构，输出的结果为图像中球虫卵囊的像素直径、图像坐标位置、孢子化判断概率等信息。

技术总结
本发明公开了一种球虫孢子化检测方法，包括：制备样品、加入计数板、拍摄多视野样本图像、Al图像识别以及显示数据和报告步骤。本发明利用Al图像识别来分析球虫卵囊的方法，可以快速、准确的分析球虫样本的浓度、孢子化率等参数，极大减少人为误差，大大提高分析的准确性和稳定性。

技术研发人员：章保平,汪立力
受保护的技术使用者：上海萌薇生物医疗科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/11