一种半枝莲组培种苗工厂化生产方法
【专利摘要】一种半枝莲组培种苗工厂化生产方法，包括如下步骤：半枝莲组培种苗繁殖复壮一体化培养、生根炼苗同步化培养以及生根苗的移栽。采用本发明能够在短时间内提供移栽成活率达96%以上的半枝莲组培种苗，满足生产上的需要。
【专利说明】一种半枝莲组培种苗工厂化生产方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种植物组培种苗工厂化生产方法，特别是一种半枝莲组培种苗工厂化生产方法。
【背景技术】[0002]半枝莲(Scutellaria barbate D.Don)为唇形科黄岑属植物，别名并头草、狭叶韩信草、赴山鞭、牙刷草、勺把草、兰花草等，属唇形科多年生野生药用草本植物，全草入药。其性味辛、苦、寒，归肺、肝、肾经，具有清热解毒、散瘀止血、利尿消肿的功效。半枝莲中含有多种化合物，黄酮类成分是其主要的活性成分，具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌等多种药理活性。
[0003]半枝莲是治癌的首选药物，在医学方面的用量逐年增加，是国家中医药管理局近年重点推荐发展的63种紧缺中药材之一。野生资源不断减少频临灭绝，而家种半枝莲受气候和地理条件等多种因素的影响，产量很不稳定，经常有供不应求的局面出现。鉴于半枝莲的良好疗效，为了更好地开发和利用中药半枝莲资源。因此通过本发明的生产工艺，可以短期内提供大量优质的半枝莲种苗，减低生产成本，提高种苗质量，从而提高种苗成活率及药材产量。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种半枝莲组培种苗工厂化生产方法，它能够缩短生产周期，降低生产成本,提高种苗质量,从而提高种苗成活率及药材产量。
[0005]本发明通过以下技术方案达到上述目的:一种半枝莲组培种苗工厂化生产方法，该方法的具体步骤和操作条件为:
[0006](I)繁殖复壮一体化培养:繁殖复壮一体化培养基为:MS+1.0~2.0mg/LBA+0.1 ~0.3mg/L KT+0.1 ~0.3mg/L IBA+0.1 ~0.5mg/L NAA,繁殖复壮一体化培养方法为:将半枝莲种子消毒后接种到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+0.3mg/L IBA繁殖培养基上培养获得丛生芽，将丛生芽切割成1.0~2.0cm的带芽茎段，平铺在繁殖复壮一体化固体培养基面上，然后将茎段的1/2压入到培养基内，接种完毕后转入培养室内培养15天，培养条件为培养温度23~27°C，光照强度15001uX，光照时间为8小时/天，然后再转入散射自然光照下培养15天，培养温度25~28°C，光照强度3500~45001ux，获得植株健壮的丛生芽；
[0007](2)生根炼苗同步化培养:生根炼苗同步化培养基为1/2MS+0.5~1.5mg/LNAA+0.1~0.3mg/L IBA+0.1~0.3mg/L IAA,生根炼苗同步化培养方法为:将繁殖复壮一体化培养获得的叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条剪下，接种到生根炼苗同步化培养基中，在室内培养7天，新根开始萌发后转入大棚内，进行生根炼苗同步化培养25天，获得根系发达，适宜移栽的完整植株，其中室内培养条件为培养温度23~27°C，光照强度15001UX，光照时间为10小时/天；大棚培养条件为温度23~30°C，光照为自然光，大棚上部覆盖一层遮阳网，遮光度为20~35%，相对湿度为85~90% ；
[0008](3)生根苗的移栽:在大棚形成完整的植株后，将生根苗的瓶盖打开，取出生根苗，洗净根部残留培养基，移栽至平整精耕的育苗床上，育苗要求相对湿度为90~95%，温度25~30°C，遮光度60~75% ;或移栽至育苗大棚，大棚内湿度为90~95%，温度25~30°C，遮光度60~75%。
[0009]其中，MS为MS基本培养基，BA为6_苄基腺嘌呤，IAA为吲哚乙酸，NAA为萘乙酸，KT为激动素，IBA为吲哚丁酸。
[0010]本发明的突出优点在于:
[0011](I)通过生物技术对半枝莲进行组织培养快速繁殖，在短时间内培育出大量可供大田栽培的半枝莲幼苗，显著提高了半枝莲种苗的繁殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。
[0012](2)通过繁殖复壮一体化培养、生根炼苗同步化培养两步培养法进行半枝莲组培苗的工厂化生产，缩短了培养时间，减少培养步骤，降低了培养成本，提高了半枝莲组培种苗的生产效率。
[0013](3)在繁殖复壮一体化培养基上培养获得的无菌枝条健康粗壮、无化现象，展叶良好，木质化程度较高，接种到生根培养基上生根情况良好，生根率在97%以上，移栽育苗大棚后成活率在96%以上。
【具体实施方式】
[0014]下面结合实施例对本发明的技术方案进一步说明。
[0015]实施例1
[0016]一种半枝莲组培种苗工厂化生产方法，包括以下步骤:
[0017](I)繁殖复壮一体化培养:繁殖复壮一体化培养基为:MS+1.0mg/L BA+0.lmg/LKT+0.lmg/L IBA+0.lmg/L NAA。繁殖复壮一体化培养方法为:将半枝莲种子消毒后接种到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+0.3mg/L IBA繁殖培养基上培养获得丛生芽，将丛生芽切割成1.0~2.0cm的带芽茎段，平铺在繁殖复壮一体化固体培养基面上，将茎段的1/2压入到培养基内，使其能够充分吸收培养基中的营养。接种完毕后转入培养室内培养15天，培养条件为培养温度23~27°C，光照强度15001uX，光照时间为8小时/天。然后再转入散射自然光照下培养15天，培养温度25~28°C，光照强度3500~45001ux。获得植株健壮的丛生芽；
[0018](2)生根炼苗同步化培养:生根炼苗同步化培养基为MS+0.5mg/L NAA+0.lmg/LIBA+0.lmg/L IAA。生根炼苗同步化培养方法为:将繁殖复壮一体化培养获得的叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条剪下，接种到生根炼苗同步化培养基中，在室内培养7天，新根开始萌发后转入大棚，进行生根炼苗同步化培养25天，获得根系发达，适宜移栽的完整植株。其中室内培养条件为培养温度23~27°C，光照强度15001UX，光照时间为10小时/天；大棚培养条件为温度23~30°C，光照为自然光，大棚上部覆盖一层遮阳网，遮光度为20~30%，相对湿度为85~90% ；
[0019](3)生根苗的移栽:在大棚形成完整的植株后，将生根苗的瓶盖打开，取出40瓶生根苗，每瓶15株,共600株,洗净根部残留培养基后统计生根植株为586株,生根率为
97.7%。将586株生根苗移栽至育苗大棚，大棚内湿度为90~95%，温度25~30°C，遮光度60~75%。30天后统计成活植株为564株，成活率为96.2%。[0020]实施例2
[0021]一种半枝莲组培种苗工厂化生产方法，包括以下步骤:
[0022](I)繁殖复壮一体化培养:繁殖复壮一体化培养基为:MS+1.5mg/L BA+0.2mg/LKT+0.2mg/L IBA+0.2mg/L NAA。繁殖复壮一体化培养方法为:将半枝莲种子消毒后接种到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+0.3mg/L IBA繁殖培养基上培养获得丛生芽，将丛生芽切割成1.0~2.0cm的带芽茎段，平铺在繁殖复壮一体化固体培养基面上，将茎段的1/2压入到培养基内，使其能够充分吸收培养基中的营养。接种完毕后转入培养室内培养15天，培养条件为培养温度23~27°C，光照强度15001uX，光照时间为8小时/天。然后再转入散射自然光照下培养15天，培养温度25~28°C，光照强度3500~45001ux，获得植株健壮的丛生芽；
[0023](2)生根炼苗同步化培养:生根炼苗同步化培养基为MS+1.0mg/L NAA+0.2mg/LIBA+0.2mg/L IAA。生根炼苗同步化培养方法为:将繁殖复壮一体化培养获得的叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条剪下，接种到生根炼苗同步化培养基中，在室内培养7天，新根开始萌发后转入大棚，进行生根炼苗同步化培养25天，获得根系发达，适宜移栽的完整植株。其中室内培养条件为培养温度23~27°C，光照强度15001UX，光照时间为10小时/天；大棚培养条件为温度23~30°C，光照为自然光，大棚上部覆盖一层遮阳网，遮光度为20~30%，相对湿度为85~90% ；
[0024](3)生根苗的移栽:在大棚形成完整的植株后，将生根苗的瓶盖打开，取出40瓶生根苗，每瓶15株,共600株,洗净根部残留培养基后统计生根植株为590株,生根率为98.3%。将590株生根苗移栽至育苗大棚，大棚内湿度为90~95%，温度25~30°C，遮光度60~75%5。30天后统计成活植株为572 株，成活率为96.9%。
[0025]实施例3
[0026]一种半枝莲组培种苗工厂化生产方法，包括以下步骤:
[0027](I)繁殖复壮一体化培养:繁殖复壮一体化培养基为:MS+1.8mg/LBA+0.3mg/LKT+0.3mg/L IBA+0.3mg/L NAA。繁殖复壮一体化培养方法为:将半枝莲种子消毒后接种到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+0.3mg/L IBA繁殖培养基上培养获得丛生芽，将丛生芽切割成1.0~2.0cm的带芽茎段，平铺在繁殖复壮一体化固体培养基面上，将茎段的1/2压入到培养基内，使其能够充分吸收培养基中的营养。接种完毕后转入培养室内培养15天，培养条件为培养温度23~27°C，光照强度15001uX，光照时间为8小时/天。然后再转入散射自然光照下培养15天，培养温度25~28°C，光照强度3500~45001ux，获得植株健壮的丛生芽；
[0028](2)生根炼苗同步化培养:生根炼苗同步化培养基为MS+1.0mg/L NAA+0.3mg/LIBA+0.3mg/L IAA。生根炼苗同步化培养方法为:将繁殖复壮一体化培养获得的叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条剪下，接种到生根炼苗同步化培养基中，在室内培养7天，新根开始萌发后转入大棚，进行生根炼苗同步化培养25天，获得根系发达，适宜移栽的完整植株。其中室内培养条件为培养温度23~27°C，光照强度15001UX，光照时间为10小时/天；大棚培养条件为温度23~30°C，光照为自然光，大棚上部覆盖一层遮阳网，遮光度为20~30%，相对湿度为85~90% ；
[0029](3)生根苗的移栽:在大棚形成完整的植株后，将生根苗的瓶盖打开，取出40瓶生根苗，每瓶15株,共600株,洗净根部残留培养基后统计生根植株为588株,生根率为
98.0%。将588株生根苗移栽至育苗大棚，大棚内湿度为90~95%，温度25~30°C，遮光度60~75%。30天后统计成活植株为568株，成活率为96.6%。
[0030]实施例4
[0031]一种半枝莲组培种苗工厂化生产方法，包括以下步骤:
[0032](I)繁殖复壮一体化培养:繁殖复壮一体化培养基为:MS+2.0mg/L BA+0.3mg/LKT+0.3mg/L IBA+0.5mg/LNAA。繁殖复壮一体化培养方法为:将半枝莲种子消毒后接种到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+0.3mg/L IBA繁殖培养基上培养获得丛生芽，将丛生芽切割成1.0~2.0cm的带芽茎段，平铺在繁殖复壮一体化固体培养基面上，将茎段的1/2压入到培养基内，使其能够充分吸收培养基中的营养。接种完毕后转入培养室内培养15天，培养条件为培养温度23~27°C，光照强度15001uX，光照时间为8小时/天。然后再转入散射自然光照下培养15天，培养温度25~28°C，光照强度约为3500~45001ux，获得植株健壮的丛生芽；
[0033](2)生根炼苗同步化培养:生根炼苗同步化培养基为MS+1.5mg/LNAA+0.3mg/LIBA+0.3mg/L IAA。生根炼苗同步化培养方法为:将繁殖复壮一体化培养获得的叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条剪下，接种到生根炼苗同步化培养基中，在室内培养7天，新根开始萌发后转入大棚，进行生根炼苗同步化培养25天，获得根系发达，适宜移栽的完整植株。其中室内培养条件为培养温度23~27°C，光照强度15001UX，光照时间为10小时/天；大棚培养条件为温度23~30°C，光照为自然光，大棚上部覆盖一层遮阳网，遮光度为20~30%，相对湿度为85~90% ；
[0034](3)生根苗的移栽:在大棚形成完整的植株后，将生根苗的瓶盖打开，取出40瓶生根苗，每瓶15株,共600株,洗净根部残留培养基后统计生根植株为585株,生根率为97.5%。将585株生根植株移栽至育苗大棚，大棚内湿度为90~95%，温度25~30°C，遮光度60~75%。30天后统计成活植株为564株，成活率为96.4%。
【权利要求】
1.一种半枝莲组培种苗工厂化生产方法，其特征在于:该方法的具体步骤和操作条件为: (1)繁殖复壮一体化培养:繁殖复壮一体化培养基为:MS+1.0~2.0mg/L BA+0.1~0.3mg/L KT+0.1~0.3mg/L IBA+0.1~0.5mg/L NAA，繁殖复壮一体化培养方法为:将半枝莲种子消毒后接种到MS+1.5mg/L BA+0.3mg/L KT+0.3mg/L IBA繁殖培养基上培养获得丛生芽，将丛生芽切割成1.0~2.0cm的带芽茎段，平铺在繁殖复壮一体化固体培养基面上，然后将茎段的1/2压入到培养基内，接种完毕后转入培养室内培养15天，培养条件为培养温度23~27°C，光照强度15001uX，光照时间为8小时/天，然后再转入散射自然光照下培养15天，培养温度25~28°C，光照强度3500~45001ux，获得植株健壮的丛生芽； (2)生根炼苗同步化培养:生根炼苗同步化培养基为1/2MS+0.5~1.5mg/L NAA+0.1~0.3mg/L IBA+0.1~0.3mg/L IAA，生根炼苗同步化培养方法为:将繁殖复壮一体化培养获得的叶片展开、木质化程度较高的健壮枝条剪下，接种到生根炼苗同步化培养基中，在室内培养7天，新根开始萌发后转入大棚内，进行生根炼苗同步化培养25天，获得根系发达，适宜移栽的完整植株，其中室内培养条件为培养温度23~27°C，光照强度1500lux，光照时间为10小时/天；大棚培养条件为温度23~30°C，光照为自然光，大棚上部覆盖一层遮阳网，遮光度为20~35%，相对湿度为85~90% ； (3)生根苗的移栽:在大棚形成完整的植株后，将生根苗的瓶盖打开，取出生根苗，洗净根部残留培养基，移栽至平整精耕的育苗床上，育苗要求相对湿度为90~95%，温度25~30°C，遮光度60~75%，或移栽至育苗大棚，大棚内湿度为90~95%，温度25~30°C，遮光度60~75%。
【文档编号】A01H4/00GK103518626SQ201310537346
【公开日】2014年1月22日 申请日期:2013年11月4日 优先权日:2013年11月4日
【发明者】李林轩, 韦坤华, 缪剑华, 李翠, 韦莹 申请人:广西壮族自治区药用植物园