技术编号:434059
提示:您尚未登录,请点 登 陆 后下载,如果您还没有账户请点 注 册 ,登陆完成后,请刷新本页查看技术详细信息。技术领域本发明涉及一种新的基因克隆方法,尤其涉及一种,可以用于重组蛋白表达载体构建,属于基因工程技术领域。背景技术 基因克隆技术的出现极大地促进了现代基因工程、蛋白质工程的发展。传统基因克隆技术涉及目标基因DNA片段与质粒载体的限制性核酸内切酶消化、连接酶连接环化目标基因与质粒两步必不可少的操作。由于限制性核酸内切酶消化反应与DNA连接酶反应,特别是限制性核酸内切酶消化反应,效率的高低直接决定着目标基因克隆能否成功。虽然利用碱性磷酸单酯酶除去线性化载体的5’磷酸基团,会大大提高阳性克隆百分比,但该操作异常繁琐,手法...
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