一种快速解除鸦胆子种子休眠的方法
【专利摘要】本发明涉及一种快速解除鸦胆子种子休眠的方法，包括以下步骤：1)将成熟的鸦胆子果实于4℃低温下贮藏7d～14d；2)使所述1)中的鸦胆子果实于20℃～30℃温水中浸渍1d～5d，并用5重量％～20重量％的细沙揉搓，去除果肉；3)将所述1)和2)中处理后的鸦胆子种子用98％的浓硫酸处理30s～90s，并用流水冲洗至无硫酸残留；4)将所述1)、2)和3)中处理后的鸦胆子种子用100～300mg/L的赤霉素(GA3)水溶液处理2～48h；5)使所述1)、2)、3)和4)中处理后的鸦胆子种子进行发芽。本发明具有缩短育苗周期、种苗整齐一致等优点，可广泛用于鸦胆子药材的种苗繁育及栽培。
【专利说明】一种快速解除鸦胆子种子休眠的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及药用植物种子的发芽领域，具体的说，本发明涉及一种快速解除鸦胆 子种子休眠的方法。
【背景技术】
[0002] 鸦胆子为苦木科植物鸦胆子（Brucea javanica(L. )Merr. Rhusjavanica L.)的干 燥果实，是鸦胆子油软胶囊、鸦胆子油口服乳液、鸦胆子油乳注射液等畅销中成药的原料。 近年来，以鸦胆子为功效原料的中成药疗效显著，需求量增长迅猛，使鸦胆子药材原料价格 也连年攀升，原料供给严重不足，断货缺货严重。对作为医药原料的鸦胆子的巨大需求，导 致野生资源破坏严重，采集野生资源已经不能满足生产需要，开展规范化生产是解决药材 短缺的有效途径，而种苗繁育是规范化生产的重要组成部分，由于鸦胆子果实成熟周期较 长，种子成熟度不一，加上果肉与种子难分离，种子易腐烂，种皮坚硬等，导致鸦胆子种苗繁 育周期较长，出苗不一致，严重影响了鸦胆子的规范化栽培。
[0003] 通过对国内外文献和专利的检索，有关鸦胆子种子发芽和种苗繁殖共检索到1篇 文献，李向宏等（李向宏，何凡，李宏，朱德岭，甘炳春.海南鸦胆子栽培技术初报.中国园 艺文摘，2009(1) :42-45.)对鸦胆子种子催芽技术进行了简单介绍，该结果认为：鸦胆子种 子需经过放置一段时间，度过休眠期，然后用50?55°C热水浸种15?20min，清洗2?3 遍，再用清水浸泡12?24h，并置于33?35°C环境中催芽，催芽过程中要保持湿度，7?10d 后种子陆续发芽，当见到有10%?20%露芽点，即可播种，但鸦胆子发芽不整齐，出苗长达 一年之久。
[0004] 种子萌发实验中依据其处理方法的不同可以分为物理处理和化学处理两类，其中 物理处理主要包括机械处理、温度处理、超声处理3种，化学处理可以分为酸处理、碱处理、 氧化剂处理、盐类处理、激素处理等5类，依据对种子休眠破除的机制又可分为3类：（1)软 化种皮、改善种胚与外界环境间的透水特性等，主要有温度处理、盐酸处理、小苏打处理和 双氧水处理4种处理方式；（2)营养处理，主要有草木灰、氯化钙处理、硝酸钾处理、氯化铁 处理和硼酸处理4种处理方式；（3)激素处理，主要有生长素处理、细胞分裂素处理和赤霉 素处理3重方式。前期研究发现影响鸦胆子种子发芽的因素有：（1)果实及种子存在后熟现 象，需经低温贮藏处理完成后熟；(2)果肉与种子较难分离，容易造成种子腐烂，影响出苗； (3)种皮硬但较薄；(4)种子内源赤霉素含量低，需要打破休眠，综合上述现象，本发明通过 低温贮藏、石英砂处理、硫酸处理和赤霉素处理探讨了鸦胆子种子破除休眠的方法及其对 种子萌发的研究。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种快速解除鸦胆子种子休眠的方法。
[0006] 为了实现本发明的目的，本发明提供一种快速解除鸦胆子种子休眠的方法，该方 法包括以下步骤：
[0007] 步骤1):将黑色成熟的鸦胆子果实于4°C低温下贮藏7d?14d，优选方案为4°C低 温下贮藏l〇d ;
[0008] 步骤2):使所述步骤1)中储存的鸦胆子果实于20°C?30°C温水中浸渍Id?5d， 并用5重量％?20重量％的细沙揉搓，以去除果肉，优选方案为25°C温水中浸渍3d后，用 10重量％的细沙揉搓去除果肉；
[0009] 步骤3):使所述步骤1)和2)中处理后的鸦胆子种子用98%的浓硫酸处理30s? 90s，并用流水冲洗至无硫酸残留，优选方案为98%的浓硫酸处理30s后用流水冲洗至无硫 酸残留；
[0010] 步骤4):使所述步骤1)、2)和3)中处理后的鸦胆子种子用100?300mg/L的赤 霉素（GA 3)水溶液处理2?48h，优选方案为用200mg/L的赤霉素（GA3)水溶液处理6h ;
[0011] 步骤5):使所述步骤1)、2)、3)和4)中处理后的鸦胆子种子进行发芽。
[0012] 此处，在本发明的范围内，如本文中使用的，术语"洗净"是指洗涤至洗脱液中化学 处理剂为痕迹量。
[0013] 如本文中使用的，术语"浸渍"是指种子在液面之下的状态。
[0014] 优选地，在所述步骤5)中，将所述步骤1)中浸渍后的鸦胆子种子转入恒温或变温 条件的光照培养箱中，在蛭石、湿沙、滤纸、海绵发芽床或者混合30重量％?40重量％椰糠 的沙质土壤中进行发芽。
[0015] 更优选地，将所述步骤5)中浸渍后的鸦胆子种子转入恒温或变温条件的光照培 养箱中，混合30重量％?40重量％椰糠的沙质土壤中进行发芽。
[0016] 本发明所述的快速解除鸦胆子种子体眠的方法，能有效解除阻碍鸦胆子种子萌发 的各种因素，包括种子及果实存在后熟，果肉与种子难剥离，种皮所形成的机械障碍，打破 鸦胆子种子体眠，显著提高种子发芽率，发芽率可达85. 0%，与传统不经过处理的育苗方式 相比，具有缩短育苗周期、种苗整齐一致、操作简单、成本低廉等优点，可广泛用于鸦胆子药 材的种苗繁育及栽培。
【具体实施方式】
[0017] 以下实施例仅用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
[0018] 说明：
[0019] 1.下列实施例中所采用的发芽试验（除实施例5外）均为沙床发芽试验法，具体 如下：直径为9cm的组培用培养瓶内放置3cm厚经过灭菌的石英砂，用水湿透，将多余的水 倒掉，以保湿不积水为度，选取100粒鸦胆子种子均匀放入培养瓶中，然后再覆盖上2cm厚 经过灭菌的石英砂，再将培养瓶盖好后放入微电脑控制光照培养箱（LRH-250-G11 ;广东省 医疗器械厂生产），按照各个试验例所设计的特定温度（恒温或变温）条件进行发芽，整个 发芽过程中均进行光照；发芽过程中每天检测1?2次，并适当补足水分，鸦胆子种子开始 发芽后，每天计数1次。发现有腐败的种子应随时拣出，若霉变种子> 5%应及时更换培养 瓶内的石英砂，并将种子用蒸馏水清洗后再放入培养瓶内继续令其发芽。
[0020] 2.参照《国际种子检验规程》（1985)，《农作物种子检验规程》（1995)等作为评定 种子是否发芽的标准（以长出lcm为发芽）。
[0021] 3.种子发芽率是指发芽试验终期，在规定的日期内发芽的全部种子数占供试种子 的百分率。发芽率（％)=规定日期内发芽种子/供试种子粒数xioo%。本试验中的发 芽日期均为自将发芽纸床放入箱中起的20天。
[0022] 4.本实验试图通过多种方法打破鸦胆子种子的休眠，但只有草木灰、赤霉素和生 长素能打破鸦胆子种子的休眠，其它方法如盐酸处理、双氧水处理等均不能解除鸦胆子种 子休眠。
[0023] 实验材料
[0024] 本实验所用的鸦胆子（Bruceajavanica(L. )Merr. Rhusjavanica L.)种子为 2013 年10月份?2013年12月份在海南省儋州、五指山、白沙、海口等市县采收的黑色成熟的鸦 胆子果实，用6?8目的筛子过筛，不能通过6?8目筛网的果实备用，将其作为实验材料。
[0025] 实施例1
[0026] 实验方法
[0027] 将鸦胆子果实分为两组，一组空白对照，一组在4°C低温下分别贮藏3d、6d、10d和 14d。然后用1重量％次氯酸钠水溶液消毒15分钟，无菌水漂洗5次至pH = 7,每个浓度平 行四组，每组100粒置于30°C恒温培养箱全光照培养，每10日统计发芽率。
[0028] 表1低温贮藏对鸦胆子种子萌发的影响
[0029]
【权利要求】
1. 一种快速解除鸦胆子种子休眠的方法，该方法包括以下步骤： 步骤1):将黑色成熟的鸦胆子果实于4°C低温下贮藏7d?14d ; 步骤2):使所述步骤1)中贮藏的鸦胆子果实于20°C?30°C温水中浸渍Id?5d，并用 5重量％?20重量％的细沙揉搓，以去除果肉； 步骤3):使所述步骤1)和2)中处理后的鸦胆子种子用98%的浓硫酸处理30s?90s， 并用流水冲洗至无硫酸残留； 步骤4):使所述步骤1)、2)和3)中处理后的鸦胆子种子用100?300mg/L的赤霉素 (GA3)水溶液处理2?4池； 步骤5):使所述步骤1)、2)、3)和4)中处理后的鸦胆子种子进行发芽。
2. 根据权利要求1所述的快速解除鸦胆子种子休眠的方法，其特征在于：在所述步骤 1)中，将黑色成熟的鸦胆子果实于4°C低温下储存10d。
3. 根据权利要求1所述的快速解除鸦胆子种子休眠的方法，其特征在于：在使所述步 骤2)中，将经过低温贮藏的鸦胆子果实于25°C温水中浸渍3d后，用10重量％的细沙揉搓 去除果肉。
4. 根据权利要求1所述的快速解除鸦胆子种子休眠的方法，其特征在于：在所述步骤 3) 中，将经初步去除果肉的鸦胆子种子用98 %的浓硫酸处理30s后用流水冲洗至无硫酸残 留。
5. 根据权利要求1所述的快速解除鸦胆子种子休眠的方法，其特征在于：在所述步骤 4) 中，将经过低温贮藏、细沙去除果肉、浓硫酸去除残存果肉的鸦胆子种子用200mg/L的赤 霉素（GA3)水溶液处理6h。
6. 根据权利要求1至5中任一项所述的快速解除鸦胆子种子休眠的方法，其特征在于： 在所述步骤5)中，将所述步骤1)、2)、3)和4)中处理的鸦胆子种子转入恒温或变温条件的 光照培养箱中，在蛭石、湿沙、滤纸、海绵发芽床或者混合30重量％?40重量％椰糠的沙质 土壤中进行发芽。
7. 根据权利要求6所述的快速解除鸦胆子种子休眠的方法，其特征在于：将所述步骤 5) 中浸渍后的鸦胆子种子转入恒温或变温条件的光照培养箱中，混合30重量％?40重 量％椰糠的沙质土壤中进行发芽。
【文档编号】A01C1/00GK104106327SQ201410292518
【公开日】2014年10月22日 申请日期:2014年6月20日 优先权日:2014年6月20日
【发明者】姚俊华, 庞玉新, 于福来, 张影波, 陈振夏 申请人:姚俊华