专利名称：青鳉鱼受精卵无水运输方法
技术领域：
本发明属于鱼类受精卵运输技术，尤其是应用快递的方式快速运输青鏘鱼受精卵 的简易方法。
背景技术：
青鏘(Oryzias latipes)是起源于东亚的一种小型鱼类，易于饲养，成鱼体长3cm 左右，是已知最小的脊椎动物之一。与试验动物斑马鱼和小鼠相比世代更短，为2 3个月。 人工环境下，青鏘能够全年每天产卵，可以通过控制光照时间来控制产卵时间。透明的受精 卵使其在胚胎观察及显微操作非常方便。由于产卵是可控的，1994年，青鏘作为脊椎动物 的代表被送上太空，完成了从受精到个体的整个发育过程，实现了真正意义的“太空育种”。 日本在上个世纪初就开始青鏘的研究工作，在生理学、生态学、内分泌学等各方面被广泛利 用，并在培育、饲养管理、实验操作等进行系统的研究，是鱼类实验动物较好的例子，此鱼作 为模式鱼已经在国内外众多实验室中使用。由于很多使用青鏘鱼进行相关实验的实验室并不具备青鏘鱼的繁殖孵化的经验， 经常需要从事青鏘鱼繁育的相关单位提供受精卵，使得青鏘鱼受精卵的运输成为一项必须 解决的技术问题。青鏘鱼受精卵孵化期较长，28°C需要7天左右的时间。青鏘鱼受精卵运 输技术的关键是保持适宜的温度、湿度和溶氧条件，使受精卵有一个良好的环境，不影响其 正常发育。现有的青鏘鱼运输一般采用带水充氧的方法，此类方法运输需要专人押运，对于 少量卵的运输造成人力物力的浪费，而且存在运输袋破裂风险。
发明内容
本发明需要解决的技术问题是提供一种能够在常温下保持适宜的湿度和溶氧，使 受精卵不影响其正常发育的运输方法。本发明的技术方案选择受精时间2h 6h内的受精卵，去除发白不透明的死卵，其 特征是受精卵加Ringer' s培养液冲洗后将水滤干，装入盛有固体氧珠的2 5mL塑料平 底、带盖离心管内，受精卵总体积在离心管的4/5左右，封盖后用密封带密封，把密封后的 离心管装入A4大小牛皮纸信封袋，然后放在EMS信封封存运输。本发明利用塑料离心管的密闭性，提供受精卵一个湿润环境，同时用固体氧保证 溶氧条件。青鏘鱼受精卵无水运输，可以避免青鏘鱼较长距离运输死亡的风险，EMS信封就 可以实现青鏘鱼受精卵长距离的少量运输，运输成功率及孵化率可以达85%以上，较先前 的带水运输方便、快捷而且成功率高，使得用青鏘作为模式生物各个实验室之间受精卵实 验材料的交流更加容易。
附图是无水、固体氧增氧运输青鏘鱼受精卵的装配示意图。
具体实施例方式运输前的准备按以下步骤进行收集青鏘鱼受精卵块，用体视显微镜观察受精卵发育时期，选 择受精时间2h 6h 内的受精卵3(见附图)较适宜运输，同时挑出发白不透明的未受精的卵；盛卵器具选用2 5mL塑料平底、带盖的离心管1 (见附图)，保湿效果好，运输方 便；准备水族用固体氧珠4(见附图)，装入离心管1/5 2/5容积。无水、固体氧增氧运输方法具体操作过程如下首先选择受精时间2h 6h内的受精卵，去除发白不透明的死卵，加Ringer’ s培 养液(内含氯化钠0. 85%、氯化钾0. 03%、氯化钙0. 033% )冲洗后将水滤干，然后装入盛 有固体氧珠的离心管内，总体积在离心管的4/5左右，封盖后用密封带2(见附图)密封；把 密封后的离心管装入A4大小牛皮纸信封袋5 (见附图)，然后放在EMS信封6 (见附图)封 存备运。这种方法受精卵不会生水霉，孵化率高，技术管理简单，携带极为方便。受精卵运达目的地后，从离心管上层轻轻取出，挑除死卵，室温放置片刻，平衡温 差，当受精卵温度与水温接近时，再加入培养液进行孵化。孵化水温控制在25°C 26°C为 宜。为了提高孵化率，减少孵化过程中生长水霉，培养液中可加入浓度的亚甲基蓝。
权利要求
青鳉鱼受精卵无水运输方法，选择受精时间2h～6h内的受精卵，去除发白不透明的死卵，其特征是受精卵加Ringer′s培养液冲洗后将水滤干，装入盛有固体氧珠的2～5mL塑料平底、带盖离心管内，受精卵总体积在离心管的4/5左右，封盖后用密封带密封，把密封后的离心管装入A4大小牛皮纸信封袋，然后放在EMS信封封存运输。
2.根据权利要求1所述的青鏘鱼受精卵无水运输方法，其特征是受精卵运达目的地 后，从离心管上层轻轻取出，挑除死卵，室温放置片刻，平衡温差，当受精卵温度与水温接近 时，再加入培养液进行孵化。
3.根据权利要求2所述的青鏘鱼受精卵无水运输方法，其特征是孵化水温控制在 25°C 26°C。
4.根据权利要求3所述的青鏘鱼受精卵无水运输方法，其特征是孵化过程中，培养液 中加入浓度的亚甲基蓝。
全文摘要
青鳉鱼受精卵无水运输方法，涉及鱼类受精卵运输技术，需要解决的技术问题是提供一种能够在常温下保持适宜的湿度和溶氧，使受精卵不影响其正常发育的运输方法，本发明的技术方案选择受精时间2h～6h内的受精卵，去除发白不透明的死卵，其特征是受精卵加Ringer′s培养液冲洗后将水滤干，装入盛有固体氧珠的2～5mL塑料平底、带盖离心管内，受精卵总体积在离心管的4/5左右，封盖后用密封带密封，把密封后的离心管装入A4大小牛皮纸信封袋，然后放在EMS信封封存运输。本发明适用于快递方式快速运输青鳉鱼受精卵。
文档编号A01N1/02GK101828545SQ20091004728
公开日2010年9月15日 申请日期2009年3月9日 优先权日2009年3月9日
发明者么宗利, 周凯, 来琦芳, 王慧 申请人:中国水产科学研究院东海水产研究所