一种海月水母成熟卵子的获得方法
【专利摘要】一种海月水母成熟卵子的获得方法，属于腔肠动物繁育技术，把海月水母失活的精子滴到性腺发育成熟的雌性海月水母胃生殖沟处，暂养后，在雌性海月水母的口腕中便会出现卵子。本发明提供一种经济可行并简单快速的获得大量成熟优质的海月水母卵子的方法。
【专利说明】一种海月水母成熟卵子的获得方法
【技术领域】:
[0001]本发明属于腔肠动物繁育【技术领域】，具体的涉及一种海月水母成熟卵子的获得方法。
【背景技术】
[0002]海月水母隶属钵水母纲、旗口水母目、洋须水母科、海月水母属，在70° N~40° S海区的浅海海域均有分布，是一种广泛分布于世界各海区的大型水母，在我国大连、烟台、威海和青岛等地沿海均有分布。近年来，由于人类活动和气候异常等因素导致了海月水母的大量暴发，给世界海洋渔业造成恶性影响，对海洋生态环境造成巨大危害。
[0003]海月水母的生活史包括2种不同形态的生活世代:营固着生活的无性水螅体世代和营浮游生活的有性水母体世代。海月水母雌雄异体，性腺发育成熟的雄性海月水母释放精子到体外，性腺发育成熟的雌性海月水母收集精子，通过相关的水管系统进入体内，完成受精。受精卵在口腕中发育为浮浪幼虫后再释放到体外。海月水母的成熟卵子在正常情况下是不会排放到体外的，正是由于海月水母的这种繁殖方式使得科研工作者们难以获得其成熟的卵子，因而关于海月水母有性繁殖的研究报道较少，阻碍了人们认识海月水母的繁殖规律，发明一种简单可行的海月水母成熟卵子的获得方法已成为迫切需求。
【发明内容】
[0004]本发明要解决的技术问题是提供一种海月水母成熟卵子的获得方法，快速简单获得大量海月水母成熟卵子。
[0005]本发明是通过如下技术方案实现的:
[0006]一种海月水母成熟卵子的获得方法，把海月水母失活的精子滴到性腺发育成熟的雌性海月水母胃生殖沟处，暂养后，在雌性海月水母的口腕中便会出现卵子。
[0007]—种海月水母成熟卵子的获得方法，具体步骤如下:
[0008]1)将性腺成熟的雄性海月水母置于水温22-24 °C，盐度28-32，DO ^ 6mg/L,pH7.8-8.2环境条件下，诱导其排精；
[0009]2)将步骤1)中性腺成熟的雄性海月水母排出的精子收集起来置于盛有海水的容器中，24h后镜检确认精子失活；
[0010]3)将步骤2)中失活的精子滴到性腺成熟的雌性海月水母胃生殖沟处，将雌性海月水母置于水温22-24°C的海水中，3~4h后，在雌性海月水母口周围的口腕中便会出现卵子;
[0011]4)将步骤3)中性腺成熟的雌性海月水母口腕中的卵子吸出，镜检并保存备用。
[0012]步骤1)中所述的性腺成熟的雄性海月水母伞径为15cm以上，性腺饱满。
[0013]步骤2)中所述的海月水母精子收集方法为:用胶头滴管将雌性海月水母收集于伞缘感觉缘瓣处的精子团吸出，置于盛有自然海水的培养皿中。
[0014]步骤3)中所述的性腺成熟的雌性海月水母伞径为15cm以上，性腺饱满。[0015]本发明与现有技术相比的有益效果:
[0016]本发明提供的是一种经济可行并简单快速的获得大量成熟优质的海月水母卵子的方法。在不损伤实验水母的条件下，通过失活的精子来诱导性腺发育成熟的雌性海月水母排出卵子，而在正常情况下，海月水母的卵子是无法排放出来的。本发明操作简单，不受时间、地点限制，可一次性获得大量成熟海月水母的卵子，从而满足海月水母的体外人工受精、分子生物学、繁殖生物学等研究的需求。
【具体实施方式】
[0017]下面结合实例对本发明的技术方案作进一步描述，但本发明不受实施例任何形式上的限制。
[0018]实施例1
[0019]2013年6月13日，在青岛金沙滩水产有限公司，利用实验室培育成熟的雌雄海月水母各6只，进行实验，雌雄海月水母伞径为15cm以上，性腺饱满。实验进行前一天停止投喂雌雄海月水母，这样便于观察受精卵和卵子。在水温22°C，盐度28，D0~6mg/L，pH7.8-8.2的条件下，雄性海月水母于上午11时开始排出精子细丝，精子粘附于精子细丝上，排精过程持续了 30min左右。雌性海月水母将精子收集于感觉缘瓣处形成精子团，此时，将精子团从感觉缘瓣处取下来置于培养皿中，尽量取净精子团，防止精子进入雌性海月水母体内影响下一步实验。将培养皿中加入少许海水暗处保存。24h后镜检精子失活。2013年6月14日11时左右，成熟的雄性海月水母再次排精。排精过程持续30min。将6只成熟的雌性海月水母分成3组:A组(2只)雌性海月水母正常收集刚排出的精子细丝，B组(2只)将失活的精子团 滴到雌性海月水母胃生殖沟处，使其收集失活的精子。C组(2只)雌性海月水母使其不收集任何精子。3组处理后在同样的环境条件下培养3h，结果发现:A、B两组均在口周围的口腕中发现了晶莹的受精卵(或卵子)，而C组未发现。将A、B两组雌性海月水母口腕中的受精卵(或卵子)吸出，镜检观察，A组为受精卵(已分裂为2细胞)，B组为卵子(未分裂，含第一极体)，受精7h后，A组已发育到多细胞阶段，而B组还处于初始状态，即为卵子，将成熟卵子收集起来，保存备用。
【权利要求】
1.一种海月水母成熟卵子的获得方法，其特征在于把海月水母失活的精子滴到性腺发育成熟的雌性海月水母胃生殖沟处，暂养后，在雌性海月水母的口腕中便会出现卵子。
2.根据权利要求1所述的一种海月水母成熟卵子的获得方法，其特征在于具体步骤如下:1)将性腺成熟的雄性海月水母置于水温22-24°C，盐度28-32，DO^ 6mg/L，pH7.8-8.2环境条件下，诱导其排精；2)将步骤1)中性腺成熟的雄性海月水母排出的精子收集起来置于盛有海水的容器中，24h后镜检确认精子失活； 3)将步骤2)中失活的精子滴到性腺成熟的雌性海月水母胃生殖沟处，将雌性海月水母置于水温22-24°C的海水中，3~4h后，在雌性海月水母口周围的口腕中便会出现卵子；4)将步骤3)中性腺成熟的雌性海月水母口腕中的卵子吸出，镜检并保存备用。
3.根据权利要求2所述的一种海月水母成熟卵子的获得方法，其特征在于所述的步骤1)中所述的性腺成熟的雄性海月水母伞径为15cm以上，性腺饱满。
4.根据权利要求2所述的一种海月水母成熟卵子的获得方法，其特征在于所述的步骤2)中所述的海月水母精子收集方法为:用胶头滴管将雌性海月水母收集于伞缘感觉缘瓣处的精子团吸出，置于盛有自然海水的培养皿中。
5.根据权利要求2所述的一种海月水母成熟卵子的获得方法，其特征在于所述的步骤3)中所述的性腺成熟的雌性海月水母伞径为15cm以上，性腺饱满。
【文档编号】A01K61/00GK103636547SQ201310726720
【公开日】2014年3月19日 申请日期:2013年12月25日 优先权日:2013年12月25日
【发明者】陈四清, 陈昭廷, 庄志猛, 刘长琳, 刘春胜, 赵鹏 申请人:中国水产科学研究院黄海水产研究所