一种青蒿素的测定方法
【技术领域】
[0001]本发明属于提取物药用成分测定领域，具体为一种青蒿素的测定方法。
[0002]
【背景技术】
[0003]青篙素是从中药青篙中提取的有过氧基团的倍半萜内酯药物。青蒿素的分子式为C15H22O5，分子量为 282.33，组分的百分含量为:C 63.81%，H 7.85%，O 28.33%。
[0004]传统的青蒿素提取工艺是以萃取原理为基础，主要有乙醚浸提法和溶剂汽油浸提法。挥发油主要采用水蒸汽蒸馏提取，减压蒸馏分离，其工艺为:投料一加水一蒸馏一冷却一油水分离一精油；非挥发性成分主要采用有机溶剂提取，柱层析及重结晶分离，基本工艺为:干燥一破碎一浸泡、萃取(反复进行)一浓缩提取液一粗品一精制得到。
[0005]由于蚊虫叮咬人体，将其体内寄生的疟原虫传入人体而引起的。疟疾是以周期性冷热发作为最主要特征，脾肿大、贫血以及脑、肝、肾、心、肠、胃等受损引起的各种综合征，疟疾在中国的死亡率很高，而青蒿素是青蒿抗疟的有效成分，也是合成青蒿素系列药物的原料之一。当前青蒿素类的药物已经取代奎宁成为治疗疟疾的最安全有效的药物。作青蒿素用于疟原虫红细胞内期，适用于间日疟及恶性疟，特别是抢救脑型疟均有良效。其退热时间及疟原虫转阴时间都较氯喹短。对氯喹有抗药性的疟原虫，使用该品亦有效，正是由于青蒿素在市场收到的广泛关注，促进了我国青蒿素提取业的快速发展，同时也带动了青蒿种植业的发展。由于青蒿的使用量很大，市场需求很大，一些不法商贩也借机用劣质青蒿或伪品冒充正品出售，给青蒿素提取厂商带来了很大的损失。
[0006]
【发明内容】
[0007]本发明正是针对以上技术问题，提供一种测定方便、制作方法简单，易操作，准确性强的青蒿素的测定方法。
[0008]本发明的具体技术方案为:
一种青蒿素的测定方法，包括以下步骤:
a)制备青蒿素溶液和青蒿素对照品溶液，然后将青蒿素溶液和青蒿素对照品溶液进行稀释；青蒿素对照品为中国药品生物制品检定所制备的用于测定的对照样品。
[0009]b)吸取步骤a)中得到的溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上；
c)采用石油醚-丙酮-甲醇为展开剂，将其展开后取出并晾干，再喷以含香草醛的硫酸乙醇溶液，在在95°C加热10分钟至斑点清晰，置紫外灯光下检视，供试品与对照品在色谱图相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
[0010]所述步骤a)中制备青蒿素溶液的制备方法为:
将代检的青蒿叶干燥后进行粉碎，其粉碎粒度为50-80目筛，然后将该粉末放置在可密闭的瓶中，然后加入50°C左右的石油醚，在超声处理后冷却至室温，然后过滤即可，青蒿粉末与石油醚的质量比为1:50。
[0011]将青蒿素溶液和青蒿素对照品溶液进行稀释，其稀释均采用的溶液为丙酮，稀释后制成每Iml中含1mg青蒿素的溶液。
[0012]所述的展开剂中石油醚的温度为60?90°C，如果温度较低则青蒿素在石油醚中的展开会受到影响，不能完全展开，如果温度过高，则会让石油醚挥发，也不能很好的进行展开。
[0013]所述的展开剂中石油醚-丙酮-甲醇的体积比为8:2:0.5，展开剂的选择很关键，展开剂的选择不好，必然会影响后面再紫外线的照射下的斑点对应，也就不能很好的得出结论。
[0014]所述的展开是指须展开15cm以上，如果展开的宽度较小，不容易进行观察，即使在紫外线的照射下，得到的斑点，但是由于展开的范围较小，很有可能会使斑点重合，严重影响结果，影响最后的判断。如果展开过宽，则斑点模糊看不清楚，也不便于最后判断。
[0015]所述的香草醛的硫酸乙醇溶液中，香草醛的质量百分含量为2%，香草醛曾经也是香茅醛的别称，例如香草醛、羟基香草醛等，现已经改为香茅醛、羟基香茅醛。香草精是一种有机化合物，化学式为C8H803，学名3-甲氧基-4-羟基苯甲醛，为一种广泛使用的可食用香料。可在香荚兰的种子中找到，也可以人工合成是香草豆的香味成分。存在于甜菜、香草豆、安息香胶、秘鲁香脂、妥卢香脂等中。是一种重要的香料。
[0016]所述的香草醛的硫酸乙醇溶液中，硫酸乙醇的质量百分含量为15-25%，硫酸乙醇是一种常见的显色剂，方便显色后对其进行观察。
[0017]所述的紫外灯光的波长为365nm，紫外光波长比可见光短，但比X射线长的电磁辐射。紫外光在电磁波谱中范围波长为10-400 nm。这范围内开始于可见光的短波极限，而与长波X射线的波长相重叠，本测定中采用365nm这个长度，是为了便于观察。
[0018]本发明的有益效果在于:
(一)、测定的准确性高，测定方便，
(二 )、溶剂容易配制，操作简单。
[0019]
【具体实施方式】
[0020]为了使本发明实现的技术手段、发明特征、达成目的功效易于明白了解，下面举实例和结合工艺图对本发明进行进一步说明:
实施例1:
一种青蒿素的测定方法，包括以下步骤:
a)制备青蒿素溶液和青蒿素对照品溶液，然后将青蒿素溶液和青蒿素对照品溶液进行稀释；其稀释均采用的溶液为丙酮，稀释后制成每Iml中含1mg青蒿素的溶液。
[0021]b)吸取步骤a)中得到的溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上；
c)采用石油醚-丙酮-甲醇为展开剂，展开剂中石油醚-丙酮-甲醇的体积比为8:2:0.5，展开剂中石油醚的温度为70°C，将其展开15cm以上后取出并晾干，再喷以含香草醛的硫酸乙醇溶液，在在95°C加热10分钟至斑点清晰，置紫外灯光下检视，紫外灯光的波长为365nm，供试品与对照品在色谱图相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。其中，香草醛的质量百分含量为2%，硫酸乙醇的质量百分含量为18%，硫酸乙醇是一种常见的显色剂，方便显色后对其进行观察。
[0022]实施例2:
一种青蒿素的测定方法，包括以下步骤:
a)制备青蒿素溶液和青蒿素对照品溶液，然后将青蒿素溶液和青蒿素对照品溶液进行稀释；其稀释均采用的溶液为丙酮，稀释后制成每Iml中含1mg青蒿素的溶液。
[0023]b)吸取步骤a)中得到的溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上；
c)采用石油醚-丙酮-甲醇为展开剂，展开剂中石油醚-丙酮-甲醇的体积比为8:2:0.5,展开剂中石油醚的温度为80°C，将其展开15cm以上后取出并晾干，再喷以含香草醛的硫酸乙醇溶液，在在95°C加热10分钟至斑点清晰，置紫外灯光下检视，紫外灯光的波长为365nm，供试品与对照品在色谱图相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。其中，香草醛的质量百分含量为2%，硫酸乙醇的质量百分含量为20%，硫酸乙醇是一种常见的显色剂，方便显色后对其进行观察。
[0024]实施例3:
一种青蒿素的测定方法，包括以下步骤:
a)制备青蒿素溶液和青蒿素对照品溶液，然后将青蒿素溶液和青蒿素对照品溶液进行稀释；其稀释均采用的溶液为丙酮，稀释后制成每Iml中含1mg青蒿素的溶液。
[0025]b)吸取步骤a)中得到的溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上；
c)采用石油醚-丙酮-甲醇为展开剂，展开剂中石油醚-丙酮-甲醇的体积比为8:2:0.5,展开剂中石油醚的温度为90°C，将其展开15cm以上后取出并晾干，再喷以含香草醛的硫酸乙醇溶液，在在95°C加热10分钟至斑点清晰，置紫外灯光下检视，紫外灯光的波长为365nm，供试品与对照品在色谱图相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。其中，香草醛的质量百分含量为2%，硫酸乙醇的质量百分含量为15%，硫酸乙醇是一种常见的显色剂，方便显色后对其进行观察。
[0026]将实施例1至实施例3的方法测定的结果与传统的测定方法进行结果分析。传统的测定的方法为2010版中国药典修订增订内容中的高效液相色谱法，本发明中的测定结果无显著差异，方法可行。
[0027]对比例1:
以实施例3为基础，保持其余条件不变，仅改变其中展开剂中石油醚-丙酮-甲醇的体积比为8:3:0.5。其展开效果不好，严重影响在紫外线的照射下的测定和判断。
[0028]对比例2:
以实施例2为基础，保持其余条件不变，仅改变其中展开剂中石油醚-丙酮-甲醇的体积比为9:2:0.5，其展开效果不明显，严重影响在紫外线的照射下的测定和判断。
【主权项】
1.一种青蒿素的测定方法，其特征在于包括以下步骤: a)制备青蒿素溶液和青蒿素对照品溶液，然后将青蒿素溶液和青蒿素对照品溶液进行稀释； b)吸取步骤a)中得到的溶液各10μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上； c)采用石油醚-丙酮-甲醇为展开剂，将其展开后取出并晾干，再喷以含香草醛的硫酸乙醇溶液，在在95°C加热10分钟至斑点清晰，置紫外灯光下检视，供试品与对照品在色谱图相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。2.根据权利要求1所述的青蒿素的测定方法，其特征在于:所述步骤a)中将青蒿素溶液和青蒿素对照品溶液进行稀释，其稀释均采用的溶液为丙酮，稀释后制成每Iml中含1mg青蒿素的溶液。3.根据权利要求1所述的青蒿素的测定方法，其特征在于:所述的展开剂中石油醚的温度为60?90 °C。4.根据权利要求1所述的青蒿素的测定方法，其特征在于:所述的展开剂中石油醚-丙酮-甲醇的体积比为8:2:0.5。5.根据权利要求1所述的青蒿素的测定方法，其特征在于:所述的展开是指须展开15cm以上。6.根据权利要求1所述的青蒿素的测定方法，其特征在于:所述的香草醛的硫酸乙醇溶液中，香草醛的质量百分含量为2%。7.根据权利要求1所述的青蒿素的测定方法，其特征在于:所述的香草醛的硫酸乙醇溶液中，硫酸乙醇的质量百分含量为15-25%。8.根据权利要求1所述的青蒿素的测定方法，其特征在于:所述的紫外灯光的波长为365nm0
【专利摘要】<b>本发明属于提取物药用成分测定领域，具体为一种青蒿素的测定方法。该测定方法包括以下步骤：a）制备青蒿素溶液和青蒿素对照品溶液，然后将青蒿素溶液和青蒿素对照品溶液进行稀释；b）吸取步骤a）中得到的溶液各10</b><b>μ</b><b>l</b><b>，分别点于同一硅胶G薄层板上；</b>c<b>）采用石油醚-丙酮-甲醇为展开剂，将其展开后取出并晾干，再喷以含香草醛的硫酸乙醇溶液，在在95℃加热10分钟至斑点清晰，置紫外灯光下检视，供试品与对照品在色谱图相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。本方法中的测定方法，其准确性高，测定方便，溶剂容易配制，操作简单。</b>
【IPC分类】G01N30/90
【公开号】CN105651928
【申请号】
【发明人】潘荣忠
【申请人】成都市创为凯科技信息咨询有限公司
【公开日】2016年6月8日
【申请日】2014年11月14日