专利名称：一种免疫增强型草鱼饲料的制作方法
一种免疫增强型草鱼饲料
技术领域：
本发明涉及一种水产饲料，尤其涉及一种用于草鱼的饲料。背景技术：
草鱼养殖业随着集约化养殖模式的推广得到了迅猛发展。然而，由于高密度养殖、 投饲喂频率增加，以及水体污染等问题出现，感染各种疫病几率大大升高，已给养殖业造成 了巨大的损失。尤其是草鱼作为四大家鱼之一，养殖面广，草鱼疾病的爆发经常会给一些地 区的养殖也带来毁灭性的打击。因此，加强对草鱼疾病预防技术的研究，已成为我国当前草 鱼养殖业健康发展的关键技术之一。在饲料中添加免疫增强剂用来提高草鱼的免疫力，这 样一方面可以减少草鱼的患病率，减少鱼死亡的损失，另一方面可以减少抗生素的使用，避 免药物残留造成对人体的危害。而且目前草鱼的养殖饲料由于世界粮食价格的提高，饲料 成本也不断增加，减少了养殖户的经济效益，开发一种成本低廉、营养全面、效果显著的保 健饲料符合草鱼养殖发展的需要。
发明内容针对上述问题，本发明的目的是提供一种可增强草鱼自身免疫力，提高其生长性 能，成本较低、营养全面的草鱼饲料。为实现上述目的，本发明所采取的技术方案如下一种免疫增强型草鱼饲料，含有以下质量百分含量的组分豆粕8 15%、棕榈粕 1 5%、菜粕25 35%、米糠5 10%、啤酒糟3 8%、DDGS(玉米酒精糟)10 18%、 面粉10 15 %、麦芽根5 10 %、草鱼预混料0. 5 1 %。本发明饲料加工生产方法与现在生产方法相同。所述的草鱼预混料含有以下重量份的原料板蓝根15 20份、甘草20 30份、 茯苓10 20份、刺五加10 15份、当归10 15份、淫羊藿5 10份、维生素C5 10份。本发明草鱼预混料中含有板蓝根、甘草、茯苓、刺五加、当归、淫羊藿和维生素，其 中淫羊藿含有多种活性成分，能够在多个环节调节草鱼免疫系统的功能，特别能促进免疫 器官的发育，刺激淋巴细胞的增殖，促进淋巴细胞的吞噬作用，显著提高抗体的产生水平， 淫羊藿在哺乳动物和家禽上增强免疫功能较显著，但未见有淫羊藿在水产上的使用；板蓝 根能显著增加免疫器官的重量、白细胞总数及淋巴细胞数，同时还能增强抗体形成细胞的 能力；茯苓、刺五加均能够提高单核细胞吞噬作用，茯苓还能促进免疫器官的发育，刺五加 还具有诱生干扰素及免疫球蛋白的功能；甘草中含有甘草酸，能够提高血清溶菌酶的活力， 提高动物机体的免疫应答，抗细菌感染作用；当归能够显著增强巨噬细胞的吞噬作用，增加 网状内皮系统吞噬功能，显著促进特异抗体IgG产生作用；维生素C可促进淋巴母细胞的生 成，提高机体对外来和恶变细胞的识别和杀灭，增强机体对外界环境的抗应激能力和免疫 力，对添加的其他药物具有协同作用。
本发明免疫增强型草鱼饲料与现有技术相比，具有以下几个优点1、本发明草鱼 预混料首次在水产动物中使用淫羊藿配合其他的中药来达到增强草鱼机体免疫功能的作 用，各种中药组分配比合理，能够很好的增强草鱼的免疫力，提高草鱼防病、抗病能力；2、本 发明饲料配方中各组份的比例合理，成本低廉、营养均衡，蛋白质、糖类、脂肪等成分都很适 合草鱼生长，能够很好的提高草鱼的生长性能。
具体实施方式下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。实施例1一种免疫增强型草鱼饲料，含有以下重量的各组分豆粕8Kg、棕榈粕4Kg、菜粕 35Kg、米糠8Kg、啤酒糟7Kg、DDGS 13Kg、面粉12Kg、麦芽根8Kg、矿物质5Kg、草鱼预混料
lKgo其中草鱼预混料所含的组分及重量分别为板蓝根0. 15Kg、甘草0.25Kg、茯苓 0. 15Kg、刺五加0. 15Kg，当归0. 15Kg，淫羊藿0. lKg，维生素CO. lKg并将这些原料混合均勻， 过100目筛，即得草鱼预混料。实施例2一种免疫增强型草鱼饲料，含有以下重量的各组分豆粕10Kg、棕榈粕4Kg、菜粕 30Kg、米糠8Kg、啤酒糟7Kg、DDGS 15Kg、面粉12Kg、麦芽根8Kg、矿物质5Kg、草鱼预混料
lKgo其中草鱼预混料所含的组分及重量分别为板蓝根0. 15Kg、甘草0.25Kg、茯苓 0. 10Kg、刺五加0. 15kg，当归0. 15Kg，淫羊藿0. 10Kg,维生素C 0. lKg。将7种物料混合均 勻，并过100目筛，即为草鱼预混料。实施例3养殖实验(一)材料与方法1. 1 材料1. 1. 1试验用鱼360尾试验鱼购于海兴农海洋生物科技有限公司。1. 1.2白色葡萄球菌由华南农业大学兽医学院提供，溶壁微球菌(Micrococus lysodeikticus)由中国药用微生物菌种保藏中心提供(CPCC100045)，嗜水气单胞菌株 (Aeromonas hydrophila)购于sigma公司。菌经活化、接种草鱼证实其毒力后用于攻毒试验。1. 1. 3试验饲料选取本发明中实施例1、2配制的饲料，空白饲料为未添加本发明 预混料的基础饲料，饲料为广州海维饲料有限公司生产的草鱼成鱼颗粒料062。1. 2 方法1.2. 1试验分组及饲养管理选取健康、大小均勻的草鱼(100 士 10. 04g)，设3个处理(对照组、实施例1、实施 例2)，每个处理设置3个重复。每组40尾草鱼，分养于循环水族箱中，用基础饲料投饲驯 化到鱼主动抢食为止，驯化时间为15d，正式养殖时间为45d，每天投喂3次，时间分别为 9:00，13:00，17:00，投饲率为鱼体重的2% 3 %，每周调整一次投饲率，试验期间水温为(20 士 3) °C，水 PH 值 6. 9 7.2，溶氧 > 5mg/L，氨氮≤ 0. lmg/L。1. 2. 2测定指标与方法1. 2. 2. 1、生长性能指标测定试验开始及结束时分别对水族箱中的鱼进行称重并记录其初重(g)及末重(g)， 计算增重率、饵料系数。增重率=(末重-初重)(g)/初重(g) X 100%饵料系数=总投饲量(g)/(末重-初重)(g)试验结束时剖检鱼，并分离出各脏器，测定脏体比、肝体比。脏体比=内脏总重(g)/体重(g)；肝体比=肝脏重量(g)/体重(g)。1.2. 2. 2、免疫细胞活性测定饲喂15d后开始进行各项免疫指标的测定。从草鱼尾静脉处抽血，加入事先放有 1 %无菌肝素的离心管中，上下颠倒几次，待静脉血与肝素混合均勻后备用。(1)淋巴细胞转化率取0. 5mL抗凝血，无菌操作加入含有PHA (植物血凝素)营养液的小瓶内混合， 37°C恒温培养，3 4d后去上清液，加入37°C预温的0. 87%的NH4CL溶液3mL，溶解红细胞， 离心、制片，根据淋巴细胞转化的形态特征采用形态学观察200个淋巴细胞，计算淋巴细胞
转化率。淋巴细胞转化率=100% X (过渡型细胞+母细胞)/淋巴细胞总数(2)红白细胞数红细胞取20 μ L全血用生理盐水稀释200倍后，在Neubauer计数板上计数。白细胞取20 μ L抗凝血加入盛有380 μ L白细胞稀释液(98mL蒸馏水加入冰醋酸 2mL和3滴亚甲兰)的试管中，溶解全部红细胞后，取白细胞悬液，低倍镜下计数。(3)白细胞吞噬指数和吞噬率白色葡萄球菌活化后用福尔马林灭活制成1. 2 X 108个/mL的菌悬液，往0. ImL抗 凝血中加入0. 05mL上述菌悬液，充分混勻，25°C恒温水浴孵育60min，每隔IOmin摇动1次， IOOOrpm离心5min，用吸管吸取白细胞层涂片，每个样品涂3张，快干时滴甲醇固定约8min， 蒸馏水冲洗后，用Wright氏染色液染色15min，自来水冲洗后再用蒸馏水冲洗，晾干后用镜 观察。白细胞吞噬指数(PI) = 100个多核型白细胞中含菌总数/100。吞噬率(PP) = (100个吞噬细胞中参与吞噬的细胞数/100) X 100。(4)巨噬细胞活性参照白细胞吞噬指数方法用W right氏染色，Giemsa复染，镜检，光镜下计数200 个巨噬细胞。吞噬指数=200个巨噬细胞中所吞噬的菌体总数/200。1.2. 2. 3、血液、体液免疫成分及活性检测从每个水族箱随机取5尾鱼，于尾静脉取血，将所抽取的全血4°C放置2h后，在 4°C，3500rpm条件下离心30min，取上清液置于-20°C，备用。(1)血清溶菌酶活性以溶壁微球菌冻干粉为底物，用0. lmol/L pH 6. 4的磷酸钾缓冲溶液配成底物悬液，取200 ii L该悬液与20 ii L待测血清于96孔酶标板中混勻，于570nm处测其AO值，然后 将酶标板取出，置于37°C水浴中温浴lOmin后立即冰浴终止反应，再测其A值。溶菌酶活力XLSZ= (AO-A) /A(2)超氧化物歧化酶活力用总SOD法测定。SOD活力(U/mL) = [ (AO-A)/A]/50 % X反应体系稀释倍数X样本体积(3)碱性磷酸酶活力试剂盒法测，由南京建成生物技术研究所生产。碱性磷酸酶(金氏单位/100mL)=(测定管0D值/标准管0D值)X标准管含酚 的量(0. 005mg) X2000(4)血清补体活性在盛有0. 5mL致敏羊红细胞(SRBC)的试管中，加入0. 5mL鱼血清(空白对照组加 入0. 85%的NaCL溶液，全溶对照组加入0. 04%氨溶液)，使血清的终浓度为3%，置于培养 箱中38°C孵育60min，2000rpm离心lOmin，取上清液，用紫外可见光光度计在541nm下测光 密度值(A)。(5)血清和粘液中IgM水平测定用酶联免疫吸附法测定。1. 2. 2. 4、攻毒试验试验在饲喂25d后进行，在各水族箱中取15尾鱼进行攻毒试验。嗜水气单胞菌 的攻毒浓度为6 X 105个/mL，在背鳍下方肌肉丰满处，用针沿鳞片方向向前刺入肌肉，深度 1 2cm。攻毒后将鱼饲喂在另外同样条件的水族箱内，随时观察记录结果。成活率=(攻毒试验结束存活鱼数/攻毒试验开始鱼总数)X 100%相对成活率(RPS) = [1_(免疫组死亡率/对照组死亡率)]X 100%二、结果1、生长性能指标测定
权利要求
一种免疫增强型草鱼饲料，其特征在于含有以下质量百分含量的组分豆粕8～15％、棕榈粕1～5％、菜粕25～35％、米糠5～10％、啤酒糟3～8％、DDGS10～18％、面粉10～15％、麦芽根5～10％、草鱼预混料0.5～1％。
2.如权利要求1所述的免疫增强型草鱼饲料，其特征在于所述的草鱼预混料含有以下 重量份的原料板蓝根15 20份、甘草20 30份、茯苓10 20份、刺五加10 15份、 当归10 15份、淫羊藿5 10份、维生素C5 10份。
全文摘要
本发明涉及一种水产饲料，尤其涉及一种用于草鱼的饲料。一种免疫增强型草鱼饲料，含有以下质量百分含量的组分豆粕8～15％、棕榈粕1～5％、菜粕25～35％、米糠5～10％、啤酒糟3～8％、DDGS 10～18％、面粉10～15％、麦芽根5～10％、草鱼预混料0.5～1％。本发明草鱼预混料首次在水产动物中使用淫羊藿配合其他的中药来达到增强草鱼机体免疫功能的作用，各种中药组分配比合理，能够很好的增强草鱼的免疫力，提高草鱼防病、抗病能力。
文档编号A23K1/16GK101991024SQ201010563029
公开日2011年3月30日 申请日期2010年11月24日 优先权日2010年11月24日
发明者李旭宁 申请人:广州市海维饲料有限公司