苏太猪一般抗病力综合选择指数选择育种方法
【专利摘要】本发明涉及一种苏太猪一般抗病力综合选择指数选择育种方法。方法是仔猪在35日龄时采集前腔静脉血，获得血清样品后测定白介素2(IL-2)、白介素4(IL-4)、白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)、白介素12(IL-12)、β干扰素(IFN-β)的浓度，同时对实验猪群体进行分组，之后将上述6个指标数据转化为标准化Z分值，代入所建综合选择指数公式计算每个群体的综合选择指数值，根据值的大小确定一般抗病力较强个体。本发明的检测方法操作简单，准确度高，并可实现自动化的直接检测，本发明将在猪的抗病育种实践中发挥巨大作用。
【专利说明】苏太猪一般抗病力综合选择指数选择育种方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及猪抗病育种领域，具体涉及一种建立苏太猪一般抗病力综合选择指数筛选高抗病力个体的选择育种方法。
【背景技术】
[0002]近年来，随着生猪养殖规模程度的不断加快，单纯追求高产通常导致猪的疾病抵抗力降低，一些原有疾病未根除，又出现了新的疾病，严重制约了养猪业的发展。疾病可导致猪肉产品低劣、产量下降，同时它还严重降低遗传进展，给养猪业造成的直接经济损失约占总产值的12%-15%。因此，做好疾病预防是养猪业健康快速发展的重要前提。传统的疾病防控措施如改善环境、疫苗接种和药物治疗等并不能从根本上控制疾病，同时滥用抗生素也导致猪肉产品携带大量残留药物，继而危害人类身体健康。因而如何在培育高产品种的同时，找到一条安全可靠且经济可行的生猪疾病防治途径，已然是科学家和养猪业共同关心的紧迫问题。
[0003]据文献报道，虽然常规饲养管理和药物疫苗不能根本上控制疾病，但可以通过抗病育种来提高机体对疾病的抵抗力。衡量动物机体对疾病抵抗能力大小的指标有很多，细胞因子(cytokines，CK)是其中一项重要指标，其是由机体免疫细胞分泌的一类具有广泛生物学活性的小分子多肽，具有免疫调节、抗肿瘤、促进造血、参与炎症反应以及神经内分泌效应等多种生物学功能；在动物体内，绝大多数细胞因子含量较低，其主要作用是提高动物的免疫功能。据报道，免疫指标可代表机体的免疫功能状态，从而间接反映机体的抗病能力，因此可通过免疫指标的测定来了解动物的一般抗病力。然而迄今为止，尚未建立对苏太猪一般抗病力的评价体系，因而无法从众多的细胞因子测定指标中选择最佳数量指标，形成一套适用的综合评价指标体系。
[0004]一般抗病力多个测量指标中需要构建一套适用的综合评价指标体系，在该体系中指标模型的构建是关键问题之一，主成分分析法(principal component analysis, PCA)正好科学地解决了这一问题。PCA是研究如何将多指标问题转化为较少的综合指标的一种重要统计方法，能使问题变得比较简单、直观，近来已成为多指标综合评价和权重系数确定的
重要方法。
[0005]苏太猪，是苏州市苏太猪育种中心(现苏州苏太企业有限公司)历经十五年由杜洛克与太湖猪杂交培育的优质瘦肉型猪新品种，1999年通过国家畜禽品种审定委员会的新品种审定，具有生产性能优良、肉质鲜美等优点。本发明的目的就是通过主成分分析方法建立“苏太猪一般抗病力综合选择指数选择育种方法”，筛选一般抗病力较强个体，通过选择育种培育高抗病力新品系。
【发明内容】
[0006]本发明是通过建立主成分综合评价模型，根据不同群体/个体的综合得分来对苏太猪一般抗病力进行综合指数选育的方法和应用。[0007]本发明采用的技术方案包括以下步骤:
[0008](I)将待选育的苏太仔猪进行群体或个体分组，测定各组苏太仔猪白介素2(11^-2)、白介素4(11^-4)、白介素6(11^-6)、白介素 IO(IL-1O)、白介素 12(IL_12)、和 β 干扰素(IFN-β)的浓度；
[0009](2)将上述测得的指标数据转化为标准化Z分值，代入下述综合选择指数公式，计算每个群体的综合选择指数值fi，
[0010]fi = -0.153ZxJ0.069Zx3+0.491Zx4+0.458Zx5+0.438Zx6,其中 Zx1^ Zx3> Zx4> Zx5、Zx6分别为IL-2、IL-6、IL-10、IL-12和IFN-β测定值的标准化数据(Zx2的系数为0，故未列出)；
[0011]fi值越大表示该群体个体的一般抗病力越强；根据育种目的选留fi值高的群体或个体。
[0012]本发明中对将待选育的苏太猪进行群体或个体分组，具体是根据主成分分析步骤的要求对实验猪群体进行分组，分组依据可以为家系、个体、日龄、性别、免疫状态等各个方面。 [0013]指标数据的测定方法，具体可以是:苏太仔猪在35日龄时采集前腔静脉血，获得血清样品后利用猪多细胞因子检测试剂盒(Affymetrix公司，美国)对白介素2(IL_2)、白介素4(IL-4)、白介素6(IL-6)、白介素IO(IL-1O)、白介素12(IL_12)、和β干扰素(IFN-β)进行浓度测定。
[0014]fi = -0.ΙδβΖχ^Ο.069Ζχ3+0.491Ζχ4+0.458Ζχ5+0.438Ζχ6,其中 Zx1^ Zx3> Zx4> Ζχ5、Zx6分别为IL-2、IL-6、IL-10、IL-12和IFN-β测定值的标准化数据(Zx2的系数为0，故未列出)。
[0015]本发明的优点体现在:
[0016]I)先前的抗病力评估还仅局限于研究少数几个参数进行判断，无法综合、准确地判断一般抗病力的强弱。本发明则很好地解决了如何从众多指标中选择最佳数量指标的难题，最终达到科学评价猪个体健康状况的目的。
[0017]2)该发明可从不同家系、个体、日龄、性别、免疫状态等各个方面开展抗病力差异分析。养猪生产者可根据自身条件任意选择适用的分类，或者对同一群体/个体进行多方面的综合评估，以达到多样化、综合选育的目的，从而加快猪的抗病育种进展。
[0018]3)本发明的检测方法操作简单，准确度高，并可实现自动化的直接检测，本发明将在猪的抗病育种实践中发挥巨大作用。
【具体实施方式】
[0019]实施例一:
[0020]一、苏太猪一般抗病力指标(重要细胞因子)的测定
[0021]对180头(每组60头)35日龄仔猪前腔静脉采血，4°C放置30min，常规分离血清。依次使用对应缓冲液对标准样进行四倍八点浓度梯度稀释，建立标准曲线。同时使用对应缓冲液稀释样本血清，按照操作说明，利用猪多细胞因子检测试剂盒(Affymetrix公司，美国)对样本血清进行处理，送入已校正的Bio-plex悬液芯片系统中读出对应荧光值，然后通过标准曲线计算样品中细胞因子(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12和IFN-β )的浓度。[0022]二、主成分分析
[0023]利用SPSS16.0统计软件的Factor模块对上述免疫指标进行主成分分析。
[0024]1、原始数据的无量纲化
[0025]设有η个样本，P项指标:2i> = (.Tv ^ X/) /?,其中i为第i个个体Q =
I,2, 3,......，n), j为第j个抗性指标(j = 1，2，3，......，p),和Sj分别是第j个抗性指标
的样本平均值和标准差。
[0026]2、计算相关系数(r)，建立相关矩阵(R)
[0027]
【权利要求】
1.苏太猪一般抗病力综合选择指数选择育种方法，其特征在于具体包含以下步骤: (1)将待选育的猪进行群体或个体分组，各组苏太仔猪在35日龄时测定IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12 和 IFN-β 浓度； (2)将上述测得的指标数据转化为标准化Z分值，代入下述综合选择指数公式，计算每个群体的综合选择指数值fi，
fi = -0.153ZxJ0.069Zx3+0.491Zx4+0.458Zx5+0.438Zx6,其中 Zx” Zx3、Zx4、Zx5、Zx6 分别为IL-2、IL-6、IL-10、IL-12和IFN-β测定值的标准化数据； fi值越大表示该群体个体的一般抗病力越强；根据育种目的选留fi值高的群体或个体。
【文档编号】A01K67/027GK103931560SQ201410191082
【公开日】2014年7月23日 申请日期:2014年5月7日 优先权日:2014年5月7日
【发明者】吴圣龙, 包文斌, 朱世平, 蔡家嘉, 霍永久, 朱国强, 喻礼怀, 黄雪根, 华金第 申请人:扬州大学