专利名称：一种抑制光肩星天牛药物及其制备方法
技术领域：
本发明属于生命科学技术领域，涉及一种抑制光肩星天牛药物及其制备方法。
背景技术：
1992 1996年，内蒙古科技厅“八五”科技攻关项目“光肩星天牛种群动态、预测预报及防治技术研究”课题中子专题“林业经营措施治理光肩星天牛研究”项目进行了 18属120种树木抗虫性调查，选出了多种抗虫性优良树种，其中有受光肩星天牛侵入、自身具有保卫能力的树种有四种，已利用的树种有2种。经研究，发现椴树树种具有一定引诱天牛产卵而又能杀死其卵或初孵幼虫的作用。为了弄清这一功能的作用机制，内蒙林业厅资助的项目“天牛诱控技术的研究”，在解剖椴树时锁定了椴树内含物对天牛的作用物质，并发现该物质既有抑制天牛卵发育，又干扰天牛幼虫生长，最终导致树体皮下天牛全部死亡。为此，有关椴树控虫及其内含物的研究，内蒙林科院森保所先后承担国家自然科学基金和内蒙自然科学基金研究多项。2000 2003年，由内蒙古自治区林业厅资助开展了“光肩星天牛诱控技术初步研究” ；2004 2006年，内蒙科技厅自然科学基金委资助开展“抑制天牛卵和卵管分泌物药物研究”课题；内蒙自然科学基金课题“椴树抑虫物质及化学结构的研究”(2000 2002年，椴树韧皮提取物研究曾与内蒙古大学化工学院合作，利用GC-MS分析出30多种物质。内蒙古林科院课题组选择提取的组份含量较高的三种物质粘霉稀酮、粘霉稀醇、β_谷留醇做了生物测试，配伍三种物质具有抑虫作用。)。2002 2004年，内蒙古林科院与内蒙古大学化工学院合作，以该院田福利和林科院张玉凤牵头申请国家自然科学基金“椴树中抗天牛药效物质的抗虫机制及其化学结构的研究”，内蒙古林科院课题组进一步对椴树韧皮内含物的物质进行分析生物测试，确定了抑虫机理。2003 2005年，内蒙古林科院获得国家自然科学基金资助开展了 “光肩星天牛抑制物质活性及其机理研究，，课题进一步对段树皮提取物的化学物质做了鉴定，对化合物粘霉稀酮、粘霉稀醇、β_谷留醇进一步生物测试,三种化合物室内再次生物测试后,确定三种物质对寄主树体韧皮下天牛幼虫有很强抑制用。(说明内蒙古大学2006年在内蒙古林科院的研究基础上申请国家自然科学基金“蒙椴树叶和木质部中抗天牛药效物质的抗虫机制及其化学结构的研究”，主要协助内蒙古林科院探究椴树叶、木质部抗天牛物质及结构)。2009 2011年内蒙古林科院主持的内蒙古自然科学基金“椴树韧皮提取物抑制光肩星天牛诱导剂研究”课题，以微波提取技术提取椴树皮某一层次混合物，经提取有效成分分析该诱导剂不仅抑制天牛幼虫，而且诱导寄主伤口迅速愈合的功能。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供一种抑制光肩星天牛药物及其制备方法，该药物含有的3种化合物对天牛幼虫的生长发育有显著的影响。其技术方案如下一种抑制光肩星天牛药物，包含以下成分粘霉烯醇44% -47%，谷甾醇24% -33%，粘霉烯酮19% -31% ο进一步优选，包含以下成分粘霉烯醇44. 36%, β -谷留醇24. 77%,粘霉烯酮
30.88%。一种抑制光肩星天牛药物的制备方法，包括以下步骤称取剪碎的韧皮组织20克分放于具塞三角瓶中，使用70%乙醇和30%水作为提取剂，在25°C的超声波提取器中提取15min,过滤提取液于250ml的分液漏斗中。在分液漏斗中加入50ml的正己烧反萃取,萃取液使用旋转蒸发仪45°C浓缩至5ml。本发明的有益效果本发明采用蒙椴树皮提取物化学成分进行气相色谱-质谱分析。对提取物油状成分用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术分析，鉴定了其中的36种化学 成分，并通过标准峰面积法确定了它们的相对含量，已鉴定成分占总油状组分的64. 12% ；主要成分为酯类化合物。对分离出的3个化合物及通过GC-MS鉴定出的化合物的性质。以纯化的粘霉烯酮、粘霉烯醇、β_谷留醇进行了抑制天牛卵及幼虫实验。3种化合物对天牛幼虫的生长发育有显著的影响。
图I为树皮组织提取物的总离子色谱(TIC)图；图2为树皮组织提取物粘霉烯醇(保留指数为19. 530min)的质谱确认图；图3为树皮组织提取物一一β-谷甾醇(保留指数为21.674min)的质谱确认图；图4为树皮组织提取物粘霉烯酮(保留指数为23. 691min)的质谱确认图。
具体实施例方式下面结合附图和具体实施方式
对本发明的技术方案作进一步详细地说明。称取5份剪碎的韧皮组织，每份20克于具塞三角瓶中，分别使用IOOml的100%水、30%乙醇水、50%乙醇水、70 %乙醇水及100 %乙醇作为提取剂，在25 V的超声波提取器中提取15min，过滤提取液于250ml的分液漏斗中。在分液漏斗中加入50ml的正己烷反萃取，萃取液使用旋转蒸发仪45°C浓缩至5ml，上GCMS测试。分析条件为GCMS :Agilent 6890N/5973N ;分析住HP_5Ms30m*0. 25um*0. 25mm ；进样口温度220°C;柱箱温度120°C-IO0C /min-220°C _5°C /min_280°C (保留 5min)；传输线温度280°C ；四极杆温度150°C;离子源温度230°C ；柱流速1.5ml/min氦气作载气，SCAN模式。分析结果GCMS分析的谱库检索显示粘霉烯醇、β -谷甾醇、粘霉烯酮为提取物的主体成分，其TIC图及质谱图如下图I-图4所示
其含量范围分别是粘霉烯醇44% -47%，β _谷甾醇24%-33%，粘霉烯酮19% -31%。将各处理组提取物的GCMS分析结果数据如表I所示表I :不同提取条件下的GCMS分析比较表
权利要求
1.一种抑制光肩星天牛药物，其特征在于，包含以下成分粘霉烯醇44% -47%,β-谷甾醇24% -33%，粘霉烯酮19% -31%。
2.根据权利要求I所述的抑制光肩星天牛药物，其特征在于，包含以下成分粘霉烯Il 44. 36%, β -谷甾醇:24. 77 %，粘霉烯酮 30. 88 %。
3.一种抑制光肩星天牛药物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤称取剪碎的韧皮组织20克分放于具塞三角瓶中，使用70%乙醇和30%水作为提取剂，在25°C的超声波提取器中提取15min，过滤提取液于250ml的分液漏斗中。在分液漏斗中加入50ml的正己烷反萃取，萃取液使用旋转蒸发仪45°C浓缩至5ml。
全文摘要
本发明公开了一种抑制光肩星天牛药物及其制备方法，药物包含以下成分粘霉烯醇44％-47％，β-谷甾醇24％-33％，粘霉烯酮19％-31％。本发明同时提供了抑制光肩星天牛药物的制备方法，该药物包含的3种化合物对天牛幼虫的生长发育有显著的影响。
文档编号A01P7/04GK102919249SQ20121046958
公开日2013年2月13日 申请日期2012年11月11日 优先权日2012年11月11日
发明者田润民, 桑华, 张福金, 田洁, 刘丽洁, 田昕, 曹雄, 田原 申请人:内蒙古林业科学研究院