技术编号:6227542
提示:您尚未登录,请点 登 陆 后下载,如果您还没有账户请点 注 册 ,登陆完成后,请刷新本页查看技术详细信息。本发明提供了,是使用酶联比色法测定磷脂酶Dα活性的方法。其技术方案是以磷脂酰胆碱为底物,磷脂酶Dα催化水解其末端的磷酸二酯键生成磷脂酸和胆碱,胆碱在胆碱氧化酶的催化作用下生成甜菜碱和H2O2,生成的H2O2在过氧化物酶催化下将4-氨基安替匹林和重蒸酚氧化成粉红色物质,测定该粉红物质的吸光度值,并根据事先制作的胆碱标准曲线,来确定相应的胆碱含量,并以此推算出磷脂酶Dα的活性。在200ul磷脂酶Dα的反应体系中,蛋白含量和Ca2+浓度在10ug和10mM为宜。...
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