技术编号:18398723
提示:您尚未登录,请点 登 陆 后下载,如果您还没有账户请点 注 册 ,登陆完成后,请刷新本页查看技术详细信息。本发明属于分子生物学技术领域,特别涉及一种通过多聚核苷酸激酶构建长片段目的基因的方法及其应用。背景技术DNA片段之间的连接是通过DNA连接酶的催化实现的。DNA连接酶催化具有平末端或互补粘性末端的DNA片段间相邻碱基通过3’羟基末端,5’磷酸末端形成磷酸二酯键连接起来,该反应为需能反应,通常需要加入ATP或NADH,DNA连接酶对粘性末端的连接效率要远高于对平末端的连接效率。在基因工程实验中,最常用连接酶是的来源于T4噬菌体的T4 DNA连接酶。其对于平末端或互补的粘性末端可直接进行连接反应。一...
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