专利名称：红萍品种保存方法
技术领域：
本发明属于农业技术领域，具体涉及红萍品种资源的保存方法，尤其涉及红萍组 培保存过程中温度选择的新方法。
背景技术：
红萍又名满江红，学名holla，是一种蕨藻共生的绿肥植物。由于红萍不易形成孢 子果，因此红萍品种资源保存以其营养体为主，目前我们采用的方法是茎尖组培培养保存、 温室培养保存和网室培养保存。其中保存时间最长的为红萍茎尖半固体培养保存，一次培 养保存时间为3-4个月，这个时间仍然太短。现有红萍品种资源保存工作量大，保存成本 高。严重制约了红萍利用的发展。
发明内容
本发明的目的是提供一种红萍品种资源保存新方法，使红萍品种资源的保存时间 延长到1年，比原来红萍品种资源保存的最长时间长8-9个月，从而减轻红萍品种资源保存 的工作量，节约保存成本。发明人发现在低温的条件下，能够延长红萍的保存时间，因此把原来保存的温度 20-25°C改为0-10°C，可大大延长其保存时间，又能够不影响其存活。本发明采用的技术方案是
一种红萍品种保存方法，所述的方法为将用茎尖培养保存的无菌红萍转接至半固体 培养基，在0 10°C温度进行保存；所述用茎尖培养保存的无菌红萍的培养方法为切取 0. 8^1. 2mm的红萍茎尖，用0. 01%HgCl2浸泡10分钟，用无菌水冲洗干净，然后接到高压灭菌 过的液体培养基中，待长成萍体后，即为茎尖培养的无菌红萍。所述液体培养基中各成分的浓度为CaSO4. 2H20(0. 17g/L)、MgSO4. 7H20(0. 41g/ L)、KH2PO4 (0. 04g/L)、KCl (0. 02g/L)、EDTA-Na2 (0. 004g/L)、FeSO4. 7H20(0. 003g/L)、 H3BO3 (0. 0015g/L)、Na2MoO4. 2H20 (0. 0019g/L)、NaNO3 (0. 06g/L)；其中 Ca 浓度为 0. 04g/L、 Mg浓度为0. 04g/L、P浓度为0. 02g/L、K浓度为0. 04g/L、Fe浓度为0. 0005g/L、B浓度为 0. 0002g/L、Mo浓度为0. 00015g/L、Na浓度为0. 01g/L。首先配成上述浓度的液体培养液， 调PH到6. 0，经高压灭菌即为液体培养基；液体培养基加入琼脂配成半固体培养基；配成半 固体培养基时琼脂的用量为每升培养液中加入琼脂5g。所述液体培养液的pH值用稀HCl或稀NaOH调为6. 0，其中稀HCl的浓度通常为 0. Γ0. 2mol/L,所述稀 NaOH 浓度通常为 0. Γθ. 2mol/L
根据本发明方法保存的红萍品种资源，保存的时间可达到12个月，比原来的保存3-4 个月时间，延长了 8-9个月，大大减轻红萍品种资源保存的工作量，节约保存成本。
具体实施例方式实施例1
3一、材料卡州萍3001
培养液配方见表1 表1培养液配方
权利要求
1.一种红萍品种保存方法，其特征在于所述的方法为将用茎尖培养保存的无菌红萍 转接至半固体培养基，在0 10°C温度进行保存；所述用茎尖培养保存的无菌红萍的培养 方法为切取0. 8^1. 2mm的红萍茎尖，用0. 01%HgCl2浸泡10分钟，用无菌水冲洗干净，然后 接到高压灭菌过的液体培养基中，待长成萍体后，即为茎尖培养的无菌红萍。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述液体培养基的成分为CaS04.2H20 0. 17g/L、MgSO4. 7Η20 0· 41 g/L、KH2PO4 0· 04g/L、KCl 0· 02g/L、EDTA-Na2 0. 004g/L、 FeSO4. 7H20 0. 003g/L、H3BO3 0. 0015g/L, Na2MoO4. 2H20 0. 0019g/L、NaNO3 0. 06g/L ；pH 值为 6. 0 ；所述液体培养基加入琼脂配成半固体培养基；所述琼脂的用量为每升液体培养基中 加入5g。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于配液体培养基时用稀HCl或NaOH调PH为 6. 0，所述稀HCl的浓度为0. Γ0. 2mol/L,所述稀NaOH浓度为0. Γθ. 2mol/L。
全文摘要
本发明提供了一种红萍品种保存方法，所述的方法为将用茎尖培养保存的无菌红萍转接至半固体培养基，在0～10℃温度进行保存；所述用茎尖培养保存的无菌红萍的培养方法为切取0.8~1.2mm的红萍茎尖，用0.01%HgCl2浸泡10分钟，用无菌水冲洗干净，然后接到高压灭菌过的液体培养基中，待长成萍体后，即为茎尖培养的无菌红萍。根据本发明方法保存的红萍品种资源，保存的时间可达到12个月，比原来的保存3-4个月时间，延长了8-9个月，大大减轻红萍品种资源保存的工作量，节约保存成本。
文档编号A01H4/00GK102119659SQ20101058302
公开日2011年7月13日 申请日期2010年12月10日 优先权日2010年12月10日
发明者叶花兰, 徐国忠, 林永辉, 王俊宏, 郑向丽 申请人:福建省农业科学院农业生态研究所