一种氨溴索含量紫外分光光度测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及氨溴索含量的测定方法，具体地说，涉及一种利用紫外分光光度计测 定氨溴索含量的方法。
【背景技术】
[0002] 盐酸氨溴索葡萄糖注射液中对主要成分氨溴索的含量检查一直是采用HPLC方法 的，但是在实际生产中，对该品种的中间产品中氨溴索的含量控制采用HPLC方法来检查， 将至少需要一个小时，这必将影响其产能的发挥，且药液长时间以50°C左右的温度在稀配 罐中放置，也会影响其产品质量。因此在中间产品的检查时，需要带来一种快速高效的检查 方法，尽可能的缩短产品在配制过程的时间。
[0003] 由于氨溴索在使用HPLC方法时，采用的是紫外检测器，那么使用紫外分光光度法 来对该品种实施快速检测将能够满足工业化大生产的需要。但在试验中，我们发现，如采用 5 %葡萄糖作为空白溶液，并用空白溶液配制氨溴索的对照品，对盐酸氨溴索葡萄糖注射液 使用紫外方法进行检查时，主要会出现以下问题：（1)盐酸氨溴索葡萄糖注射液在90°C以 上的高温作用下，氨溴索自身会发生水解，同时也有可能与葡萄糖发生聚合并结构重排，这 样产生的氨溴索有关物质，在使用紫外检查时，会产生很大的吸收，因此，如氨溴索在配制 过程的时间越长，那么对产品质量就越不利，也造成同一批产品在不同时间段取样，用紫外 方法做的结果有较大差异；经高温湿热灭菌后的产品，由于其有关物质的产生，在使用紫外 方法检测时，其检测结果要比HPLC方法高7%~10%。（2)在一定范围内，产品的pH值越 高，其测定值越小，盐酸氨溴索在pH值3. 5和pH值5. 0两个不同的点检查（产品内控标准 的上下限），其含量检查的偏差达10~16%左右。
【发明内容】
[0004] 为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种利用紫外分光光度计 测定氨溴索含量的方法。
[0005] 为了实现本发明目的，本发明首先提供一种氨溴索含量紫外分光光度测定方法， 包括如下步骤：
[0006] 1)将盐酸氨溴索的标准样品溶于0· 008mol/L±10%盐酸溶液中，制备出标准样 品溶液，浓度为75ug/ml~1. 2mg/ml ;
[0007] 2)将以上标准样品溶液放入紫外分光光度计进行检测，检测波长为244nm，所得 吸光度绘制标准曲线，得出线性回归方程；
[0008] 3)将供试品在244nm的波长下检测吸光度，带入线性回归方程进行计算，计算得 出供试品中氨溴索的含量。
[0009] 进一步地，在检测过程中，控制温度在50°C以下。
[0010] 进一步地，将供试品的pH值调节为3. 8±0. 2后，再进行紫外分光光度检测。
[0011] 进一步地，当所述供试品为盐酸氨溴索葡萄糖注射液中间体产品时，可直接上样 检测。
[0012] 本发明方法也可用于盐酸氨溴索原料含量的检验，当用于盐酸氨溴索原料的含量 检查时，可选择用纯化水溶解，再用盐酸调节其pH值至3. 8±0. 2,或者采用与对照品相同 的配制方法：将盐酸氨溴索原料样品溶于0. 008mol/L±10%盐酸溶液中，制备出标准样品 溶液，浓度为75ug/ml~1. 2mg/ml。
[0013] 作为优选，在调节供试品pH时使用盐酸溶液。
[0014] 本发明的有益效果在于：
[0015] 本发明通过实验研究发现，在对盐酸氨溴索葡萄糖注射液进行中间体控制时，由 于产品未灭菌，且当氨溴索溶解后，其药液温度不大于50°C，经检查，放置两小时后，其有关 物质基本无变化。说明中间体检查时，应保证药液的温度不能过高，否则氨溴索有关物质 (如氨溴索杂质B或杂质E)的产生，将对结果产生较大偏差。
[0016] 本发明通过实验研究还发现，当pH值在3. 6~4. 0范围内时，分别采用紫外方法 和HPLC方法检测氨溴索的含量，检测结果的误差为1 %以内，说明pH值在此范围内，使用紫 外检测方法有更好的准确度。当盐酸溶液的浓度在〇. 〇〇8mol/L±10%时，配制的对照品溶 液的pH值大约在3. 6~4. 0范围内，且选用该浓度的盐酸溶液与5%葡萄糖溶液做空白对 照，其吸收度相当。
[0017] 综合上述研究的结果，确定本发明技术方案，解决盐酸氨溴索葡萄糖注射液中间 产品中快速检测氨溴索含量的问题。本发明经方法学验证后，当氨溴索含量在75ug/ml~ 1. 2mg/ml之间时，其线性方程的相关系数为0. 995 ;连续检测5次，其RSD = 0. 36,说明其 精密度良好；80%、100%和120%组的回收率均小于1. 2%，准确度符合要求；选取三组样 品，选用该方法和HPLC方法对每组样品各测三次，各组数据间RSD均在1. 1 %之内，说明在 此条件下选用紫外方法检测，其耐用性良好。
【附图说明】
[0018] 图1为本发明实施例1中根据标准样品溶液测得的吸光度绘制的标准曲线。
【具体实施方式】
[0019] 以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
[0020] 实施例1
[0021] 1、精密称取盐酸氨溴索的标准样品（来源为中国药品生物制品检定所，批号 100599-201203)溶于0. 008mol/L盐酸溶液中，制备得到浓度分别为72ug/ml、144ug/ml、 288ug/ml、576ug/ml、l. 152mg/ml的标准样品溶液；测定各组对照品的pH值，其结果如下：
[0022]
[0023]
[0024] 以上各组的pH值均在3. 8±0. 2范围内，满足检测要求。
[0025] 2、用0. 008mol/L盐酸溶液做空白校正后，将以上标准样品溶液放入紫外分光光 度计进行检测，检测波长为244nm，根据所得吸光度绘制标准曲线（见图1)，得出线性回归 方程；
[0026]
[0027] 根据以上数据，计算回归为A = 0.001C+0. 0091，R2 = 0.9999。
[0028] 3、使用盐酸溶液调节供试品（盐酸氨溴索葡萄糖注射液来源：安徽丰原药业股份 有限公司生产，批号分别为131022K1、131022K2、131022K3的中间产品）pH为3. 8±0. 2,控 制温度在50°C以下，在244nm的波长下检测吸光度的结果如下：
[0029]
1234567 实施例2 2 使用以上五组对照溶液作标准曲线，对盐酸氨溴索原料（来源：北京太洋药业有 限公司，批号：M120912、M121011和M130112)各精密称取约30mg，也使用实施例1中的 0. 008mol/L盐酸溶液进行稀释至100ml，同法测定，其结果如下： 3
4 5 实施例3 6 使用以上五组对照溶液作标准曲线，对盐酸氨溴索原料（来源：北京太洋药业有 限公司，批号：M120912、M121011和M130112)各精密称取约30mg，使用含0. 008mol/L盐酸 的5%葡萄糖溶液进行稀释至100ml，同法测定，其结果如下： 7
[0037] 根据实施例3,说明了稀释液中是否添加5%的葡萄糖对含量检测结果基本不产 生影响。因此在选择稀释液的时候，只选用稀盐酸，而不必加入葡萄糖。
[0038] 实施例4
[0039] 使用以上五组对照溶液作标准曲线，对盐酸氨溴索原料（来源：北京太洋药业有 限公司，批号通120912、1121011和1130112)各精密称取约3011^，使用自配的5%葡萄糖溶 液进行稀释至100ml，同法测定，其结果如下：
[0040]
[0041 ] 根据?述试验结果可知，在没有加入盐-调节pH值&情况下，以,5 %葡萄糖做为 溶质来配制供试品，其测定的吸收值明显偏小，这可能是由于供试品的pH值均偏高，部分 盐酸氨溴索可能解离为氨溴索碱，导致紫外吸收值减少，最终检查结果即出现明显偏小的 情况。
[0042] 虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在 本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因 此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
【主权项】
1. 一种氨溴索含量紫外分光光度测定方法，其特征在于，包括如下步骤： 1) 将盐酸氨溴索的标准样品溶于〇.〇〇8mol/L±10%盐酸溶液中，制备出标准样品溶 液，浓度为 75ug/ml ~1. 2mg/ml ; 2) 将以上标准样品溶液放入紫外分光光度计进行检测，所得吸光度绘制标准曲线，得 出线性回归方程； 3) 紫外分光光度计检测供试品吸光度，带入线性回归方程进行计算，计算得出供试品 中氨溴索的含量。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，紫外分光光度计检测波长为244nm。3. 根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，将供试品的pH值调节为3. 8±0. 2 后，再进行紫外分光光度检测。4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在检测过程中，控制温度在50°C以下。5. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述供试品为盐酸氨溴索葡萄糖注射液 中间体产品。6. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，使用盐酸溶液调节供试品pH。
【专利摘要】本发明提供了一种氨溴索含量紫外分光光度测定方法，包括如下步骤：1)将盐酸氨溴索的标准样品溶于0.008mol/L±10％盐酸溶液中，制备出标准样品溶液，浓度为75ug/ml～1.2mg/ml；2)将以上标准样品溶液放入紫外分光光度计进行检测，检测波长为244nm，所得吸光度绘制标准曲线，得出线性回归方程；3)将供试品在244nm的波长下检测吸光度，带入线性回归方程进行计算，计算得出供试品中氨溴索的含量。该方法精密度、准确度良好，有效避免了检测过程中由于氨溴索衍生物的产生导致检测结果不准确的缺陷。
【IPC分类】G01N21/33
【公开号】CN105675523
【申请号】
【发明人】张爱文, 汪君, 洪厚林, 汪林
【申请人】蚌埠丰原涂山制药有限公司
【公开日】2016年6月15日
【申请日】2014年11月17日