一种诱导降香黄檀结香的生物方法
【专利摘要】本发明属生物【技术领域】，涉及一种诱导降香黄檀结香的生物方法，是选取已结香的成年降香黄檀树上钻取心材，粉碎后加入到ISP2液体培养基中培养，制得降香的内生菌菌系培养液；选取6～7年未形成心材的降香黄檀树，在树干上钻孔，孔深至木质部，然后将内生菌菌系培养液注入孔中，再对孔口进行密封处理，12个月后，从处理部位挖取紫红色的木质部即为降香。本发明工艺简单，操作简便，利用降香本身的内生菌菌系来诱导降香，有效地缩短降香黄檀结香的生产周期，具有天然、无公害的优点，是最安全最有前景的方法之一，适用于降香大规模标准化、商品化生产，有利于降香黄檀资源的保护、开发和利用，具有重要的经济、社会和生态效益。
【专利说明】一种诱导降香黄擅结香的生物方法
【技术领域】
[0001]本发明属生物【技术领域】，涉及一种刺激降香黄檀结香的方法，具体是一种采用生物方法诱导降香黄檀结香的方法。
【背景技术】
[0002]中药降香是豆科植物降香黄檀(Dalbergia odorifera T.Chen)的树干和根的干燥心材，降香主要有行气止痛，活血、止血、止痢、止呕等功效，是临床常用制剂如复方降香胶囊、冠心丹参片乳结消散片等中成药的主要原料，可用于治疗跌打损伤、外伤出现、腕腹疼痛、胸痹刺痛等，具有较高的药用价值和经济价值。近年来，随着市场需求不断增加，导致野生资源盗伐严重，资源面临枯竭甚至灭绝的境地。为了缓解这一现状，目前，华南各地均有人工大面积栽培，但降香黄檀自然生长条件下心材形成极为缓慢，一般生长7-8年后降香黄檀的主干才开始形成心材，20-30年才能积累到一定数量以供药用，结香过程十分漫长，无法满足社会的用药需求，因此，如何充分利用降香黄檀树加速其结香过程和增加产量，以缓解降香供需矛盾成为当前生产上亟待解决的关键问题。
[0003]目前，生产上主要靠降香黄檀自然生长形成药材，文献报道外界刺激产香的方法主要有物理砍伤、化学刺激、植物激素诱导和利用真菌诱导等方法。但利用降香黄檀自然形成的心材内生菌菌系诱导降香黄檀快速形成心材的方法未见报道。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是针对现有技术的不足而提供一种诱导降香黄檀结香的生物方法，利用降香本身的内生菌菌系来诱导降香，不仅生产周期缩短，而且具有天然、无公害的优点，是最安全最有前景的方法之一，适用于降香大规模标准化、商品化生产，有利于降香黄檀资源的保护、开发和利用，具有重要的`经济、社会和生态效益。
[0005]本发明所采用的技术方案:
[0006]一种诱导降香黄檀结香的生物方法，是选取已结香的成年降香黄檀树上钻取心材，经表面消毒、粉碎后加入到ISP2液体培养基中，25~30°C振荡培养5~10天，制得降香的内生菌菌系培养液,其中按质量体积比(g/mL)计降香黄檀树心材与ISP2液体培养基的比例为1:10~50 ;选取6~7年未形成心材的降香黄檀树,在离地面50cm高度以下的范围内于树干上钻孔，孔深至木质部，然后将内生菌菌系培养液注入孔中，再对孔口进行密封处理，12个月后，从处理部位挖取紫红色的木质部即为降香。
[0007]取部分紫红色木质部，晒干、粉碎粉末后用适量高纯蒸馏水浸泡，用挥发油提取器按常规水蒸气回流法蒸煮直至挥发油不再增加，经无水硫酸钠干燥后得挥发油。挥发油为无色透明油状物，具有特殊的清香味。按参照2010年《中华人民共和国药典》挥发油测定法(附录XD甲法)测定其挥发油的含量，通过气相色谱-质谱(GC-MS)对化学成分进行鉴定，用归一化法确定相对百分含量。
[0008]本发明工艺简单，操作简便，利用降香本身的内生菌菌系来诱导降香，有效地缩短降香黄檀结香的生产周期，具有天然、无公害的优点，是最安全最有前景的方法之一，适用于降香大规模标准化、商品化生产，有利于降香黄檀资源的保护、开发和利用，具有重要的经济、社会和生态效益。
【具体实施方式】
[0009]下面结合实施例，对本发明的【具体实施方式】作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。
[0010]实施例一
[0011]从一棵60年成年的降香黄檀树上用生长锥钻取5g心材，经70%酒精表面消毒后，无菌条件下碾磨粉碎，放入200mL ISP2液体培养基中，28°C，180rpm振荡培养I周后，制得降香的内生菌菌系培养液。选取6-7年未形成心材的降香黄檀树30株,在离地面50cm高度以下的范围内用直径为Icm的钻头在树干上由上向下钻3个孔(倾斜45° )，孔深至木质部，各个孔洞上下间的间隔为10~15cm，每个孔里注入ImL培养液，用保鲜膜和透明胶带密封包裹，处理12个月后，砍倒树木，从处理部位挖取紫红色的木质部。将得到的紫红色物质，晒干、精确称重，重量为6090g，平均株产量:203g。
[0012]实施例二
[0013]从一棵40年成年的降香黄檀树上用生长锥钻取3g心材，经70%酒精表面消毒后，无菌条件下碾磨粉碎，放入1OOmL ISP2液体培养基中，28°C，180rpm振荡培养I周后，制得降香的内生菌菌系培养液。选取6-7年未形成心材的降香黄檀树30株,在离地面50cm高度以下的范围内用直径为Icm的钻头在树干上由上向下钻3个孔(倾斜45° )，孔深至木质部，各个孔洞上下间的间隔为10~15cm，每个孔里注入ImL培养液，用保鲜膜和透明胶带密封包裹，处理12个月后，砍倒树木，从处理部位挖取紫红色的木质部。将得到的紫红色物质，晒干、精确称重，重量为6420g，平均株产量:214g。
[0014]实施例三
[0015]从一棵70年成年的降香黄檀树上用生长锥钻取2g心材，经70%酒精表面消毒后，无菌条件下碾磨粉碎，放入50mL ISP2液体培养基中，28°C，180rpm振荡培养I周后，制得降香的内生菌菌系培养液。选取6-7年未形成心材的降香黄檀树30株，在离地面50cm高度以下的范围内用直径为Icm的钻头在树干上由上向下钻3个孔(倾斜45° )，孔深至木质部，各个孔洞上下间的间隔为10~15cm，每个孔里注入ImL培养液，用保鲜膜和透明胶带密封包裹，处理12个月后，砍倒树木，从处理部位挖取紫红色的木质部。将得到的紫红色物质，晒干、精确称重，重量为6270g，平均株产量:209g。
[0016]检验:
[0017]1、产物中挥发油含量
[0018]分别精确称取实施例一、二、三的产物50g，粉碎后用适量高纯蒸馏水浸泡5h，用挥发油提取器按常规水蒸气回流法100°c蒸煮16h直至挥发油不再增加，经无水硫酸钠干燥后得挥发油。挥发油为无色透明油状物，具有特殊的清香味。按参照2010年《中华人民共和国药典》挥发油测定法(附录XD甲法)测定其挥发油的含量，结果见表1。
[0019]表1挥发油含量指标
【权利要求】
1.一种诱导降香黄檀结香的生物方法，其特征在于:选取已结香的成年降香黄檀树上钻取心材，经表面消毒、粉碎后加入到ISP2液体培养基中，25~30°C振荡培养5~10天，制得降香的内生菌菌系培养液，其中按质量体积比计降香黄檀树心材与ISP2液体培养基的比例为1:10~50 ;选取6~7年未形成心材的降香黄檀树,在离地面50cm高度以下的范围内于树干上钻孔，孔深至木质部，然后将内生菌菌系培养液注入孔中，再对孔口进行密封处理，12个月后，从处理部位挖取紫红色的木质部即为降香。
【文档编号】A01G7/06GK103828617SQ201410104193
【公开日】2014年6月4日 申请日期:2014年3月20日 优先权日:2014年3月20日
【发明者】周双清, 黄小龙, 周亚东, 盛小彬, 林旭俊, 李晓斌 申请人:海南省林业科学研究所, 海南大学