一种用于提取金线莲苷的分体式连接加压色谱柱的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及色谱柱领域，尤其涉及一种用于提取金线莲苷的分体式连接加压色谱柱。
【背景技术】
[0002]目前，市面上的许多加压色谱柱在分离提取中存在诸多缺点，比如阀门处采用玻璃材质阀门，不耐酸碱，长期使用后，会出现漏液现象，且长期放置不用可能造成粘结，以致阀栓锁死，造成色谱柱不能使用。而且大多数加压色谱柱均采用蠕动栗送压，整体玻璃连接，以增加耐压性，但对色谱柱的清洁和使用照成不便。
【实用新型内容】
[0003]本实用新型的目的在于提供一种用于提取金线莲苷纯度高的分体式连接加压色谱柱。
[0004]为实现上述目的，本实用新型提供一种用于提取金线莲苷的分体式连接加压色谱柱，其特征在于，由血压加压球(I)、皮管(2)、加压头(3)、梨型球漏斗(4)、色谱柱(5)通过阀门一(6)、阀门二(7)、阀门三(8)、阀门四(9)依次相连组成；所述色谱柱(5)配聚四氟乙烯材料的阀门，标准磨口内径/外径:24/30mm;所述梨型球漏斗(4)配聚四氟乙烯材料的阀门，标准磨口内径/外径:24/30mm。
[0005]进一步，所述色谱柱(5)的内径为27mm，长度30cm。
[0006]进一步，所述色谱柱(5)的内径15mm，长度30cmo
[0007]进一步，所述梨型球漏斗的体积为250ml或500ml。
[0008]进一步，所述色谱柱中样品层硅胶为100-200目的分析纯0.6-0.8cm厚(起吸附样品的作用)，上端铺60-80目的分析纯粗硅胶0.5cm和一团棉花(起缓冲压力直接接触样品层，将样品层平面冲凹，影响分离效果)，下端硅胶为10-40um的色谱纯6-8cm长(起分离纯化的作用)。
[0009]本实用新型采用聚四氟乙烯阀门，耐酸碱，不易造成阀门漏液和粘结等现象。
[0010]尤其对于压力需求小的色谱系统，采用本实用新型的分体式链接，便于破损时更换和清洁，不因某个部位破损，就需更换整根色谱柱，以减少实验成本和加快实验进度。采用四氟乙烯材料的阀门，可以防止阀门的阀栓在压力下冲出和阀栓粘结、漏液等不能使用等情形。而且采用血压加压球加压，使用时再打开阀门3，对提供压力需求小的色谱系统可以一次性提供压力，排除了蠕动栗循环反复供压的压力不稳定问题，提高色谱体系的分离效果。
[0011]本实用新型的装置用于金线莲粗分离的提取液进行分离纯化而获得金线莲苷纯品化合物，采用干法上样，正相硅胶色谱法提取，纯度均在95%以上。
【附图说明】
[0012]图1是本实用新型的连接结构图。
【具体实施方式】
[0013]下面详细描述本实用新型的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本实用新型，而不能理解为对本实用新型的限制。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
[0014]实施例:
[0015]本实施例结合图1进行说明。
[0016]图1中，血压加压球(1)、皮管(2)、加压头(3)、梨型球漏斗(4)、色谱柱(5)通过阀门一(6)、阀门二(7)、阀门三(8)、阀门四(9)依次相连组成；所述色谱柱(5)配聚四氟乙烯材料的阀门，标准磨口内径/外径:24/30mm;所述梨型球漏斗(4)配聚四氟乙烯材料的阀门，标准磨口内径/外径:24/30mm。其中所述色谱柱(5)的内径为27mm，长度30cm或内径15mm，长度30cm。所述梨型球漏斗的体积为250ml或500ml。所述色谱柱中样品层娃胶为100-200目的分析纯0.6-0.8cm厚(起吸附样品的作用)，上端铺60-80目的分析纯硅胶0.5cm和一团棉花(起缓冲压力直接接触样品层，将样品层平面冲凹，影响分离效果)，下端娃胶为10-40um的色谱纯6-8cm长(起分离纯化的作用)。
[0017]将金线莲干品以石油醚索提2h后，再用甲醇索提2h获得提取液，将获得的提取液浓缩至干，再加入蒸馏水，静置过夜后，抽滤除去不溶物，浓缩至适量以过DlOl大孔吸附树脂柱。采用湿法上样，并分别用蒸馏水2个柱体积(主要是为了去除金线莲中的多糖、蛋白等大分子物质及离子)、8%甲醇(v/v)2-3个柱体积(获得高浓度的金线莲粗提取物)、100%甲醇2个柱体积(大孔吸附树脂的洗脱再生)。最后，将8%甲醇(v/v)的洗脱液浓缩至膏状(不含水)，既为金线莲粗分离的提取液浸膏。
[0018]样品:金线莲粗分离的提取液浸膏。
[0019]上样方法:干法上样。内径为27mm，长度30cm的色谱柱上样量金线莲粗分离的提取液浸膏约1-1.2g,内径为15mm，长度30cm的色谱柱上样量金线莲粗分离的提取液浸膏约 0.6-0.8g，
[0020]提取方法:正相硅胶色谱法。
[0021]使用步骤:
[0022]1、金线莲粗分离的提取液浸膏(浓缩至不含水)，加入l_3ml甲醇以溶解样品，甲醇量越少越好，倒入瓷质蒸发皿中，并拌入硅胶(分析纯100-200目)适量至搅拌均匀且无液体后，置于水浴锅(T〈60°C )上蒸约30-45min后(消除溶剂甲醇的干扰)，下端铺硅胶(色谱纯，10-40um)柱长为样品层厚7-12倍，装好后用皮管连接色谱柱下端，用真空栗抽压至硅胶层厚度约6-8cm不再改变，中间铺刚蒸好且放凉的拌有样品的硅胶(分析纯，100-200目)装好后用皮管连接色谱柱下端，用真空栗抽压至样品层厚度约0.6-0.8cm不再改变，上端铺0.5cm硅胶(分析纯，60-80目)装好后用皮管连接色谱柱下端，用真空栗抽压至不再改变，最后再加一团棉花，起缓冲洗脱溶剂的作用。
[0023]2、实验开始前，关闭阀门3，取下加压头，向梨形球中加入100ml-200ml洗脱剂(氯仿:甲醇:冰醋酸=80:20:2),装上加压头，拧紧。打开阀门1、阀门2，阀门4，手拧血压加压球加压，加压3-5次时，迅速打开阀门3，让洗脱剂流入色谱柱。
[0024]3、在色谱柱下方放置接样瓶，待液体流出后，每瓶装约3_5ml换一瓶顺序接样，把接样瓶中液体进行薄层色谱分析来确定金线莲苷是否全部洗脱完。若没有，先缓慢关闭阀门3(不可以直接关闭阀门1，色谱柱中的硅胶可能被向上的压力吸起，而发生断层，影响柱效)，在关闭阀门1，重新加入100ml-200ml洗脱剂(氯仿:甲醇:冰醋酸=80:20:2)重复之前操作。把接样瓶中液体进行薄层色谱(展开剂为三氯甲烷:甲醇:乙酸=85:13:2)分析，用(2% ) 3，5 —二硝基苯甲酸乙醇溶液(g/v)，lmol/L氢氧化钾乙醇溶液(g/v)显色剂喷雾显色，在Rf= 0.2-0.3出现的紫红色斑点即为金线莲苷。将除此斑点外无其他斑点的接样瓶样品合并浓缩，既得金线莲苷。
[0025]4、实验完成后，及时拆卸各组件并进行清洗，以防止磨口处被洗脱剂粘结。
[0026]本实施例最后得到的金线莲苷纯度在95%以上。
[0027]尽管上面已经示出和描述了本实用新型的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本实用新型的限制，本领域的普通技术人员在不脱离本实用新型的原理和宗旨的情况下在本实用新型的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
【主权项】
1.一种用于提取金线莲苷的分体式连接加压色谱柱，其特征在于，由血压加压球(I)、皮管(2)、加压头(3)、梨型球漏斗(4)、色谱柱(5)通过阀门一(6)、阀门二(7)、阀门三(8)、阀门四(9)依次相连组成；所述色谱柱(5)配聚四氟乙烯材料的阀门，标准磨口内径/外径:24/30mm;所述梨型球漏斗(4)配聚四氟乙烯材料的阀门，标准磨口内径/外径:.24/30mmo2.权利要求1所述用于提取金线莲苷的分体式连接加压色谱柱，其特征在于，所述色谱柱(5)的内径为27mm，长度30cmo3.权利要求1所述用于提取金线莲苷的分体式连接加压色谱柱，其特征在于，所述色谱柱(5)的内径15mm，长度30cm。4.权利要求1所述用于提取金线莲苷的分体式连接加压色谱柱，其特征在于，所述梨型球漏斗的体积为250ml或500ml。5.权利要求1所述用于提取金线莲苷的分体式连接加压色谱柱，其特征在于，所述色谱柱中样品层硅胶为100-200目的分析纯0.6-0.8cm厚，上端铺60-80目的分析纯粗硅胶.0.5cm和一团棉花，下端娃胶为10-40um的色谱纯6_8cm长。
【专利摘要】本实用新型公开了一种用于提取金线莲苷的分体式连接加压色谱柱。由血压加压球、皮管、加压头、梨型球漏斗、色谱柱通过阀门一至四依次相连组成；所述色谱柱配聚四氟乙烯材料的阀门和梨型球漏斗配聚四氟乙烯材料的阀门，标准磨口内径/外径均为24/30mm。采用所述分体式连接加压色谱柱，便于破损时更换某个破损部位和清洁。采用四氟乙烯材料的阀门，可防止阀门的阀栓在压力下冲出和阀栓粘结以致不能使用等情形。且采用血压加压球加压，使用时再打开阀门三，对提供压力需求小的色谱系统可一次性提供压力，排除蠕动泵循环反复供压的压力不稳定，提高色谱体系的分离效果。用于金线莲粗分离的提取液分离纯化金线莲苷，纯度均在95％以上。
【IPC分类】C07H17/04, B01D15/22, C07H1/08
【公开号】CN205182253
【申请号】CN201520624357
【发明人】庄娜丽, 吴立荣, 单世斌
【申请人】福建金草生物集团股份有限公司
【公开日】2016年4月27日
【申请日】2015年8月19日