本发明属于植物生理生态学和植物化学研究领域，具体涉及一种破除南方红豆杉种子休眠的方法。
背景技术
南方红豆杉，拉丁学名taxuschinensisvar.mairei；东北红豆杉拉丁学名taxuscuspidata，均系红豆属针叶树，且均为是我国ⅰ级重点保护野生植物。其中南方红豆杉是红豆属(taxus)植物中资源储存量较大以及自然分布最广的种类之一。东北红豆杉在我国北方地区的分布面积也较大。红豆杉属植物中含有近年来被认为最有效的抗癌药物之一—紫杉醇，据统计，全球紫杉醇年需求量3000kg，市场需求巨大且严重供不应求。从红豆杉属植物的树叶中提取是获得紫杉醇的主要途径，所有对红豆杉资源的需求也在不断增加。
为了满足国际市场对紫杉醇的需求，亟需开展红豆杉人工林培育。在培育红豆杉苗木时，通常要先进行发芽后，再进行播种。植物种子的发芽率高、发芽势强，预示着出苗快而整齐，苗壮。红豆杉种子一般需要休眠一段时间才具有萌发能力，因此，在红豆杉种子相同的情况下，通过简单的方法打破红豆杉种子休眠，并提高其发芽率和发芽势，可以减少育苗用种量，降低成本。本发明旨在提供一种打破红豆杉种子休眠并提高其发芽率和发芽势的方法。
目前，打破植物种子休眠和促进发芽的方法包括温水浸种、有机溶剂渗透法、渗透调节法、机械处理、层积处理、物理场处理(电场、磁场、超声波、红外线)等。异戊醇，即3-甲基-1-丁醇(3-methyl-1-butanol)，是一种常见的有机溶剂，尚未见利用它来打破植物种子休眠或促进发芽的公开报道。本发明提供的方法系利用异戊醇水溶液浸泡红豆杉种子以打破其休眠，并提高其发芽率和发芽势，因此与上述方法均不同。
技术实现要素：
本发明提供的红豆杉种子发芽的方法，其特征在于，按如下步骤操作：
(1)将异戊醇与水按体积比1：1000000～1：100000混合，超声处理10-30分钟，得到混合均匀的异戊醇水溶液；
(2)用步骤(1)得到的异戊醇水溶液浸泡红豆杉种子，浸泡温度25～35℃，浸泡时间12～36小时；
(3)在培养皿内铺四层用水润湿的滤纸，将按步骤(2)处理后的红豆杉种子放在滤纸上，盖上培养皿盖，培养皿置入培养箱中进行发芽，至培养皿放入培养箱后的第15～30天，终止发芽。
所述的红豆杉种子为东北红豆杉(taxuscuspidata)或南方红豆杉(taxuschinensisvar.mairei)种子中的一种。
用本发明提供的方法对红豆杉种子进行处理，其发芽率和发芽势均明显增加。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行进一步描述，但本发明不限于实施例的任何一个。
实施例1
本实施例描述的是对采自福建的南方红豆杉种子(taxuschinensisvar.mairei)实施本发明专利技术内容。南方红豆杉种子被分为2组，即处理组和对照组，分别进行不同的处理。所述的处理组指实施本发明专利技术内容的组别；对照组为说明本发明专利创造性和实用性而设立的组别。
对处理组南方红豆杉种子进行如下步骤操作：
(1)将异戊醇与水按体积比1:1000000混合，超声处理10分钟，得到异戊醇水溶液；
(2)用步骤(1)得到的异戊醇水溶液浸泡南方红豆杉种子，浸泡温度25℃，浸泡时间24小时；
(3)在培养皿内铺四层用水润湿的滤纸，将按步骤(2)处理后的南方红豆杉种子放在滤纸上，盖上培养皿盖，培养皿置入培养箱中进行发芽，至培养皿放入培养箱后的第15天，终止发芽。
对对照组南方红豆杉种子进行如下步骤操作：用蒸馏水代替处理组的异戊醇水溶液，只进行本实施例处理组南方红豆杉种子操作步骤中的步骤(2)和步骤(3)。
发芽结束后，进行统计分析，结果表明：实施本发明专利技术内容的处理组南方红豆杉种子发芽高峰日为浸种后第11天，发芽势为38.6％，发芽率为59.6％；对照南方红豆杉种子发芽高峰日为浸种后第14天，发芽势为3.3％，发芽率为12.9％，说明本发明提供的方法，南方红豆杉种子的发芽势和发芽率均明显提高，同时发芽高峰日也提前了3天。
实施例2
本实施例描述的是对采自浙江的南方红豆杉种子(taxuschinensisvar.mairei)实施本发明专利技术内容。南方红豆杉种子被分为2组，即处理组和对照组，分别进行不同的处理。所述的处理组指实施本发明专利技术内容的组别；对照组为说明本发明专利创造性和实用性而设立的组别。
对处理组南方红豆杉种子进行如下步骤操作：
(1)将异戊醇与水按体积比1:500000混合，超声处理20分钟，得到异戊醇水溶液；
(2)用步骤(1)得到的异戊醇水溶液浸泡南方红豆杉种子，浸泡温度35℃，浸泡时间12小时；
(3)在培养皿内铺四层用水润湿的滤纸，将按步骤(2)处理后的南方红豆杉种子放在滤纸上，盖上培养皿盖，培养皿置入培养箱中进行发芽，至培养皿放入培养箱后的第25天，终止发芽。
对对照组南方红豆杉种子进行如下步骤操作：用蒸馏水代替处理组的异戊醇水溶液，只进行本实施例处理组南方红豆杉种子操作步骤中的步骤(2)和步骤(3)。
发芽结束后，进行统计分析，结果表明：实施本发明专利技术内容的处理组南方红豆杉种子发芽高峰日为浸种后第11天，发芽势为49.5％，发芽率为67.2％；对照南方红豆杉种子发芽高峰日为浸种后第15天，发芽势为5.4％，发芽率为32.3％，说明本发明提供的方法，南方红豆杉种子的发芽势和发芽率均明显提高，同时发芽高峰日也提前了4天。
实施例3
本实施例描述的是对采自黑龙江的东北红豆杉种子(taxuscuspidata)实施本发明专利技术内容。东北红豆杉种子被分为2组，即处理组和对照组，分别进行不同的处理。所述的处理组指实施本发明专利技术内容的组别；对照组为说明本发明专利创造性和实用性而设立的组别。
对处理组东北红豆杉种子进行如下步骤操作：
(1)将异戊醇与水按体积比1:600000混合，超声处理20分钟，得到异戊醇水溶液；
(2)用步骤(1)得到的异戊醇水溶液浸泡东北红豆杉种子，浸泡温度30℃，浸泡时间24小时；
(3)在培养皿内铺四层用水润湿的滤纸，将按步骤(2)处理后的东北红豆杉种子放在滤纸上，盖上培养皿盖，培养皿置入培养箱中进行发芽，至培养皿放入培养箱后的第20天，终止发芽。
对对照组东北红豆杉种子进行如下步骤操作：用蒸馏水代替处理组的异戊醇水溶液，只进行本实施例处理组东北红豆杉种子操作步骤中的步骤(2)和步骤(3)。
发芽结束后，进行统计分析，结果表明：实施本发明专利技术内容的处理组东北红豆杉种子发芽高峰日为浸种后第11天，发芽势为32.5％，发芽率为69.2％；对照东北红豆杉种子发芽高峰日为浸种后第14天，发芽势为4.6％，发芽率为28.2％，说明本发明提供的方法，东北红豆杉种子的发芽势和发芽率均明显提高，同时发芽高峰日也提前了3天。
实施例4
本实施例描述的是对采自吉林的东北红豆杉种子(taxuscuspidata)实施本发明专利技术内容。东北红豆杉种子被分为2组，即处理组和对照组，分别进行不同的处理。所述的处理组指实施本发明专利技术内容的组别；对照组为说明本发明专利创造性和实用性而设立的组别。
对处理组东北红豆杉种子进行如下步骤操作：
(1)将异戊醇与水按体积比1:100000混合，超声处理30分钟，得到异戊醇水溶液；
(2)用步骤(1)得到的异戊醇水溶液浸泡东北红豆杉种子，浸泡温度25℃，浸泡时间36小时；
(3)在培养皿内铺四层用水润湿的滤纸，将按步骤(2)处理后的东北红豆杉种子放在滤纸上，盖上培养皿盖，培养皿置入培养箱中进行发芽，至培养皿放入培养箱后的第30天，终止发芽。
对对照组东北红豆杉种子进行如下步骤操作：用蒸馏水代替处理组的异戊醇水溶液，只进行本实施例处理组东北红豆杉种子操作步骤中的步骤(2)和步骤(3)。
发芽结束后，进行统计分析，结果表明：实施本发明专利技术内容的处理组东北红豆杉种子发芽高峰日为浸种后第12天，发芽势为42.3％，发芽率为62.7％；对照东北红豆杉种子发芽高峰日为浸种后第15天，发芽势为4.7％，发芽率为28.7％，说明本发明提供的方法，东北红豆杉种子的发芽势和发芽率均明显提高，同时发芽高峰日也提前了3天。