技术编号:512940
提示:您尚未登录,请点 登 陆 后下载,如果您还没有账户请点 注 册 ,登陆完成后,请刷新本页查看技术详细信息。专利摘要本发明公开了,包括以下步骤(1)根据基因定点突变的碱基位置设计包含修复位点的正、反向引物;(2)以含有突变基因的质粒为模板,加入正、反向引物,在高保真DNA聚合酶的作用下进行环状延伸PCR;(3)采用DpnI酶将琼脂糖凝胶电泳检测正确的步骤(2)产物进行酶切,去除质粒模板得到具有修复位点的带有缺刻的开环质粒;转化大肠杆菌感受态细胞,挑选转化子测序验证。本发明的方法正向引物、反向引物设计简便,扩增效率高;引物与模板的结合效率高,目的条带易得;修复成功率高。不需胶回收、无需连接与筛选,是一种简便可行、成功率高、...
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该专利适合技术人员进行技术研发参考以及查看自身技术是否侵权,增加技术思路,做技术知识储备,不适合论文引用。