促进载体和插入片段连接的方法技术资料下载

技术编号:399980

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技术领域本发明属于分子生物学领域,具体而言涉及一种通过插入片段的去磷酸化。背景技术DNA片段的酶切连接,载体的构建最常用和经典的方法是通过限制性内切酶对载体和插入片段进行酶切,然后利用T4DNA连接酶将载体与目的片段连接成我们想要的DNA 片段。碱性磷酸酶在这个过程当中常被用做去磷酸化载体DNA 5’端磷酸基团,从而防止载体自身的连接。而插入片段与载体的连接其实是先由两片段连接成为一条线状DNA,然后在连接为环化DNA,这只是我们期望的情况,连接体系中还存在插入片段与插入片段的连接,载体与载体的连接,而这种情况DN...
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