一种日本食蚧蚜小蜂的扩繁方法与流程

本发明涉及农林害虫生物防治技术领域，尤其涉及一种日本食蚧蚜小蜂的扩繁方法。

背景技术：

橡副珠蜡蚧(Parasaissetia nigra Nitner)又名橡胶盔蚧、乌黑副盔蚧，属同翅目Hemiptera，蚧总科Coccoidea，蜡蚧科Coccidae，副珠蜡蚧属Parasaissetia。该虫近年在橡胶树上大面积爆发成灾，严重影响了我国天然橡胶的生产和发展。

橡副珠蜡蚧寄主繁多，据记载有36个科160多种寄主植物，是橡胶、木薯、番荔枝、柑橘、咖啡、棉花、番石榴、橡芒果、木瓜等热带作物的重要害虫。该虫主要以成虫、若虫刺吸寄主植物的叶片和嫩枝的汁液，致使枝叶发黄、萎缩、落叶、枝条干枯等；另外，该虫还分泌蜜露诱发煤烟病，影响植株的光合作用。为害轻时，导致寄主植物生长受阻及产量下降；严重时植株整株枯死，据统计，该虫可造成橡胶11％以上的损失。

目前，对橡副珠蜡蚧的防治主要还是利用化学药剂，但随着对该虫防效较好的氧化乐果、杀扑磷等高毒药剂的禁用，以及乐果、毒死蜱等中毒药剂的限用，其药剂选择范围更加狭窄，加之橡胶树体高大，难以将药剂送到胶树的受害部位，从而导致其防治效果更加不理想。另外，高毒农药的使用易破坏生物多样性，杀伤了大量害虫天敌，难以对害虫进行持续防控。

利用天敌进行生物防控是防治介壳虫的重要技术，国内外利用寄生蜂防治介壳虫也有许多成功的例子。橡副珠蜡蚧在橡胶上暴发成灾后，国内多家单位对其开展了天敌资源的调查、利用研究，筛选出了日本食蚧蚜小蜂、斑翅食蚧蚜小蜂、副珠蜡蚧阔柄跳小蜂、优雅岐脉跳小蜂等田间优势寄生蜂。

日本食蚧蚜小蜂Cocophagus japonicus Compere属膜翅目Hymenoptera，蚜小蜂科Aphelinidae，食蚧蚜小蜂属Coccophagus，是一种广泛分布的蜡蚧寄生蜂，中国、日本、美国均有报道，寄主有龟蜡蚧、红蜡蚧、角蜡蚧、褐软蜡蚧、日本蜡蚧、油榄黑盔蚧、伪角蜡蚧等多种蜡蚧。日本食蚧蚜小蜂能寄生橡副珠蜡蚧的2龄若虫、3龄若虫、初期成虫、褐色期成虫，寄生橡副珠蜡蚧后，其每头蚧虫体内能羽化出一头寄生蜂。经调查，该蜂广泛分布于橡胶中幼林及开割林，是一种具有良好应用前景的寄生性天敌。尽管如此，由于该蜂在林间的自然种群数量不高，对害虫达不到自然控制的目的。如果能够实现人工饲养，然后在橡副珠蜡蚧2龄若虫、3龄若虫、初期成虫、褐色期成虫时大量释放，则能提高对橡副珠蜡蚧的寄生率，实现对害虫种群数量的控制。对于该蜂的研究，国内外主要集在寄主、分布、形态方面，未见人工繁殖利用，也未见相关的资料可供借鉴。因此，为了实现对日本食蚧蚜小蜂的有效利用，需要提供一种低成本，简便易行、适用于规模繁蜂方法。

技术实现要素：

有鉴于此，本发明提供了一种日本食蚧蚜小蜂的扩繁方法，解决了繁殖效率低、成本高和寄生效率低的问题。

本发明采用的技术手段如下：一种日本食蚧蚜小蜂的扩繁方法，包括以下步骤：

(1)寄主植物的处理

挑选南瓜作为寄主植物；将甲基托布津可湿性粉剂用水配制成药液；对南瓜表面进行消毒杀菌处理并晾干；

(2)中间寄主的扩繁

选用橡副珠蜡蚧作为中间寄主；采集带有橡副珠蜡蚧成虫的橡胶枝条；放入仅上表面开口的避光盒子进行橡副珠蜡蚧初孵若虫收集；接种橡副珠蜡蚧初孵若虫至南瓜表面进行培育；

(3)寄生蜂的扩繁

选用日本食蚧蚜小蜂作为寄生蜂；将步骤(2)培育好的橡副珠蜡蚧若虫的南瓜放入繁殖室内进行寄生蜂接蜂；将已接好寄生蜂的蚧虫进行培养；加入野外的寄生蜂蜂种进行复壮。

优选地，所述步骤(2)在温控室内接种培育，温度为24～26℃，光周期L:D＝12h:12h，湿度70％～85％。

优选地，所述步骤(2)进行接种培育后，每天翻动一次南瓜，橡副珠蜡蚧发育至2龄若虫后，产生较多蜜露，用清水冲洗分泌物蜜露，直至发育至3龄若虫或成虫。

优选地，所述步骤(3)接种时寄生蜂与橡副珠蜡蚧若虫的数量比例为1:40～60。

优选地，所述步骤(3)中繁殖室的温度为26～28℃，光周期L:D＝12h:12h，湿度70％～85％。

优选地，所述步骤(3)中将已接种寄生蜂的南瓜取出放置培养架上培养15～17天。

优选地，所述步骤(3)中蛹羽化为成虫时补充15～25％的蔗糖溶液进行扩繁。

优选地，所述步骤(3)中每隔2～3个月加入30％～50％野外日本食蚧蚜小蜂蜂种进行复壮。

采用本发明所提供的一种日本食蚧蚜小蜂的扩繁方法，具有以下有益效果：

1、本发明选用甲基托布津进行寄主植物南瓜的消毒杀菌处理，利于延长南瓜的使用时间。

2、本发明利用橡副珠蜡蚧的趋光性，发明了简易、高效的橡副珠蜡蚧初孵若虫的收集方法及接种方法。

3、本发明在接橡副珠蜡蚧初孵若虫后的一个星期内翻动南瓜，使橡副珠蜡蚧初孵若虫后能均匀分布在南瓜的各表面，最大化提高南瓜的利用率。

4、本发明规定了定期进行橡副珠蜡蚧若虫期及成虫期的蜜露清理，有利于提高中间寄主橡副珠蜡蚧的存活率。

5、本发明防治对象橡副珠蜡蚧作为日本食蚧蚜小蜂繁蜂的中间寄主，有利于保持日本食蚧蚜小蜂对橡副珠蜡蚧的寄生力，保证田间防治效果。

6、本发明提出了日本食蚧蚜小蜂扩繁的最适温度、寄主及补充营养等扩繁条件，提高了日本食蚧蚜小蜂的扩繁效率。

7、本发明可实现周年繁殖，批量生产优质日本食蚧蚜小蜂，并能有效解决繁殖效率低，生物防治供需不及时的问题

附图说明

图1为本发明一种日本食蚧蚜小蜂的扩繁方法的流程示意图。

具体实施方式

以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。

实施例1

如图1所示：一种日本食蚧蚜小蜂的扩繁方法，包括以下步骤：

(1)寄主植物的处理

挑选3斤/个完整成熟的南瓜作为寄主植物，用湿抹布清洁表面，晾干备用；将70％甲基托布津可湿性粉剂用清水配成1000倍药液；用抹布浸湿药液对南瓜表面进行消毒杀菌处理，晾干，放置2天备用。

(2)中间寄主的扩繁

选用橡副珠蜡蚧作为中间寄主；采集野外带有产卵期橡副珠蜡蚧成虫(且有初孵若虫从成虫介壳下爬出)的橡胶枝条；放入仅上表面开口的避光盒子进行扩繁，橡胶枝条上面放入几张新鲜的橡胶叶片；收集橡副珠蜡蚧初孵若虫用软毛笔轻轻扫至南瓜表面进行温控室内接种培育，形成以南瓜为寄主的试验种群。温控室的温度为24℃，光周期L:D＝12h:12h，湿度70％。一个星期内每天翻动一次南瓜，使得南瓜各表面的橡副珠蜡蚧初孵若虫分布均匀。发育至2龄若虫后，其分泌物蜜露逐渐变多，每隔5天用清水冲洗分泌物蜜露，然后通过电风扇等使南瓜表面快速晾干，直至发育至3龄若虫或初期成虫，一部分用于接种寄生蜂，一部分任其继续发育，留作橡副珠蜡蚧繁殖种源。

(3)寄生蜂的扩繁

选用个体大、活力强日本食蚧蚜小蜂的作为寄生蜂；将步骤(2)培育好的橡副珠蜡蚧若虫或成虫的南瓜放入繁殖室内的接蜂笼内接种寄生蜂，繁殖室的温度为26℃，光周期L:D＝12h:12h，湿度70％，寄生蜂与副珠蜡蚧若虫的数量比例为1:40，接种2天后用吹风机吹掉南瓜上的日本食蚧蚜小蜂成虫；将已接种寄生蜂的南瓜取出放置培养架上培养15天至蛹，蛹快羽化成虫时，补充15％的蔗糖溶液移至接蜂笼中扩繁；每隔2个月向接蜂笼内加入野外30％寄生蜂蜂种进行复壮。

实施例2

如图1所示：一种日本食蚧蚜小蜂的扩繁方法，包括以下步骤：

(1)寄主植物的处理

挑选每5斤/个完整成熟的南瓜作为寄主植物用湿抹布清洁表面，晾干备用；将70％甲基托布津可湿性粉剂用清水配成1000倍药液；用抹布浸湿药液对南瓜表面进行消毒杀菌处理，放置3天晾干；

(2)中间寄主的扩繁

选用橡副珠蜡蚧作为中间寄主；采集野外带有产卵期橡副珠蜡蚧成虫(且有初孵若虫从成虫介壳下爬出)的橡胶枝条；放入仅上表面开口的避光盒子进行扩繁，橡胶枝条上面放入几张新鲜的橡胶叶片；收集橡副珠蜡蚧初孵若虫用软毛笔轻轻扫至至南瓜表面进行温控室内接种培育，形成以南瓜为寄主的试验种群。温控室的温度为26℃，光周期L:D＝12h:12h，湿度85％。一个星期内每天翻动一次南瓜，使得南瓜各表面的橡副珠蜡蚧初孵若虫分布均匀。发育至2龄若虫期间，每隔6天用清水冲洗分泌物蜜露，然后通过电风扇等使南瓜表面快速晾干，直至发育至3龄若虫或初期成虫，一部分用于接种寄生蜂，一部分任其继续发育，留作橡副珠蜡蚧繁殖种源。

(3)寄生蜂的扩繁

选用个体大、活力强日本食蚧蚜小蜂作为寄生蜂；将步骤(2)培育好的橡副珠蜡蚧若虫或成虫的南瓜放入繁殖室内的接蜂笼接种寄生蜂，繁殖室的温度为28℃，光周期L:D＝12h:12h，湿度85％，寄生蜂与副珠蜡蚧若虫的数量比例为1:50，接种3天后用吹风机吹掉南瓜上的日本食蚧蚜小蜂成虫；将已接种寄生蜂的南瓜取出放置培养架上培养17天至蛹，蛹快羽化成虫时，补充25％的蔗糖溶液移至接蜂笼中扩繁；每隔3个月向接蜂笼内加入野外50％寄生蜂蜂种进行复壮。

实施例3

如图1所示：一种日本食蚧蚜小蜂的扩繁方法，包括以下步骤：

(1)寄主植物的处理

挑选每4斤/个完整成熟的南瓜作为寄主植物用湿抹布清洁表面，晾干备用；将70％甲基托布津可湿性粉剂用清水配成1000倍药液；用抹布浸湿药液对南瓜表面进行消毒杀菌处理，放置2.5天晾干；

(2)中间寄主的扩繁

选用橡副珠蜡蚧作为中间寄主；采集野外带有产卵期橡副珠蜡蚧成虫(且有初孵若虫从成虫介壳下爬出)的橡胶枝条；放入仅上表面开口的避光盒子进行扩繁，橡胶枝条上面放入几张新鲜的橡胶叶片；收集橡副珠蜡蚧初孵若虫用软毛笔轻轻扫至至南瓜表面进行温控室内接种培育，形成以南瓜为寄主的试验种群。温控室的温度为25℃，光周期L:D＝12h:12h，湿度80％。一个星期内每天翻动一次南瓜，使得南瓜各表面的橡副珠蜡蚧初孵若虫分布均匀。发育至2龄若虫期间，每隔5天用清水冲洗分泌物蜜露，然后通过电风扇等使南瓜表面快速晾干，直至发育至3龄若虫或成虫，一部分用于接种寄生蜂，一部分任其继续发育，留作橡副珠蜡蚧繁殖种源。

(3)寄生蜂的扩繁

选用个体大、活力强日本食蚧蚜小蜂作为寄生蜂；将步骤(2)培育好的橡副珠蜡蚧若虫或成虫的南瓜放入繁殖室内的接蜂笼接种寄生蜂，繁殖室的温度为27℃，光周期L:D＝12h:12h，湿度80％，寄生蜂与副珠蜡蚧若虫的数量比例为1:60，接种2.5天后用吹风机吹掉南瓜上的食蚧蚜小蜂日本食蚧蚜小蜂成虫；将已接种寄生蜂的南瓜取出放置培养架上培养16天至蛹，蛹快羽化成虫时，补充20％的蔗糖溶液移至接蜂笼中扩繁；每隔2.5个月向接蜂笼内加入野外40％寄生蜂蜂种进行复壮。

其中，接蜂笼：大小为长*宽*高＝100Cm*40Cm*150Cm的不锈钢框架，中间用木板隔断分为3台，每台增加光照系统，顶面用玻璃封闭，背面和侧面用150目的纱网封闭，正面做两开的半圆形拉门，用纱网对开门进行密封，通过门进行繁殖过程中的操作。

培养架：大小为长*宽*高＝200Cm*40Cm*180Cm的角钢框架，中间木板隔分，每层高45Cm，共4层，在每层上安装40瓦日光灯两盏。

蔗糖水：配制浓度20％左右的蔗糖水用于日本食蚧蚜小蜂成虫的补充营养。

为了进一步验证本发明的有益效果，做了以下对比性验证试验:

1、寄主植物的选择

试验方法：在南瓜和橡胶上各接刚孵化的1龄若虫200头。置于25、27℃的人工气候箱内饲养。每天观察、记录橡副珠蜡蚧各龄期的发育历期、存活数，计算各龄期的存活率；在产卵期间，每天调查孵化出来的若虫数，并把若虫清除干净，产卵结束后，对每头橡副珠蜡蚧进行检查，观察其未孵化的卵粒数，并计算在两种寄主植物上的种群参数。试验重复3次。

表1：橡副珠蜡蚧在南瓜和橡胶寄主植物上的生命表参数

表1为橡副珠蜡蚧在橡胶和南瓜的生命表参数。结果表明，南瓜作为寄主植物时，橡副珠蜡蚧的内禀增长率最快，最适合其生长繁殖。因此，根据结果选择每个3～5斤重的成熟南瓜作为繁殖橡副珠蜡蚧的寄主植物。

2、寄主植物杀菌处理

试验设置：将刚摘下的10个成熟南瓜用甲基托布津1000倍液、施保功1000位液、多菌灵800倍液擦洗、消毒表面，然后放入26℃室内，每天观察1次，记录南瓜腐败时间。实验重复3次。

表2几种杀菌剂处理后南瓜的贮藏时间(天)

表2数据为几种杀菌剂处理后，南瓜的保存时间。由表2可见，甲基托布津处理后，南瓜的何保存期下对照相比可延长约40天，也显著长于施保功和多菌录处理。因此，用70％甲基托布津可湿性粉剂配成的1000倍液擦洗、消毒南瓜表面，进行表面杀菌处理。

3、橡副珠蜡蚧初孵若虫的趋光性试验

实验方法：将附有橡副珠蜡蚧成虫的橡胶树枝条放入一个仅上表面开口向上的避光盒子，然后在枝条上面放入几张新鲜的橡胶叶片，光线仅从顶端盒子的开口处进入，3个小时后，统计橡胶叶片上和盒内其他地方的橡副珠蜡蚧初孵若虫的数量，计算趋光率。

结果表明：3小时后，在光源处的橡胶叶上的初孵若虫数量为1938头，而其它方向的为95头，趋光率为95.32％。说明橡副珠蜡蚧初孵若虫的趋光性明显。

4、蜜露清理试验

试验方法：设置从2龄若虫后用清水冲洗南瓜表面和不清洗南瓜表面两种处理，清洗后用电风扇快速吹干和自然晾干两种处理。当橡副珠蜡蚧发育到成虫时，观察统计存活率。

结果表明：不用水冲蜜露的存活率35.4％，而用水冲定期冲洗南瓜表面蜜露的存活率为64.2％，且冲后用风扇快速吹干也可以提高低龄若虫的存活率。

5、日本食蚧蚜小蜂对橡副珠蜡蚧的期选择

试验方法：在南瓜上挑选二龄若虫、三龄若虫、初期成虫、褐色期成虫各60头。按♀蜂：♂蜂：蚧虫＝4：1：60的接蜂比例用自制的局部接蜂罩接蜂，让小蜂寄生24h后取出，并去除南瓜上的成蜂，置于室温约为27℃室内，每隔24h观察1次，观察小蜂的发育历期、出蜂数、性比等。实验重复4次。

表3寄主龄期对小蜂发育及寄生的影响

表3数据为不同日本食蚧蚜小蜂对中间寄主橡副珠蜡蚧的龄期选择性。从表3可见，日本食蚧蚜小蜂的发育历期和寄生率均以橡副珠蜡蚧为3龄若虫最高，雌蜂率以初期成虫最高。因此，综合考虑橡副珠蜡蚧的的发育历期及寄生蜂的寄生率、出蜂数、雌性比等，可选择3龄若虫～初期成虫的橡副珠蜡蚧繁殖日本食蚧蚜小蜂。

6、日本食蚧蚜小蜂成虫期的补充营养选择

试验方法：收集初羽化的成蜂，分别5头为一组装于试管(1.5cm×7.5cm)内，管口用棉花塞住。选择蜂蜜、葡萄糖、果糖、蔗糖，将其配制成20％的浓度，将小棉球在上述糖液中浸湿后放入装蜂的试管中进行营养补充，对照补充清水。每处理雌30头，放入温度27±1℃，相对湿度为70％±10％，光周期L：D＝12：12的人工气候箱内，每天观察2次成蜂的存活情况，计算成虫寿命。按雌蜂：雄蜂：蚧虫＝4：1：60的比例接蜂，补充20％的蜂蜜、葡萄糖、果糖、蔗糖，对照为空白对照，接蜂在上述人工气候箱进行。每天更换新的蚧虫，并解剖换出的已接过蜂的蚧虫，计数产卵量。实验重复5次。

表4数据为不同营养条件下日本食蚧蚜小蜂的成虫寿命和产卵量

结果表明：用蔗糖作为补充营养时，成虫寿命最长，产卵量最高，可作为扩繁时成蜂的补充营养。

7、日本食蚧蚜小蜂扩繁温度选择

试验方法：按4雌：1雄：60蚧(3龄)的比例在27℃条件下接蜂24h，然后分别入温度18、21、24、27、30℃共5个人工气候箱内，观察小蜂的发育历期、出蜂量、寄生率(以发育到蛹期为标准)，重复3次。成虫寿命：每个重复30头蜂，重复3次，放入以人工气候箱，每日观察1次小蜂存活情况，观察到小蜂死亡。

表5温度对日本食蚧蚜小蜂种群增长的影响

结果表明：发育历期以30℃时最短，出蜂数及寄生率以24℃时最高。因此，综合考虑寄生率、发育历期、出蜂数，成虫寿命等因素，选用27℃作为日本食蚧蚜小蜂扩繁的温度条件。

综上所述，采用本发明所提供的一种日本食蚧蚜小蜂的扩繁方法，本发明选用甲基托布津进行寄主植物南瓜的消毒杀菌处理，利于延长南瓜的使用时间。利用橡副珠蜡蚧的趋光性，发明了简易、高效的橡副珠蜡蚧初孵若虫的收集方法及接种方法。在接种橡副珠蜡蚧初孵若虫后的一个星期内翻动南瓜，使橡副珠蜡蚧初孵若虫后能均匀分布在南瓜的各表面，最大化提高南瓜的利用率。规定了定期进行橡副珠蜡蚧若虫期及成虫期的蜜露清理，有利于提高中间寄主橡副珠蜡蚧的存活率。有利于保持日本食蚧蚜小蜂对橡副珠蜡蚧的寄生力，保证田间防治效果。提出了日本食蚧蚜小蜂扩繁的最适温度、寄主及补充营养等扩繁条件，提高了日本食蚧蚜小蜂的扩繁效率。可实现周年繁殖，批量生产优质日本食蚧蚜小蜂，并能有效解决繁殖效率低，生物防治供需不及时的问题。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明保护的范围之内。