一种双barcode二代测序文库的构建方法技术资料下载

技术编号:9838524

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传统桑格测序利用DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP),并混入限量的不同颜色荧光标记的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-0H基团,使延长的寡聚核苷酸选择性地在G、A、T或C处终止。终止点由反应中相应的双脱氧而定。它们具有共同的起始点,但终止在不同的核苷酸上,可通过毛细管电泳分离大小不同的片段,观察不同大小片度的荧光标记来推断序列。第二代测序...
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