专利名称：：星突江鲽优质受精卵分离方法
技术领域：
：本发明属于星突江鲽的人工繁育技术，是一种在星突江鲽人工繁育过程中，对不同质量的受精卵进行分离的方法。技术背景星突江鲽的受精卵为浮性卵，但由于卵内没有油球分布，受精卵的浮性偏差，只有部分优质受精卵处于悬浮状态，而大部分优质受精卵是下沉的，同死卵及杂质等混杂在一起。因而在星突江鲽苗种繁育过程中，若未对受精卵进行分离就直接进行孵化，在孵化过程中很容易败坏水质，从而滋生细菌，降低孵化率。若分离而又分离不彻底，所采集的受精卯质量参差不齐，孵出的仔鱼质量不一致，在苗种培育过程中生长大小差距大，詞料投喂规格不统一，难以进行同步培养，从而降低苗种质量。在本发明做出之前，生产上对星突江鲽采取的孵化措施主要有两种(1)、将收集到的受精卵经清水漂洗几遍后，好坏卵一同进行孵化，在仔鱼孵化出膜后进行布池，此方法能够将死卵剔除，但仔鱼搬移困难且易损伤仔鱼；(2)、将收集到的受精卵经清水漂洗后，好坏卵一同进行孵化，在仔鱼孵化出膜前布池，待仔鱼孵出后，通过吸底的方式将死卵清除，此法易造成细菌繁殖且易造成仔鱼损伤。目前还没有关于星突江鲽优质受精卵分离技术的报道。
发明内容本发明的目的是提供一种简便易行的星突江鲽优质受精卯分离技术，从而解决优质受精卵分离技术难题，以完善星突江鲽的繁育技术，促进海水养殖业的可持续发展。本发明是按以下操作技术完成的1、在9-13。C水温条件下，确定星突江鲽受精卵孵化的适宜盐度范围为28~36%。，即水的密度为1.022~1.029g/ml。2、将采集的受精卵用清洁自然海水冲洗4~5遍，除去粘液后，用40~60mg/L的*典液消毒2~4min,再用洁净海水将石典液冲洗干净，然后加入配制的高盐度的饱和的洁净海水，使水的密度为1.026-1.032g/ml(即盐度约为32~41%。)。3、待各种卯子在容器中静置分层后，用吸管将上浮的优质受精卵虹吸出来，或用吸管将不良受精卵和其它杂质从容器中吸出。4、对分离后的优质受精卵中加入砂滤后的海水进行盐度调节，最后放入孵化网箱中进行孵化。5、待仔鱼孵化出膜前(受精后80-100h左右)，用吸管将卵从孵化网箱中吸出，再按上述2、3操作步骤对优质受精卵进行第二次分离。6、对筛选分离出的优质受精卵加入洁净的自然海水进行盐度调节后即可进行布池孵化。本发明与已有技术对比，具有以下特点1、此方法通过合理的海水密度调节，对星突江鲽优质受精卵进行分离，可有效避免盐度变化对受精卵造成的不利影响。2、此方法能够减少在自然海水条件下，对星突江鲽优质受精卵分离不彻底或分离不出来的现象，既提高了优质受精卵纯度，又避免因丢失优质受精卯而造成的经济损失。3、此方法经过两次消毒和分离，能够将优质受精卯和死卵及杂质进行彻底分离，不仅能够有效防止孵化过程中和布池后细菌的繁殖，还能够提高孵化率及苗种生长规格整齐度，从而能够提高苗种的质量。4、此方法操作方法简便易行，成本低，适用于星突江鲽优质受精卵的分离，能够有效的解决出售星突江鲽优质受精卵计数难题，因而具有重要的生产意义。图1:受精卵在不同盐度下的孵化率和畸形率。具体实施方式下面通过实施例结合附图详细叙述本发明的技术方法.原理星突江鲽不同质量的受精卵、死卵、未受精卵、卵壳及其它杂质的比重是不同的，因而能够根据适当的海水盐度范围达到对不同海水鱼类优质受精卵的分离。首先测定盐度对同一批星突江鲽受精卵孵化率及畸形率的影响，找出适宜星突江鲽受精卵孵化的盐度范围。以此范围为基础，再测定相同卵量下经不同盐度分离出的受精卵的数量和卵质，然后将受精卵放入清洁海水中孵化，测定孵化率及初孵仔鱼的整齐度。最后筛选出星突江鲽优质受精卵分离的最适盐度范围。具体配置方式如下1、测定盐度对受精卵孵化的影响共设8个盐度梯度26、28、30、32、34、36、38、40，盐度通过淡水或饱和食盐水调节，精密海水比重计和盐度计(美国产YSI30型)标定各试验组的盐度。将IOO粒受精卵置于1000ml的烧杯中孵化，每组设三个平行，孵化水温10~irC，pH8.0~8.2,微充气，观察记录受精卵的孵化率及初孵仔鱼的畸形率。孵化率计算公式H=Nl/SNxRxlOO%,(式中H-孵化率；Nl-出苗数、EN-取样总卵数、R-受精率)。由图l知，盐度在28~36时对受精卵的影响不大，孵化率均>85%，而仔鱼的畸形率均<10%，无明显的差异。而当盐度>38或<26时，受精卵的脬化率明显降低，初孵仔鱼的畸形率则明显上升。2、测定相同卵量经不同盐度分离出的受精卯的数量及卵质对于同一批受精卵，先用清洁海水漂洗4遍，除去黏液和部分杂质后各取100ml卵，经石典液消毒后，分别经盐度为26、28、30、32、34、36、38、40的海水对优质受精卵进行分离，盐度通过淡水或饱和食盐水调节，精密海水比重计和盐度计(美国产YSI30型)标定各试验组的盐度。测定分离卵量及受精率，然后将受精卵放入清洁海水中孵化，在仔鱼孵化出膜前再分别经盐度为26、28、30、32、34、36、38、40的海水对受精卵进行第二次分离，待仔鱼孵出后，计算孵化率及初孵仔鱼的整齐度。自然海水盐度28，孵化水温10~lrC，pH8.0~8.2。受精率计算公式R=X1/￡Xx100%,(式中R-受精率、XI-受精卵数、SX-取样总卵数)。仔鱼孵化整齐度计算公式F=(Wl-W2)/W2x100%，(式中Wl-最大初孵仔鱼重量、W2-最小初孵仔鱼重量；F小于15%为整齐，15%~30%为稍整齐，大于30%为不整齐)。结果见表l。表l相同卵量在不同盐度下分离出的受精卵的数量及卵质(v=100ml)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>由表1可见，在低盐度26-28，大量的优质受精卵是下沉的，只有少量优质受精卵上浮。在中盐度32~36，优质受精卵同其它质量的卵明显分层，且随着盐度的增加，分离出的优质受精卵数量明显增力口。在高盐度38~40时，过多的死卵、未受精卵及杂质上浮，使优质受精卵^U^分离出来，且在孵化过程中大量的细菌滋生，从而造成孵化率偏低。由此说明，在自然海水中(盐度为28),有很多优质受精卵处于下沉状态，若只选用上浮卵进行孵化，势必扔掉一些下沉的优质受精卵，造成优质受精卵的浪费。而加入配制的高盐度的洁净海水，能够使优质受精卵同死卵及其它杂质明显分层，从而使优质受精卵分离出来。但采用盐度进行优质受精卵分离时，盐度不能太高，否则过多的死卵、未受精卵及杂质上浮，使优质受精卵很难分离出来。总上，由图l知，受精卵在盐度3236的海水中孵化时，受精卵將化率和畸形率不受影响。因而使用盐度分离后，经盐度梯度调节后转入自然海水中孵化，对受精卵孵化率和畸形率影响更小。由表1知，在盐度为32~36时，分离出的卵量大，能够有效的使受精卵分离，避免只选用上浮卵进行孵化时对优质卵的浪费。因而，选用盐度32~36时的海水对星突江鲽优质受精卵的分离效果最理想。3、本发明方法和生产应用1)、将采集的受精卵用清洁自然海水冲洗4~5遍，除去粘液后，用40~60mg/L的石典液消毒2~4min，再用洁净海水将石典液冲洗干净，然后逐渐加入配制的高盐度的洁净海水，使水的密度为1.026~1.032(即盐度约为32~41%0)。2)、待各种卵子在容器中静置分层后，用吸管将上浮的优质受精卵虹吸出来，或用吸管将不良受精卵和其它杂质从容器中吸出。3)、对分离后的优质受精卵逐渐加入洁净的自然海水进行盐度调节，最后放入孵化网箱中进行孵化。4)、待仔鱼孵化出膜前(受精后80-100h左右)，用吸管将卵从孵化网箱中吸出，再按上述操作方法对优质受精卵进行第二次分离。5)、对筛选分离出的优质受精卵逐渐加入洁净的自然海水进行盐度调节后即可进行布池孵化。实施例1:2006年4月，我们在青岛龙湾生物科技有限公司进行了星突江鲽优质受精卯分离试验。共采卵8次，卵量为8L。试验分为对照组和32~36%。盐度分离组，对照组用砂滤海水漂洗3遍后未进行盐度分离。试验结果见表2:表2星突江鲽优质受精卵盐度分离结果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>试验结果证明在相同卵量下，经盐度为32~36的海水分离的优质受精卵量比对照组大，能够有效地减少对优质受精卵的浪费，且受精率、孵化率及初孵仔鱼的整齐度与对照组相差不大。实施例2:2007年3月至6月，我们在青岛龙湾生物科技有限公司进行了星突江鲽繁育工作。繁育期间共采卵23次，采卵数量为14L,经32~36的盐度分离后，优质受精卵量为6L，受精率平均为87%,孵化率为92%,仔鱼孵化整齐度为12%，共孵出仔鱼600万尾左右。专家验收时共培育出平均全长5.49cm商品苗种达137.2万尾，苗种成活率为22.8%左右，实现了星突江鲽的工厂化育苗，并通过项目组的验收。权利要求1、一种星突江鲽优质受精卵分离方法，其特征在于它是按以下操作步骤完成的1)、在9-13℃水温条件下，确定星突江鲽受精卵孵化的适宜盐度范围为28～36‰，即水的密度为1.022～1.029g/ml；2)、将采集的受精卵，用清洁自然海水冲洗4～5遍，除去粘液后，用40～60mg/L的碘液消毒2～4min，再用洁净海水将碘液冲洗干净，然后加入配制的高盐度饱和洁净海水，使水的密度为1.026～1.032g/m1，即盐度约为32～41‰；3)、待各种卵子在容器中静置分层后，用吸管将上浮的优质受精卵虹吸出来，或用吸管将不良受精卵和其它杂质从容器中吸出；4)、在分离后的优质受精卵中，加入洁净的砂滤海水进行盐度调节，最后放入孵化网箱中进行孵化；5)、待受精卵受精80-100h后，即仔鱼孵化出膜前，用吸管将卵从孵化网箱中吸出，再按上述2、3操作步骤对优质受精卵进行第二次分离。全文摘要一种星突江鲽优质受精卵分离方法，它的操作步骤是1)确定星突江鲽受精卵孵化的适宜盐度范围为28～36‰；2)将采集的受精卵用碘液消毒后，加入配制的高盐度饱和洁净海水，使水的盐度为32～41‰；3)将上浮的优质受精卵分离出来；4)对分离后的优质受精卵进行盐度调节后进行孵化；5)待仔鱼孵化出膜前，再按上述2、3操作步骤对优质受精卵进行第二次分离。本操作方法简便易行，适用于星突江鲽优质受精卵的分离，既减少了对优质受精卵的浪费，又提高了苗种的质量。本方法经实施分离后，优质受精卵量为6L，受精率平均为87％，仔鱼孵化整齐度为12％，培育出商品苗种达137.2万尾，苗种成活为22.8％左右，实现了星突江鲽的工厂化育苗。文档编号A01K61/00GK101268764SQ20081001598公开日2008年9月24日申请日期2008年5月7日优先权日2008年5月7日发明者刘长琳,庄志猛,李学文,健邹,陈四清申请人:中国水产科学研究院黄海水产研究所