专利名称：一种海水东方鲀属种间人工杂交培育的方法
技术领域：
本发明属于渔业资源技术领域。尤其涉及东方飩属育种技术，更确切地说是一种应用雌性菊黄东方飩与雄性暗纹东方飩进行东方飩属种间人工杂交培育的方法。
背景技术：
东方飩属(Fugu)，俗称河豚、浜鱼、巴鱼。由于东方飩生态环境恶化，加之酷渔滥捕，近年东方飩数量急剧下降，因此人们开展了暗纹东方飩和菊黄东方飩的人工繁育技术研究，形成了一套完善的人繁技术。近年来由于暗纹东方飩和菊黄东方飩人工繁殖技术的突破，河飩鱼的养殖呈蓬勃发展的趋势，在获得显著经济效益的同时，由于其长期的人工繁殖和养殖，已出现了品种退化的现象。在人工繁殖过程中亲本的质量无法得到保证，养殖过程中病害频发，个体生长参差不齐，规格逐渐变小，这些现象严重影响了东方飩的养殖发展，为了保护东方飩这一珍贵的鱼类资源，实现东方飩长期的人工繁殖和养殖，必须从品种改良和选育着手，利用现有的技术和手段，选育和培育出生长快、个体大、病害少的东方飩品种。
发明内容
本发明的目的是解决长期以来一直未能攻克的东方飩属种间杂交的技术难题，为东方飩属种间杂交育种提供一种可行的方法，河飩的人工繁殖和品种选育奠定基础，可望由此培育出优良的飩类新品种，提高河飩养殖的经济效益，促进我国东方飩水产养殖业健康、稳定、持续的发展。本发明为实现上述目的，采用如下技术方案
一种海水东方飩属种间人工杂交培育的方法包括以下步骤
(1)挑选亲本挑选出个体大而健壮、无病害、无伤残、体表无寄生物、营养状况良好、性腺发育正常菊黄东方飩作为母本，个体较大的暗纹东方飩为父本；
(2)亲本培育将雌雄亲鱼个体放入室内水泥池中培育，培育密度1-10尾/m3，水泥池面积8-15m2，水深大于100cm，溶氧维持在5mg/L以上，光照600_800Lux，微流水，日换水1_2 次；亲本培育期间以投喂动物性饵料为主，逐步向高蛋白配合饵料过渡，在配合饲料中添加 30-90ppm的鱼用激素LH-RH-A、1%。的有淫羊霍、杜仲、当参或玄参、甘草、黄芪、枸杞子、益母草、黑大豆组成的中草药、1 %的VE和1 %。的食用盐，每天上午8 00-9 00、下午4 00-5 00 和晚上9 00-10 00各喂一次，每次投喂量为亲鱼总重的3-7%，每次投饵前先吸污并补充新鲜的曝气水，维持水温18士0. 50C ；
(3)人工授精在催产前30和60天，分别对亲鱼体直接注射外源性激素LRHA进行两次预催熟，第一次亲鱼注射剂量为0. lPg/kg，第二次亲鱼注射剂量0. 2Pg/kg ；观察亲鱼性腺发育状况，发现亲鱼腹部外观膨大，手感松软而有弹性，生殖孔发红且呈微张开状态时， 进行人工催产；人工催产注时，根据性腺发育状态，利用激素促进亲鱼性腺从IV期过渡至 V期，并使之排卵、排精；IV期注射激素LRH-A，用量为0. 4-0. 6Pg/kg，最后一次催产注射0. 5Pg/kg垂体激素，总计催产3-5次，激素时间效应36h ；待亲鱼性腺完全成熟后，进行湿法或干法人工授精。(4)孵化将人工授精的鱼卵放在孵化桶中孵化，孵化时间4-6天；孵化器中水温 22士 1°C，，溶氧维持在5mg/L以上，逐渐增加光照强度，孵化前期lOOOLux，后期增加到1500 Lux,盐度小于1. 0%。，孵化桶直径1. 0-1. 3m，高1. 2-1. 5m。(5)苗种培育鱼苗孵化后先在孵化器中培育1-3天，然后将苗种移至40m2水泥池中培育；孵化3-6天内，用100目的筛绢筛选鸡蛋蛋黄，投喂苗种，7-10天内投喂丰年虫幼体或小的桡足类；培育时水温22士 1°C，溶氧维持在5mg/L以上，光照强度大于1500Lux，盐度小于1. 0%o ；待苗种长到0. 8-1. 5cm时，带水将苗种移至室外土池池塘内进行驯养，驯养前池塘全池泼洒豆浆或施肥，进行发塘。本发明是东方飩属种间人工杂交的首次突破，为河飩的人工繁殖和品种选育奠定了基础。为东方飩属种间的杂交育种提供了一条可行的途径，可望由此培育出优良的飩类养殖新品种。本发明选用的母本为菊黄东方飩，父本为个体较大的暗纹东方飩，亲本培育期间采用了强化培育和预催熟技术，促进了亲鱼性腺的发育，同时杂交的催产率达到了 95%， 受精率、孵化率和开口率都达到了 80%以上，苗种畸形率2.0%。以下。本发明解决了由于长期人工繁殖和养殖，河飩品种退化的现象，为河飩健康养殖提供苗种支撑，促进我国水产养殖业健康、稳定、持续的发展。
具体实施例方式一种海水东方飩属种间人工杂交培育的方法包括以下步骤
(1)挑选亲本挑选出个体大而健壮、无病害、无伤残、体表无寄生物、营养状况良好、性腺发育正常菊黄东方飩作为母本，个体较大的暗纹东方飩为父本；
(2)亲本培育将雌雄亲鱼个体放入室内水泥池中培育，培育密度1-10尾/m3，水泥池面积8-15m2，水深大于100cm，溶氧维持在5mg/L以上，光照600_800Lux，微流水，日换水1_2 次；亲本培育期间以投喂动物性饵料为主，逐步向高蛋白配合饵料过渡，在配合饲料中添加 30-90ppm的鱼用激素LH-RH-A、1%。的有淫羊霍、杜仲、当参或玄参、甘草、黄芪、枸杞子、益母草、黑大豆组成的中草药、1 %的VE和1 %。的食用盐，每天上午8 00-9 00、下午4 00-5 00 和晚上9 00-10 00各喂一次，每次投喂量为亲鱼总重的3-7%，每次投饵前先吸污并补充新鲜的曝气水，维持水温18士0. 50C ；
(3)人工授精在催产前30和60天，分别对亲鱼体直接注射外源性激素LRHA进行两次预催熟，第一次亲鱼注射剂量为0. lPg/kg，第二次亲鱼注射剂量0. 2Pg/kg ；观察亲鱼性腺发育状况，发现亲鱼腹部外观膨大，手感松软而有弹性，生殖孔发红且呈微张开状态时， 进行人工催产；人工催产注时，根据性腺发育状态，利用激素促进亲鱼性腺从IV期过渡至V期，并使之排卵、排精；IV期注射激素LRHA，用量为0. 4-0. 6Pg/kg，最后一次催产注射 0. 5Pg/kg垂体激素，总计催产3-5次，激素时间效应36h ；待亲鱼性腺完全成熟后，进行湿法或干法人工授精。(4)孵化将人工授精的鱼卵放在孵化桶中孵化，孵化时间4-6天；孵化器中水温 22士 1°C，，溶氧维持在5mg/L以上，逐渐增加光照强度，孵化前期lOOOLux，后期增加到1500 Lux,盐度小于1. 0%。，孵化桶直径1. 0-1. 3m，高1. 2-1. 5m。
(5)苗种培育鱼苗孵化后先在孵化器中培育1-3天，然后将苗种移至40m2水泥池中培育；孵化3-6天内，用100目的筛绢筛选鸡蛋蛋黄，投喂苗种，7-10天内投喂丰年虫幼体或小的桡足类；培育时水温22士 1°C，溶氧维持在5mg/L以上，光照强度大于1500Lux，盐度小于1. 0%o ；待苗种长到0. 8-1. 5cm时，带水将苗种移至室外土池池塘内进行驯养，驯养前池塘全池泼洒豆浆或施肥，进行发塘。
权利要求
1.一种海水东方飩属种间人工杂交培育的方法，包括以下步骤(1)挑选亲本挑选出个体大而健壮、无病害、无伤残、体表无寄生物、营养状况良好、性腺发育正常菊黄东方飩作为母本，个体较大的暗纹东方飩为父本；(2)亲本培育将雌雄亲鱼个体放入室内水泥池中培育，培育密度1-10尾/m3，水泥池面积8-15m2，水深大于100cm，溶氧维持在5mg/L以上，光照600_800Lux，微流水，日换水1_2 次；亲本培育期间以投喂动物性饵料为主，逐步向高蛋白配合饵料过渡，在配合饲料中添加 30-90ppm的鱼用激素LH-RH-A、1%。的有淫羊霍、杜仲、当参或玄参、甘草、黄芪、枸杞子、益母草、黑大豆组成的中草药、1 %的VE和1 %。的食用盐，每天上午8 00-9 00、下午4 00-5 00 和晚上9 00-10 00各喂一次，每次投喂量为亲鱼总重的3-7%，每次投饵前先吸污并补充新鲜的曝气水，维持水温18士0. 50C ；(3)人工授精在催产前30和60天，分别对亲鱼体直接注射外源性激素LRH-A进行两次预催熟，第一次亲鱼注射剂量为0. lPg/kg，第二次亲鱼注射剂量0. 2Pg/kg ；观察亲鱼性腺发育状况，发现亲鱼腹部外观膨大，手感松软而有弹性，生殖孔发红且呈微张开状态时，进行人工催产；人工催产注时，根据性腺发育状态，利用激素促进亲鱼性腺从IV期过渡至V期，并使之排卵、排精；IV期注射激素LRHA，用量为0. 4-0. 6Pg/kg，最后一次催产注射 0. 5Pg/kg垂体激素，总计催产3-5次，激素时间效应36h ；待亲鱼性腺完全成熟后，进行湿法或干法人工授精。
2.(4)孵化将人工授精的鱼卵放在孵化桶中孵化，孵化时间4-6天；孵化器中水温 22士 1°C，，溶氧维持在5mg/L以上，逐渐增加光照强度，孵化前期lOOOLux，后期增加到1500 Lux，盐度小于1. 0%。，孵化桶直径1. 0-1. 3m，高1. 2-1. 5m。
3.(5)苗种培育鱼苗孵化后先在孵化器中培育1-3天，然后将苗种移至40m2水泥池中培育；孵化3-6天内，用100目的筛绢筛选鸡蛋蛋黄，投喂苗种，7-10天内投喂丰年虫幼体或小的桡足类；培育时水温22士 1°C，溶氧维持在5mg/L以上，光照强度大于1500Lux，盐度小于1. 0%o ；待苗种长到0. 8-1. 5cm时，带水将苗种移至室外土池池塘内进行驯养，驯养前池塘全池泼洒豆浆或施肥，进行发塘。
全文摘要
本发明公布了一种海水东方鲀属种间人工杂交培育的方法，包括亲鱼的筛选、培育、人工催产、孵化、苗种培育等过程，其特征是在充分掌握暗纹东方鲀和菊黄东方鲀繁殖生态环境和性腺生长发育规律的基础上，用菊黄东方鲀为母本，用个体较大的暗纹东方鲀为父本模拟自然生态环境，利用激素调控，以实现亲鱼性腺的发育成熟与排卵，采用人工授精的方法，实现东方鲀属种间的杂交。同时杂交过程加强生态管理，使杂交的催产率达到了95%，受精率、孵化率和开口率都达到了80%以上，苗种畸形率2.0‰以下。
文档编号A01K61/00GK102187839SQ20111014659
公开日2011年9月21日 申请日期2011年6月2日 优先权日2011年6月2日
发明者周彦锋, 尤洋 申请人:中国水产科学研究院淡水渔业研究中心