一种挂苦绣球组织培养的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种挂苦绣球组织培养的快速繁殖方法，包括茎段的消毒、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、野外生根诱导等步骤。本发明通过对挂苦绣球的诱导、增殖、生根等条件的研究，成功地建立了挂苦绣球的微繁体系。
【专利说明】 一种挂苦绣球组织培养的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及挂苦绣球的组织培养，属于生物【技术领域】。
【背景技术】
[0002]挂苦绣球，办xanthoncura虎耳草科,又名黄枝挂苦子树、六蛾戏珠、黄脉绣球。灌木至小乔木，高1-7米，当年生小枝黑褐色或灰黄褐色，无毛或疏被柔毛，二年生小枝色较淡，常具明显的浅色皮孔，有时一年生小枝亦具皮孔，树皮稍厚，不易脱落或呈小块状剥落。生于山腰密林或疏林中或山顶灌丛中，海拔1600-2900米。挂苦绣球功效:化瘀疗伤,主治:用于跌打损伤、瘀血肿痛、筋骨疼痛、骨折等。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是挂苦绣球组织培养的快速繁殖方法，本发明通过对挂苦绣球的诱导、增殖、生根等条件的研究，成功地建立了挂苦绣球的微繁体系。
[0004]为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案:
选择生长健壮的植株，切取长约3cm的茎段，放入玻璃瓶中，三层纱布封口，流水冲洗lh，洗去附着表面的多数杂菌，浸泡于lg/L多菌灵+800mg/L的羧卞青霉素钠，置于120r/min摇床上振荡1.5h,超净工作台上70%酒精处理lmin, lg/L升萊处理15min,无菌水冲洗干净，消毒处理过的无菌茎段接种到BL+6-BA 1.0mg/L+NAA 2.0mg/L+10%椰子汁+2g/LCH的培养基中进行腋芽的诱导，附加葡萄糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度24±2°C，光照强度 22001x，光照 8h，诱导出来的芽苗接入 MS+6-BAL 5-2.0mg/L+1.5-2.0mg/LKT+0.5mg/LNAA+4.0g/L琼脂+15-20g/L魔芋粉培养基中进行增殖培养，附加葡萄糖30g/L，琼脂6.5g/L，光照50001x，光期13h/d，温度24±2°C，选取生长旺盛的芽苗，将其敞口置于温室中炼苗3d后，取出，无菌水洗净底部培养基，移栽到灭菌过的1/2园土+1/2河沙的基质中，移栽后保持湿度85%以上，温度30°C，30天后统计生根成活率。
[0005]采用本发明制备的挂苦绣球生根率高，培养周期短，利于大规模种植。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
选择生长健壮的植株，切取长约3cm的茎段，放入玻璃瓶中，三层纱布封口，流水冲洗lh，洗去附着表面的多数杂菌，浸泡于lg/L多菌灵+800mg/L的羧卞青霉素钠，置于120r/min摇床上振荡1.5h,超净工作台上70%酒精处理lmin, lg/L升萊处理15min,无菌水冲洗干净，消毒处理过的无菌茎段接种到BL+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+10%椰子汁+2g/LCH的培养基中进行腋芽的诱导，附加葡萄糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度24±2°C，光照强度22001x，光照 8h，诱导出来的芽苗接入 MS+6-BA1.5mg/L+l.5mg/LKT+0.5mg/LNAA+4.0g/L 琼脂+15g/L魔芋粉培养基中进行增殖培养，附加葡萄糖30g/L，琼脂6.5g/L，光照50001x，光期13h/d，温度24 ± 2°C，选取生长旺盛的芽苗，将其敞口置于温室中炼苗3d后，取出，无菌水洗净底部培养基，移栽到灭菌过的1/2园土 +1/2河沙的基质中，移栽后保持湿度85%以上，温度30°C，30天后统计生根成活率，成活率88%。
[0008]实施例2
选择生长健壮的植株，切取长约3cm的茎段，放入玻璃瓶中，三层纱布封口，流水冲洗lh，洗去附着表面的多数杂菌，浸泡于lg/L多菌灵+800mg/L的羧卞青霉素钠，置于120r/min摇床上振荡1.5h,超净工作台上70%酒精处理lmin, lg/L升萊处理15min,无菌水冲洗干净，消毒处理过的无菌茎段接种到BL+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+10%椰子汁+2g/LCH的培养基中进行腋芽的诱导，附加葡萄糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度24±2°C，光照强度22001x，光照 8h，诱导出来的芽苗接入 MS+6-BA2.0mg/L+2.0mg/LKT+0.5mg/LNAA+4.0g/L 琼脂+20g/L魔芋粉培养基中进行增殖培养，附加葡萄糖30g/L，琼脂6.5g/L，光照50001x，光期13h/d，温度24 ± 2°C，选取生长旺盛的芽苗，将其敞口置于温室中炼苗3d后，取出，无菌水洗净底部培养基，移栽到灭菌过的1/2园土 +1/2河沙的基质中，移栽后保持湿度85%以上，温度30°C，30天后统计生根成活率，成活率92%。
[0009]实施例3
选择生长健壮的植株，切取长约3cm的茎段，放入玻璃瓶中，三层纱布封口，流水冲洗lh，洗去附着表面的多数杂菌，浸泡于lg/L多菌灵+800mg/L的羧卞青霉素钠，置于120r/min摇床上振荡1.5h,超净工作台上70%酒精处理lmin, lg/L升萊处理15min,无菌水冲洗干净，消毒处理过的无菌茎段接种到BL+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+10%椰子汁+2g/LCH的培养基中进行腋芽的诱导，附加葡萄糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度24±2°C，光照强度22001x，光照 8h，诱导出来的芽苗接入 MS+6-BA2.0mg/L+1.5mg/LKT+0.5mg/LNAA+4.0g/L 琼脂+20g/L魔芋粉培养基中进行增殖培养，附加葡萄糖30g/L，琼脂6.5g/L，光照50001x，光期13h/d，温度24 ± 2°C，选取生长旺盛的芽苗，将其敞口置于温室中炼苗3d后，取出，无菌水洗净底部培养基，移栽到灭菌过的1/2园土 +1/2河沙的基质中，移栽后保持湿度85%以上，温度30°C，30天后统计生根成活率，成活率94%。
【权利要求】
1.一种挂苦绣球组织培养的快速繁殖方法，包括茎段的消毒、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、野外生根诱导等，其主要步骤如下: (1)取挂苦绣球的茎段，进行消毒处理； (2)将步骤(I)消毒处理过的无菌茎段接种到BL+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+10%椰子汁+2g/LCH的培养基中进行腋芽的诱导，附加葡萄糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度24±2°C，光照强度22001x，光照8h ； (3)取步骤(2)诱导出来的芽苗接入MS+6-BA1.5-2.0mg/L+1.5-2.0mg/LKT+0.5mg/LNAA+4.0g/L琼脂+15-20g/L魔芋粉培养基中进行增殖培养，附加葡萄糖30g/L，琼脂6.5g/L，光照 50001x，光期 13h/d，温度 24±2°C ； (4)将步骤(3)增殖后的芽苗进行野外生根诱导。
2.按照权利要求1所述的一种挂苦绣球组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(I)中所述挂苦绣球无菌茎段的获得为选择生长健壮的植株，切取长约3cm的茎段，放入玻璃瓶中，三层纱布封口，流水冲洗lh，洗去附着表面的多数杂菌，浸泡于lg/L多菌灵+800mg/L的羧卞青霉素钠，置于120r/min摇床上振荡1.5h，超净工作台上70%酒精处理lmin, lg/L升萊处理15min,无菌水冲洗干净。
3.按照权利要求1所述的一种挂苦绣球组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(4)中所述挂苦绣球野外生根诱导的方法为选取生长旺盛的芽苗，将其敞口置于温室中炼苗3d后，取出，无菌水洗净底部培养基，移栽到灭菌过的1/2园土 +1/2河沙的基质中，移栽后保持湿度85%以上，温度30°C，30天后统计生根成活率。
【文档编号】A01H4/00GK104304019SQ201410550721
【公开日】2015年1月28日 申请日期:2014年10月17日 优先权日:2014年10月17日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司