一种解除梨种子休眠的方法与流程

本发明涉及一种解除梨种子休眠的方法，涉及种子吸胀、露白和萌芽，属于植物生理学和生产栽培领域。

背景技术：

梨砧木种子具有休眠特性，在生产上，常对种子进行几个月的低温层积处理以打破休眠。但是层积处理的温度和时间需要事先确定好播种期，否则会因过早发芽或未作破除休眠而错过最佳播种时期，这给生产上大面积种植和育苗带来困难。因此打破种子休眠对缩短育种周期、提高育苗率、提高苗木质量及降低生产成本具有重要意义。

梨苗的砧木以及杂交后代的种子因为受到果皮障碍和抑制物质、种胚休眠和种胚后熟等原因的影响，不能像其它种子，如：黄瓜、小麦、水稻等一样萌发，需要采用打破休眠的方法进行处理才可正常萌发。在常规育种以及栽培实践中，采集种子后必须要进行低温层积处理，第二年播种，即费时费工，而且种子在沙藏期间因低温层积处理的时间长短把握或层积期间常发生腐烂，会影响种子正常解除休眠，导致播种后种子不能萌发或发芽率低，造成损失。

技术实现要素：

本发明的目的是提供一种解除种子休眠的方法，可便于了解掌握梨种子休眠规律并观察解除休眠过程中种子的变化。

本发明在培养皿进行种子层积难点在于湿度的掌控和保持，脱脂棉具有很好的保湿作用且通气性好。本发现中脱脂棉的使用是这一层积方法中的创新点。

实现上述发明目的的技术解决方案是：

一种解除种子休眠的方法，包括下列步骤：

1)种子前期处理

首先用水选法挑选种子，挑选颗粒饱满，大小一致的种子。(具体方法为手抓一把种子放入盛有水的烧杯中，挑选颗粒饱满，大小一致的种子)其次用2％naclo对种子消毒，防止细菌侵染，消毒后的种子用水清洗1-3次。最后将种子放入盛有水的烧杯中浸泡24h，让种子充分吸水。

2)层积种子

用脱脂棉包裹种子，将脱脂棉撕成片状，尽量薄，包裹在种皮表面。把包裹好的种子放入培养皿，种子之间留有一定距离，用移液枪吸水湿润脱脂棉。然后将培养皿放入盒子或用锡箔纸包裹进行遮光处理。最后一起放入4℃冰箱层积。以种子露白为信号结束层积。

3)控制湿度

在种子层积的过程中，湿度的控制极为重要。每隔3-4日浇一次水。浇水时只需将脱脂棉浸湿即可，浇完水要用移液枪吸除种子周围的水，培养皿内不能有积水，防止种子发霉。

4)萌芽测试

种子层积期间先做好芽床，只需在培养皿内垫两层滤纸并湿润即可。层积结束后除去种皮表面的脱脂棉，将种子洗净放入准备好的芽床内。用锡箔纸包裹放入25℃恒温干燥箱内，在黑暗的环境下进行萌芽测试。每天统计一次发芽率并浇水保湿(2-3日更换一次滤纸)。

脱脂棉具有保湿的能力而且通气性良好，能很好的解决种子层积过程中如何保持种子过湿或过干的难点。本发明的创新点就在于把脱脂棉的固有的作用和分子实验结合在一起，这不仅解决了种子层积过程中湿度的问题而且为了后续的实验试剂的处理，观察、研究种子在解除休眠过程中的生理变化具有重要意义。

梨种子因为受到果皮障碍和抑制物质、种胚休眠和种胚后熟等原因的影响，不能像其它种子，如：黄瓜、小麦、水稻等一样萌发，必须经过打破休眠的方法可正常萌发。在种子解除休眠的过程中会发生一系列的生理变化，为了研究这一过程中的生理变化必然会对这一期间的种子进行处理研究，而在培养皿中使用脱脂棉包裹的种子很方便对其进行试剂处理，如：可以解决在不同时间段对种子进行激素处理后，种子rna的变化等；本发明中脱脂棉在种子层积过程中作用可谓巨大，为后续研究打下了基础，因此本次发明具有重要意义。

本发明的有益效果:

1)使用培养皿层积处理来打破梨种子休眠的方法，可以全程观察到层积过程中种子发生的变化，更好的研究其休眠规律及解除休眠的方法；

2)打破种子休眠有很多方法：机械处理、低温层积和化学药剂处理，而使用培养皿做培养床不仅可以进行层积作用而且方便加入化学药剂和激素以研究它们对解除种子休眠的作用；

3)本发明具有坚实的理论依据，低温层积催芽的几个条件(低温、通气和湿度)皆具备，方法较简便，易于操作和实际应用。

附图说明

图1是本发明所述方法培养皿层积流程图；

图2是本发明培养皿层积实物图；

图3是本发明种子萌芽实物图。

具体实施方式

下面结合附图并以具体实施例，进一步阐明本发明。应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于

本技术：
所附权利要求所限定的范围。

果树种子休眠是十分常见的现象，并且休眠的原因复杂。生产上常由于果树种子休眠未能及时解除，导致发芽率低甚至隔年发芽的现象，严重影响了正常育苗工作。因此，探索解除种子休眠的方法在生产上具有重大意义。我们应用本发明的方法，可简便、有效的解除种子休眠，为研究种子休眠规律及解除种子休眠奠定基础。

以下实施例，仅为通过举例来更好理解本发明，不是对本发明保护范围的限制。

实施例1

本实例以豆梨种子为实验材料，过程如下：

1、挑选种子用水选法。手抓一把种子放入盛有水的烧杯中，除去浮在水面的干瘪种子，挑选颗粒饱满，无破损的种子，然后放在滤纸上自然干燥。

2、种子消毒用2％naclo对种子消毒，防止细菌侵染，消毒后的种子用水清洗1-3次。

3、浸泡种子将消毒后的种子放入盛有水的烧杯中浸泡24h，让种子吸足水分。

4、包裹种子准备好脱脂棉，将脱脂棉撕的尽量薄一些，过厚种子容易发霉，把脱脂棉包裹在种皮表面，放入培养皿。

5、浸湿脱脂棉用移液枪吸水浸湿脱脂棉，脱脂棉湿润后用移液枪洗除脱脂棉周围水分。培养皿内不能有积水，防止种子发霉。

6、层积条件层积需在4℃冰箱内进行，且必须对培养皿进行遮光处理，可以将培养皿放入盒子内或者包裹上锡箔纸。隔3-4日浇一次水，只需将脱脂棉湿润即可。

7、层积时间不同梨品种种子休眠程度不一样，以种子露白为信号结束层积，大约需要40-50日不等。

8、制作芽床选用9cm或者12cm的培养皿，里面垫两层滤纸并湿润。

9、萌芽测试将层积好的种子去除脱脂棉并洗净，放入芽床内。将培养皿用锡箔纸包裹放入25℃恒温培养箱内，在黑暗的条件下进行萌芽测试。保持滤纸持续湿润(2-3日更换一次滤纸)并且每天统计一次发芽率。

在实验研究中，根据研究内容会对种子进行不同处理而常规的沙子层积不方便向种子添加药品处理；因此从生活经历中发现了在培养基中用脱脂棉包裹种子进行层积处理，这种层积方法有利于对种子进行不同试剂处理，而且对于观察、研究种子在解除休眠过程中的生理变化具有重要意义。

技术特征：

技术总结
本发明公开了一种解除种子休眠的方法。涉及种子吸胀、露白和萌芽，属于植物生理学和生产栽培领域。本发明通过前期浸泡种子，接着用脱脂棉包裹在种皮上，利用脱脂棉保湿性能好且通透性好的特点，再通过低温层积彻底打破梨种子休眠。本方法具有易于操作、步骤简单、便于观察等优点，打破休眠的效果好，且用脱脂棉包裹方便加入化学药剂和激素以研究它们对解除种子休眠的作用。

技术研发人员：王春雷;张盼盼;宋平平;刘正阳;孙娅;黄旭
受保护的技术使用者：扬州大学
技术研发日：2017.04.07
技术公布日：2017.07.25