专利名称：无菌豚鼠的培育技术及饲料配方的制作方法
技术领域：
本发明公开了一种无菌豚鼠的培育技术及饲料配方，属于生物学领域。
背景技术：
无菌动物，就是指不能检出任何活的微生物和寄生虫的动物。从微生物学的观点看，通常实验动物的体内和体外带有寄生虫，体内还常带有细菌和病毒，难于排除某些潜在的传染病。此外，普通实验动物的血清中含有抗体。所以用普通动物进行医学科学研究，会存在各种各样的干扰，实验结果往往不确切。使用无菌动物作实验就可以克服普通实验所存在缺点，使实验结果正确可靠。
豚鼠由于其晚成性、性早熟、过敏反应灵敏等特性，被广泛应用于药物学、药理学、传染病学、免疫学、营养学等方面的研究与生产。无菌豚鼠的获得技术已经非常成熟，但无菌豚鼠饲料，始终未能彻底解决，已成为无菌豚鼠发展的瓶颈问题。Baeot和Harden发现无菌蝇蛆必须饲喂B族维生素才能正常生长，证明了无菌动物对B族维生素的需要，因为无菌动物肠内没有细菌存在，自身不能合成B族维生素，从而找到了过去饲养无菌动物失败的原因。
无菌豚鼠的饲料，必须经过充分的灭菌，无菌豚鼠饲料的灭菌方法，目前多用高压灭菌，或放射线灭菌，或环氧乙烷灭菌法灭菌，营养成份破坏显著，饲料保存时间短，须补充因高压灭菌而破坏的营养成份，如维生素B1、维生素C、泛酸等。
发明内容
本发明的目的就是针对上述现有技术存在的问题，而提供的一种安全经济，营养均衡全面，灭菌充分，适口性好的无菌豚鼠饲料。
本发明的积极效果1、本饲料根据豚鼠饮食结构进行组方，营养均衡全面，饲料的适口性好；2、用本饲料喂养无菌豚鼠的成活率高，效果好；3、用本饲料喂养的无菌豚鼠，没有活的微生物和寄生虫或虫卵感染，使实验结果正确可靠；4、饲料的组成、形态和气味适合豚鼠的习性和嗜好；5、饲料制作过程简单，价格较低廉，便于推广。
无菌豚鼠是在无菌屏障系统中，剖腹取出胎儿，饲养繁育在无菌隔离器中，无菌豚鼠外观和普通动物相同，但是其机能、结构和普通动物有很大的不同。
因为无菌动物肠内没有细菌存在，自身不能合成B族维生素，过去饲养的无菌动物失败的原因之一，就是饲料中没有补充维生素，本饲料圆满地解决这一问题，本饲料配方是进行大量试验得出的，各组分用量在下述重量份范围都具有较好疗效。
蛋白质1-1.5万份、碳水化合物5-6万份、脂肪2.5-3万份、维生素A15-25万国际单位、维生素D3-5万国际单位、维生素E0.8-1.1万国际单位、维生素K10.05-0.07份、维生素B10.6-1份、维生素B21-1.5份、维生素B60.4-0.6份、维生素B120.001-0.002份、维生素C50-100份、烟酸3-5份、叶酸0.06-0.07份、泛酸2-3份、钙300-500份、磷200-400份、镁40-60份、铁5-10份、锌4-6份、锰0.05-0.12份、铜0.3-0.6份、碘0.5-1.5份、钠10-150份、钾500-700份、氯300-500份。
优选为蛋白质12000份、碳水化合物56000份、脂肪28000份、维生素A2000000国际单位、维生素D400000国际单位、维生素E10000国际单位、维生素K10.06份、维生素B10.8份、维生素B21.2份、维生素B60.5份、维生素B120.001.6份、维生素C75份、烟酸4份、叶酸0.065份、泛酸2.5份、钙400份、磷300份、镁50份、铁7份、锌5份、锰0.1份、铜0.5份、碘0.1份、钠125份、钾600份、氯400份。
本发明的另一方面，涉及一种无菌豚鼠饲料的灭菌方法。
将饲料用塑料袋密封包装，经20-30KGY剂量60钴照射灭菌，再经灭菌渡槽传入无菌隔离器，溶解饲料的无菌水，经高压118-124摄氏度和40-50分钟灭菌。
用60钴照射饲料灭菌效果显著，保存时间长，能保持无菌状态达6个月以上，营养成份如维生素B1、维生素B2、维生素C、蛋白质、胱氨酸、赖氨酸、泛酸等破坏较高压灭菌法显著减少。
无菌检测用人工哺乳方法将仔豚鼠培育成熟，在30~35天离乳时，用硫乙醇酸钠培养基(TGC)和脑心津液培养基(TSA)检测新鲜粪便和咽拭子，25℃和37℃培养17-19天。
微生物接种 第一批无菌豚鼠离乳后，接种5种微生物无菌豚鼠没有微生物的攻击，身体抵抗力较弱，因此首先接种乳酸杆菌，双歧杆菌，一周后再接种肠球菌，肠杆菌和拟杆菌，接种途径为口服，接种量为106。经检验后确定已定植于豚鼠体，并不带有特别指定的微生物即视该动物为无菌动物。
微生物检测用本灭菌方法灭菌后的无菌豚鼠的新鲜粪便、活豚鼠样品(包括所产后代的成年豚鼠)，送中国药品生物制品检定所实验动物中心实验动物标准化室按GB 1 492_94和GB/T 149261_41_94每月检测微生物状态，包括寄生虫，细菌，病毒，无菌豚鼠检验结果符合无菌豚鼠的等级标准。
本发明将通过实施例进一步说明具体实施方式
实施例一按照下述重量配比称取各原料蛋白质1万份、碳水化合物5万份、脂肪2.5万份、维生素A15万国际单位、维生素D3万国际单位、维生素E0.8万国际单位、维生素K10.05份、维生素B10.6份、维生素B21份、维生素B60.4份、维生素B120.001份、维生素C50份、烟酸3份、叶酸0.06份、泛酸2份、钙300份、磷200份、镁40份、铁5份、锌4份、锰0.05份、铜0.3份、碘0.5份、钠10份、钾500份、氯300份。
将蛋白质、碳水化合物、脂肪、维生素A、维生素D、维生素E、维生素K1、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素C、烟酸、叶酸、泛酸、钙、磷、镁、铁、锌、锰、铜、碘、钠、钾、氯用塑料袋密封包装，经20-30KGY剂量60钴照射灭菌，再经灭菌渡槽传入无菌隔离器；溶解饲料的无菌水，经高压118-124摄氏度和40-50分钟灭菌后存放于无菌间，喂养时再经高压118-124摄氏度和40-50分钟灭菌。
人工哺乳左手持仔畜头颈部，右手持乳头插入仔畜口中，轻轻挤压人工乳头，使流出一滴乳汁，诱导动物吮吸，哺乳时，注意力要集中，时刻注意动物口中的乳，如果动物口中的乳过多，应控制流速，防止动物呛着。
哺乳次数 每天早8:00，下午2:00，晚8:00定时哺乳。
哺乳量 动物哺乳量的估计，按体重的20％计算一天的哺乳总量，除以3后即为每次的哺乳量，并视情况而决定具体的哺乳量。
实施例二按照下述重量配比称取各组分原料蛋白质1.5万份、碳水化合物6万份、脂肪3万份、维生素A25万国际单位、维生素D5万国际单位、维生素E1.1万国际单位、维生素K10.07份、维生素B11份、维生素B21.5份、维生素B60.6份、维生素B120.002份、维生素C100份、烟酸5份、叶酸0.07份、泛酸3份、钙500份、磷400份、镁60份、铁10份、锌6份、锰0.12份、铜0.6份、碘1.5份、钠150份、钾700份、氯500份。
人工哺乳 左手持仔畜头颈部，右手持乳头插入仔畜口中，轻轻挤压人工乳头，使流出一滴乳汁，诱导动物吮吸。
哺乳次数 每天早8:00，下午2:00，晚8:00定时哺乳。
哺乳量同实施例一。
实施例三按照下述重量配比称取各组分原料蛋白质12000份、碳水化合物56000份、脂肪28000份、维生素A2000000国际单位、维生素D400000国际单位、维生素E10000国际单位、维生素K10.06份、维生素B10.8份、维生素B21.2份、维生素B60.5份、维生素B120.001.6份、维生素C75份、烟酸4份、叶酸0.065份、泛酸2.5份、钙400份、磷300份、镁50份、铁7份、锌5份、锰0.1份、铜0.5份、碘0.1份、钠125份、钾600份、氯400份。
哺乳方法、哺乳次数、哺乳量同实施例一。
权利要求
1.一种检测无菌豚鼠的方法，其特征在于用人工哺乳方法将仔豚鼠培育成熟，在30~35天离乳时，用硫乙醇酸钠培养基和脑心津液培养基检测新鲜粪便和咽拭子，25℃和37℃培养17-19天。
2.一种无菌豚鼠的饲料配方，其特征在于该配方由以下重量配比的原料制成蛋白质1-1.5万份、碳水化合物5-6万份、脂肪2.5-3万份、维生素A15-25万国际单位、维生素D3-5万国际单位、维生素E0.8-1.1万国际单位、维生素K10.05-0.07份、维生素B10.6-1份、维生素B21-1.5份、维生素B60.4-0.6份、维生素B120.001-0.002份、维生素C50-100份、烟酸3-5份、叶酸0.06-0.07份、泛酸2-3份、钙300-500份、磷200-400份、镁40-60份、铁5-10份、锌4-6份、锰0.05-0.12份、铜0.3-0.6份、碘0.5-1.5份、钠10-150份、钾500-700份、氯300-500份。
3.根据权利要求2所述的一种无菌豚鼠饲料配方，其特征在于各原料的优选用量为蛋白质1.2万份、碳水化合物5.6万份、脂肪2.8万份、维生素A20万国际单位、维生素D4万国际单位、维生素E1万国际单位、维生素K10.06份、维生素B10.8份、维生素B21.2份、维生素B60.5份、维生素B120.0016份、维生素C75份、烟酸4份、叶酸0.065份、泛酸2.5份、钙400份、磷300份、镁50份、铁7份、锌5份、锰0.1份、铜0.5份、碘0.1份、钠125份、钾600份、氯400份。
4.一种无菌豚鼠饲料配方的灭菌方法，其特征在于饲料经20-30KGY剂量60钴照射灭菌。
5.根据权利要求4所述的一种无菌豚鼠饲料配方的灭菌方法，其特征在于溶解饲料的无菌水，经高压118-124摄氏度和40-50分钟灭菌。
全文摘要
本发明公开了一种无菌豚鼠的培育技术及饲料配方。发明人在无菌屏障系统中，剖腹取出胎儿，饲养繁育在无菌隔离器中，根据豚鼠饮食结构，以蛋白质、碳水化合物、脂肪、维生素和矿物质为原料制成饲料，经
文档编号A23K1/16GK1748493SQ20051008658
公开日2006年3月22日 申请日期2005年10月11日 优先权日2005年10月11日
发明者王荫槐, 涂新明, 李红, 秦川, 寿克让, 何伏秋 申请人:中国医学科学院实验动物研究所