专利名称：非洲菊花托诱导方法
技术领域：
本发明涉及花卉培育方法，特别适用于非洲菊花托诱导方法。
背景技术：
非洲菊，学名Gerbera jamesonii Bolus，为菊科大丁草属的多年生宿根草本植物，为世界五大切花之一，其花朵硕大，花枝挺拔，瓶插寿命长，又有“扶持郎君，事业发达” 之意，因而备受消费者的青睐。非洲菊可采用分株繁殖，但目前非洲菊种苗生产上大多采用组织培养进行快繁，因为幼小花蕾具有较强的再分化能力，常作为非洲菊种苗诱导的外植体。现有技术一般以非洲菊的幼小花蕾，剥去花萼及小花序后纵切为四块，接种于诱导培养基中，正常光照培养，该方法存在诱导率较低，不同品种间的诱导率存在很大的差异，严重制约了非洲菊种苗工厂化、规模化生产。有研究表明花托的发育期直接影响愈伤组织的分化，以处于显蕾初期直径为 0. 7cm以下的头状花序的花托诱导效果最好，随着花序直径的增大，分化诱导率降低，感染率增高。也有研究表明以花托为外植体，在MS+6-BA 2. 5mg/L+2，4-D 1. Omg/L+NAA 0. 2mg/ L的培养基上，愈伤组织诱导率最高，诱导率达到100%，这些愈伤组织可以分化出不定芽。 也有研究结果显示以非洲菊幼花托为外植体，在l/2MSH+8mg/L 6-BA+O. 3mg/L NAA培养基上，不定芽再生率最高，达到15. 2%。现在花托诱导方法为A外植体的选择；现有技术一般选择非洲菊花蕾直径大小在0. 7cm以下。非洲菊花序不同发育时期的花蕾对花托的诱导有很大的影响，B外植体的消毒；花托的消毒程序为用肥皂水冲洗一遍，自来水冲洗干净后置于超净工作台上， 70%酒精消毒30s，无菌水冲洗3-4遍，0. 升汞消毒6min，无菌水冲洗5-7遍即可。外植体的消毒是建立非洲菊试管苗无菌体系的一个重要环节。C花托诱导培养基的选择；非洲菊花托愈伤组织诱导培养基配方为MS+6-BA 2. 5mg/L+2，4-D 1. Omg/L+NAA 0. 2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，诱导率达到100% ；不定芽分化培养基为l/2MSH+8mg/L 6-BA+O. 3mg/L NAA+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，分化率为15. 2%，PH值控制在5. 8左右。D、培养条件及方式。花托的培养条件正常光照培养，光照强度为1500-20001x，光照时间14h/d，温度 23- °C。
发明内容
本发明的目的在于克服上述缺陷，提供一种非洲菊花托诱导方法。本发明的方案是花托诱导方法包括外植体的选择、外植体的消毒、花托诱导基的选择、培养条件和方式，以非洲菊的幼小花蕾，剥去花萼及小花序后纵切为四块，接种于诱导培养基中，正常光照培养，其特征在于外植体的选择以花蕾直径大小在0. 5-0. 8cm之间为选择对象，并增加对选择对象进行48小时的温度为4度的冷藏预处理；花托诱导基的选择所选择的培养基配方为l/2MS+6-BA 10mg/L+NAA 0. 5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，PH 值控制在5. 8左右；培养条件及方式为先7天黑暗预培养后转入正常光照培养，光照强度为 1500-20001x，光照时间14h/d，温度23_25°C，直至育成种苗。本发明的优点在于其一，通过本技术可明显提高花托的愈伤组织的诱导率和不定芽的分化率，通过本发明技术可使花托愈伤组织诱导率达到100%，不定芽分化率达到 38%，降低生产成本；其二，通过本发明技术可消减不同品种之间诱导率的差异，为工厂化种苗生产提供可能。
具体实施例方式非洲菊花托诱导方法涉及到非洲菊的组织培养技术，具体包括A外植体的选择及预处理(创新点)；选择非洲菊花蕾直径大小在0. 5-0. 8cm之间，并进行48h的4°C冷藏预处理。非洲菊花序不同发育时期的花蕾对花托的诱导有很大的影响，试验研究表明花蕾直径大于 0. 8cm容易褐变，而且诱导愈伤组织能力差，分化不定芽能力亦差；花蕾直径小于0. 5cm与 0. 5-0. 8cm的诱导率差异不显著，但是直径大小小于0. 5cm时增加了操作的难度。4 的 4°C冷藏预处理有利于降低褐变率和提前愈伤组织的诱导，并提高诱导率和不定芽分化率。B外植体的消毒；花蕾的消毒程序为用肥皂水冲洗一遍，自来水冲洗干净后置于超净工作台上，先用无菌水冲洗5-7遍，70%酒精消毒30s，无菌水冲洗3-4遍，0. 1 %升汞消毒6min，无菌水冲洗5-7遍即可。外植体的消毒是建立非洲菊试管苗无菌体系的一个重要环节，通过以上的消毒程序，能控制污染率在3%以下。C花托诱导培养基的选择；非洲菊花托诱导培养基配方为1/2MS+6-BA 10mg/L+NAA0. 5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，PH值控制在5. 8左右。低浓度的无机盐能减少花托的褐变率，高浓度的细胞分裂素(6-BA)可以提高不定芽的分化。D培养条件及方式。花托的培养条件为先7天黑暗预培养后转入正常光照培养，光照强度为 1500-20001x，光照时间14h/d，温度23-25°C。7天的暗培养可以减少外植体的褐变，同时有利于外植体愈伤组织的诱导。本发明花托诱导原理为非洲菊幼小花蕾作为一种再分化能力较强的材料，是用于非洲菊种苗生产的常用外植体。影响非洲菊花托诱导的因素很多，比如外植体大小，外植体切分方式、激素的种类及浓度、外植体接种前的预处理及接种后的不同光照处理都会影响大到非洲菊花托诱导的成功率。本专利在试验研究和统计分析的基础上，分析了以上因素对非洲菊花托诱导率的影响。研究结果显示花蕾直径大小在0. 5-0. 8cm的诱导率显著高于直径大于0. 8cm的诱导率，诱导率达到35%，与直径小于0. 5cm的诱导率差异不显著； 花蕾太小，容易干枯死亡且操作难度大，花蕾太大，则容易发生褐变；花蕾经诱导前的4。C冷藏预处理可明显降低褐变频率和提高诱导率，原因可能是经4°C冷藏预处理后，酚类物质的活性受到抑制，同时调整了外植体内部的激素水平。较高浓度的细胞分裂素及一定浓度的细胞生长素有利于外植体的诱导和分化。接种后的一定时间(7天)的暗培养有利于减少外植体褐变率，并提早外植体的萌动，缩短诱导周期。本发明英文名词说明MS 组培中用到的一种基本培养基(包含大量元素、微量元素、铁盐和有机成分)6-BA 6-苄氨基嘌呤，一种植物细胞分裂素NAA:萘乙酸，一种植物细胞生长素cm 厘米mg/L:毫克每升2,4-D :2,4- 二氯苯氧乙酸，一种植物生长调节剂S 秒Min 分钟g/L:克每升h/d:小时每天MSH 一种组织培养基本培养基，MSH培养基的基本组分包括SH大量元素，MS微量元素及铁盐，l_2mg/L水解酪蛋白，9. 9mg/LVBl,9. 5mg/LVB6,4. 5mg/L尼克酸。
权利要求
1.非洲菊花托诱导方法，包括外植体的选择、外植体的消毒、花托诱导基的选择、培养条件和方式，以非洲菊的幼小花蕾，剥去花萼及小花序后纵切为四块，接种于诱导培养基中，正常光照培养，其特征在于外植体的选择以花蕾直径大小在0. 5-0. 8cm之间为选择对象，并增加对选择对象进行48小时的温度为4度的冷藏预处理；花托诱导基的选择所选择的培养基配方为l/2MS+6-BA 10mg/L+NAA 0. 5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，PH值控制在5. 8左右；培养条件及方式为先7天黑暗预培养后转入正常光照培养，光照强度为 1500-20001x，光照时间14h/d，温度23_25°C，直至育成种苗。
全文摘要
非洲菊花托诱导方法，涉及涉及花卉培育方法。包括外植体的选择、外植体的消毒、花托诱导基的选择、培养条件和方式，以非洲菊的幼小花蕾，剥去花萼及小花序后纵切为四块，接种于诱导培养基中，正常光照培养，其特征在于外植体的选择以花蕾直径大小在0.5-0.8cm之间为选择对象，并增加对选择对象进行48小时的温度为4度的冷藏预处理；花托诱导基的选择所选择的培养基配方为1/2MS+6-BA 10mg/L+NAA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，PH值控制在5.8左右；培养条件及方式为先7天黑暗预培养后转入正常光照培养，光照强度为1500-2000lx，光照时间14h/d，温度23-25℃直至育成种苗。提高花托的愈伤组织的诱导率和不定芽的分化率。
文档编号A01H4/00GK102499081SQ20111032647
公开日2012年6月20日 申请日期2011年10月24日 优先权日2011年10月24日
发明者钟海丰, 黄宇翔 申请人:清流县鸿翔农庄农业发展有限公司