专利名称：一种含笑属杂交种的培育方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域植物杂交种的培育及选育方法，具体地涉及以木兰科含笑属为亲本(云南含笑(M.yunnanensis)(♀)×金叶含笑(M.foveolata)(♂))培育杂交种的方法。
背景技术：
木兰科树种以花大色艳、香味浓郁著称，世界有木兰科植物约270种，由于物种本身的原因和人为原因，有约1/3种木兰科植物趋于濒危状态，近年来许多植物学家开展了引种栽培工作，便于保护木兰科基因资源。木兰科植物种类虽然较多，栽培历史悠久，如缅桂(白兰)、玉兰、二乔木兰等，但被广泛应用的种类并不太多，这主要受制于木兰科植物本身的观赏性状和适应性。而木兰科植物的研究多集中在系统分类、引种栽培方面。近年来，虽然其开发利用的研究力度有所增加，但杂交育种研究成功尚不多见。目前，选择和杂交是提高木兰科植物观赏价值，培养园艺新品种的主要途径，但选择云南特有的木兰科含笑属植物进行杂交育种研究，现有技术中尚未有报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种以云南特有的木兰科含笑属植物为亲本的杂交育种方法。
为了实现上述的发明目的，本发明提供了如下的技术方案木兰科含笑属杂交种的培育方法，选择含笑属(Michelia)植物作为杂交亲本，云南含笑(M.yunnanensis)(♀)×金叶含笑(M.foveolata)(♂)，在父本的盛花期采花，在单花前期(半开)时采集，然后去掉花被片和雌蕊群，雄蕊群将摊开，在室温下花药自然裂开，花粉散出，收集花粉，置于冰箱中2-6℃干燥保存；在母本花朵将开未开时，去掉花被片和雄蕊，用父本的新鲜花粉或短期保存的花粉给其授粉，后套袋，约1星期后去袋，等果实变成红色或橙红色时采集，等自然阴干蓇葖果裂开种子散出后收集种子，洗去油质外种皮，在室温下保湿沙藏，第二年早春播种。
上述的培育方法，花粉采集后用低温干燥的贮藏方法。
上述的培育方法，早上800-900为最佳授粉时间，上述的培育方法，采用蒙导方法克服杂交不亲和，母本花粉经处理后，在培养基上检测其活性，经检测无活性的母本花粉与父本花粉混合进行受粉。
下面用本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但本发明的内容并不局限于此。
实施例11.花粉采集及保存在父本的盛花期采花，在单花前期(半开)时采集，然后去掉花被片和雌蕊群，留雄蕊群在纸上摊开，在室温下花药自然裂开，花粉散出，收集花粉，置于冰箱中2-6℃干燥保存。由于木兰科植物花粉的寿命短而不耐久藏，对花期不遇类群间的杂交来说，花粉贮藏极为关键。在本发明中，采用低温干燥贮藏花粉(硅胶干燥，于2-4℃中贮藏)，可使花粉的寿命延长至2个月左右。
2.杂交授粉该步骤的关键在于准确的掌握雌蕊的可授期及最佳授粉期，这就要对每一个亲本的自然传粉机制等开花生物学特性及繁育系统熟练掌握。对于含笑属植物而言，一般早上800-900为最佳授粉时间，在母本花朵将开未开时，去掉花被片和雄蕊，用父本的新鲜花粉或短期保存的花粉给其授粉，后套袋，约1星期后去袋，注意观察其发育情况。在该过程中为克服亲本间的杂交不亲和性，提高杂交亲和性，本发明采用蒙导等方法即母本花粉经处理后，在培养基上检测其活性，经检测无活性的母本花粉与父本花粉混合进行受粉，能克服部分杂交组合亲本间的不亲和性而得到杂交种。
3.种子采集贮藏当果实变成红色或橙红色时采集，自然阴干等蓇葖果裂开种子散出后收集种子，洗去油质外种皮，在室温下保湿沙藏。由于木兰科植物的种子含油量高，易霉烂而失去萌发力，且种子不耐干旱。本发明采用去外种皮、湿藏是保持其萌发力的有效措施。
4.育苗贮藏的种子于第二年春播种。贮藏、播种处理得当可达到90％左右的发芽率。苗在3-5厘米时即可分苗。
5.早期鉴定本发明采用细胞学、等位酶的方法对杂交种进行早期鉴定，及早淘汰非杂交种，节省时间和费用，有目的的培育真正的杂交种而大大的提高了育种效率。对杂交组合的亲本及F1代的染色体进行了研究比较，因含笑属植物均为二倍体，只能从形态特征上进行比较，如随体的有无及数目、端部着丝粒等特征性染色体的有无及数目等，或进行核型分析来进行比较。等位酶方面，用PGD、PGM、ACD、IDH、MDH等十三种同工酶在杂交组合中进行了实验，都显出了较为清晰的酶带，PGD、PGM等较少的酶其酶谱在双亲中不同而可用于鉴定杂交种(杂交种同时具双亲的酶带)。
6.杂种F1代的生物学特性观察及品种选育经过多年培育观察，杂交种表现出了较好的杂种优势，苗生长旺盛生长速度快。F1代表现出了杂交性状，形态特征介于两亲本之间。最为突出的优势是表现出特别明显的早熟性状，从实生苗到开花只需2-3年，98年得到的种子育苗，于2001年即开始开花。对盆载、荫棚定植及室外定植植株的生长发育规律与适应性进行了研究，结果表明该杂交种在三种条件下都表现出了很好的适应性，且特别耐旱耐贫瘠。证明其对滇中地区的环境有较强的适应性，可进行推广栽培。
7.繁殖技术研究为了保证优良性状的稳定性，将新的优良性状固定下来，对杂交种进行了扦插、嫁接等繁殖试验，掌握了无性繁殖的方法与技术。实验结果表明，在一定的条件下杂交种易于进行无性繁殖。为它的推广应用提供了可能性。
本发明育成的杂交种为常绿灌木，树姿优美，生长快，开花周期短，花繁叶茂，花色丰富，花型妩媚动人，姿色典雅，芳香别致。适应性较父母本都强，繁殖、栽培容易，抗旱、抗病虫害能力强，较耐贫瘠，是适合植物园、庭园、街道等多种环境露地、盆栽的优良园艺新品种。可推广应用于亚热带地区及温带部分地区的植物园、庭园、街道绿化上，亦可做盆花栽培。
本发明杂交种为云南含笑和金叶含笑的种间杂交种，该杂交种表现出较好的杂交优势，结合了双亲的优良性状。其中母本产云南中南部，父本紫花含笑引自广西。具体与亲本性状比较如下母本的主要性状特征常绿灌木，枝叶繁茂高达4米，叶革质，倒卵形、狭倒卵形，叶上面深绿色有光泽，下残留有平付毛。花纯白色或乳白色，芳香，长3-3.5cm，宽1-1.5，雄蕊黄绿色或淡黄色，雌蕊群绿色被银白色或红褐色细毛，胚珠5-6枚。花期较早3-4月，花较大而多成串或成簇，单花期和总花期都相对较长。
父本的主要性状特征乔木高达30米，叶厚革质叶厚革质，长圆状椭圆形或阔披针形，长17-23cm，宽6-11cm，上面深绿色有光泽，下面被红铜色短绒毛，花被片9-12，淡黄绿色，外轮3片，阔倒卵形，长6-7cm，中内轮倒卵形，较狭小；雄蕊黄色花丝深紫色，雌蕊群柄长1.7-2cm，被银灰色短绒毛，胚珠8枚。花期3-5月。
杂交种的主要性状叶形似父本较长，阔披针形，长16-18cm，宽4.5-5.5cm，上深绿色有光泽下面被红铜色短绒毛。花明显较亲本大，花被片11-12，长5-6cm，宽2.5-3.5cm，花径可达8-10cm，这么大的花在含笑属中实为罕见。淡黄色，雌蕊群柄长2-2.5cm，远高出雌蕊群似父本。花香似父本，生长迅速，开花周期短，从实生苗到开花只需2-3年，花期介于两亲本之间。
从上述可以看出，与现有技术相比，本发明的优益性在于1.杂交种的观赏价值高。本发明在木兰科植物的含笑属内种间进行的杂交试验基础上，选择和培育了新杂交种Michelia yunnanensis♀×M.calcicola♂；M.yunnanensis ♀×M.crassipes♂；M.yunnanensis♀×M.
foveolata♂，均为为常绿灌木，生长快，树姿优美，花繁叶茂，花色丰富，花型妩媚动人，姿色典雅，芳香别致。
2.适应性比较强，繁殖、栽培容易，抗旱、抗病虫害能力强，较耐贫瘠，是适合植物园、庭园、街道等多种环境露地、盆栽的优良园艺新品种。
3.开花周期短，特别早熟，两年的实生苗即可开花，这在木兰科中实属首创。
4.本发明成功地将细胞学、等位酶等方法应用在木兰科植物杂交种的早期鉴定上，提高了杂交育种的效率和目的性，也为树木杂交育种提供了一套可借鉴的早期鉴定方法。
5.发明了木兰科杂交育种的方法以及杂交种栽培和繁殖技术，得到了大量的杂交种苗木。
6.本发明为木兰科的杂交育种、新品种选育及其推广应用提供了可靠的理论基础和成熟有效的技术措施。充分利用含笑植物资源，对野生花卉资源的开发具有现实的指导意义。
权利要求
1.一种木兰科含笑属杂交种的培育方法，其特征在于选择含笑属(Michelia)植物作为杂交亲本，云南含笑(M.yunnanensis)(♀)×金叶含笑(M.foveolata)(♂)，在父本的盛花期采花，在单花前期(半开)时采集，然后去掉花被片和雌蕊群，将雄蕊群摊开，在室温下花药自然裂开，花粉散出，收集花粉，置于冰箱中2-6℃干燥保存；在母本花朵将开未开时，去掉花被片和雄蕊，用父本的新鲜花粉或短期保存的花粉给其授粉，后套袋，约1星期后去袋，等果实变成红色或橙红色时采集，等自然阴干蓇葖果裂开种子散出后收集种子，洗去油质外种皮，在室温下保湿沙藏，第二年早春播种。
2.根据权利要求1所述的培育方法，其特征是花粉采集后用低温干燥的贮藏方法。
3.根据权利要求1所述的培育方法，其特征是选择早上800-900为授粉时间，
4.根据权利要求1所述的培育方法，其特征是采用蒙导方法克服杂交不亲和，母本花粉经处理后，在培养基上检测其活性，经检测无活性的母本花粉与父本花粉混合进行受粉。
全文摘要
提供一种以云南特有的木兰科含笑属植物为亲本的杂交育种方法。选择常绿的含笑属(Michelia)植物作为杂交亲本，云南含笑(M.yunnanensis)(♀)×金叶含笑(M.foveolata)(♂)，在父本的盛花期采花，在单花前期(半开)时采集，然后去掉花被片和雌蕊群，留雄蕊群在纸上摊开，在室温下花药自然裂开，花粉散出，收集花粉，置于冰箱中2－6℃干燥保存；早上8∶00－9∶00为最佳授粉时间，在母本花朵将开未开时，去掉花被片和雄蕊，用父本的新鲜花粉或短期保存的花粉给其授粉，后套袋，约1星期后去袋，注意观察其发育情况。等果实变成红色或橙红色时采集，等自然阴干蓇葖果裂开种子散出后收集种子，洗去油质外种皮，在室温下保湿沙藏，第二年早春播种。
文档编号A01H1/02GK1394471SQ0211384
公开日2003年2月5日 申请日期2002年6月7日 优先权日2002年6月7日
发明者龚洵, 张国利, 潘跃芝 申请人:中国科学院昆明植物研究所