本发明涉及黄豆芽生产领域，特别涉及一种壳寡糖浸泡黄豆促进黄豆芽抗氧化品质提高的新方法。
背景技术
黄豆芽是中国的传统食品，因其营养丰富，容易烹制，深受消费者喜爱。同时黄豆芽中含有各种生理活性物质如植物甾醇、γ-氨基丁酸、大豆低聚糖、多酚、黄酮、皂苷、各种维生素和微量元素等，使其成为一种功能性食品。为了提高黄豆芽质量，各种植物生长调节剂曾被应用于黄豆萌发过程中。然而，植物生长调节剂的过量残留会对人畜和环境产生威胁，且存在许多未知风险，所以随着人们食品安全意识的提高，过去使用的植物生长调节剂已被禁用。
壳寡糖，学名β-1，4-寡聚葡萄糖胺，通常被称为几丁寡糖，壳聚寡糖，低聚壳聚糖，是自然界中唯一带正电荷的碱性低聚糖。将由天然来源的虾蟹壳制备的壳聚糖降解后即可获得壳寡糖，因此壳寡糖价格低廉，且其具有溶解性强、无毒可降解、生物相容性好等优点，具有巨大应用价值。本发明在黄豆浸泡阶段添加壳寡糖来提高黄豆芽抗氧化物质含量和抗氧化活性，其应用符合食品安全和环保要求。
技术实现要素：
为解决现有技术问题，本发明主要目的在于提供一种利用壳寡糖提高黄豆芽抗氧化品质的方法，该方法是在黄豆浸泡阶段添加壳寡糖来提高黄豆芽抗氧化物质含量和抗氧化活性。
本发明的目的通过以下技术方案来实现：
一种利用壳寡糖提高黄豆芽抗氧化品质的方法，具体操作方法如下：
(1)黄豆浸泡：将黄豆浸入黄豆质量1～2.5倍的水中，浸泡3～5小时；
在黄豆浸泡的过程中添加壳寡糖，所述壳寡糖与黄豆的质量比为1:10000000～1:10000；
(2)发芽：将浸泡后的黄豆置于温度23～28℃的环境中暗培养2～4天。具体可以为：将浸泡后的黄豆置于豆芽机中，温度保持在23～28℃，暗培养2～4天。
根据上文技术方案，优选的情况下，所述壳寡糖的分子量为1000～3000da，水溶性良好。
根据上文技术方案，优选的情况下，经过步骤(1)浸泡后的黄豆用自来水冲洗。
根据上文技术方案，优选的情况下，步骤(2)中暗培养期间每隔10～15h淋水一次。
根据上文技术方案，优选的情况下，步骤(1)中所述壳寡糖与黄豆的质量比为1:1000000～1:100000。
根据上文技术方案，优选的情况下，步骤(2)中将浸泡后的黄豆置于豆芽机中，温度保持在25℃，每隔12h淋水一次，暗培养3天。
本发明的有益效果：
本发明采用绿色无毒的壳寡糖作为黄豆芽生长激发子在黄豆浸泡过程中使用，获得的黄豆芽中具有抗氧化活性的维生素c、总多酚、九种酚类物质、总黄酮和六种黄酮类物质含量明显高于普通黄豆芽，同时采用dpph清除率、羟自由基清除率、超氧阴离子清除率等方法测定的黄豆芽的抗氧化活性也明显提高。本发明的创新点在于黄豆浸泡阶段添加壳寡糖，利用其激发子生物活性，诱导黄豆芽产生防御响应，从而提高黄豆芽中抗氧化物质的含量及其抗氧化品质，同时，这种方法简单易行，成本低廉，利于工业推广应用。
具体实施方式
下述非限定性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。
本发明下述实施例中涉及的测试如下，分别取样测定：
1.维生素c含量测定：利用2，6-二氯靛酚滴定法。
2.总多酚含量测定：以没食子酸作为标准品采用folin-ciocalteu法。
3.九种酚类物质测定：hplc法。
色谱柱：agilentporoshell120ec-c18，4.6×250mm×4μm，柱温：40℃；流速0.6ml/min；进样体积：10.0μl；检测器：紫外检测器；检测波长：254nm。流动相：(a)质量分数0.1％醋酸溶液，(b)甲醇；采用梯度洗脱程序：0～50min，5％-30％a；50～65min，30％-100％a，65～75min，100％a。
4.总黄酮含量测定：利用nano2-al(no3)3-naoh比色法测定。
5.六种黄酮类物质测定：hplc法。
色谱柱：agilentporoshell120ec-c18，4.6×250mm×4μm，柱温：40℃；流速0.6ml/min；进样体积：10.0μl；检测器：紫外检测器；检测波长：254nm。流动相：(a)质量分数0.1％醋酸溶液，(b)甲醇；采用梯度洗脱程序：0～50min，5％-30％a；50～65min，30％-100％a，65～75min，100％a。
6.dpph清除率测定：分光光度计法测定。
准确称取0.5g黄豆芽干样，加5ml60％乙醇，25℃下260rpm提取3h，6000g离心30min，取上清。
a0：2.9ml0.1mmol/ldpph+0.1ml无水乙醇；
ai：2.9ml0.1mmol/ldpph+0.1ml样品；
aj：2.9ml无水乙醇+0.1ml样品；
将a0、ai、aj在33℃避光静置30min，在波长517nm测定吸光值。
7.羟自由基清除率测定：分光光度计法测定。
准确称取0.5g黄豆芽干样，加5ml70％甲醇，25℃下260rpm提取3h，6000g离心30min，取上清。
a1：0.2ml0.5mmol/l邻二氮菲+0.2ml0.75mmol/l硫酸高铁铵+1mlph7.450mmol/ltris-hcl；
a2：0.2ml0.5mmol/l邻二氮菲+0.2ml0.75mmol/l硫酸高铁铵+1mlph7.450mmol/ltris-hcl+7.5mmol/lh2o2；
a3：0.2ml0.5mmol/l邻二氮菲+0.2ml0.75mmol/l硫酸高铁铵+1mlph7.450mmol/ltris-hcl+7.5mmol/lh2o2+1ml样品；
将a1、a2、a3定容至10ml，37℃水浴反应1h，冷却后，在波长508nm测定吸光值。
8.超氧阴离子清除率测定：分光光度计法测定。
准确称取0.5g黄豆芽干样，加5ml70％甲醇，25℃下260rpm提取3h，6000g离心30min，取上清。
a1：4.5mltris(ph8.2，50mm)25℃水浴20min，加1ml样品，0.5ml邻苯三酚(0.2mm)，混匀后25℃水浴5min，加1ml8mhcl终止反应，在320nm下测吸光度。
a2：4.5mltris(ph8.2，50mm)25℃水浴20min，加1ml去离子水，0.5ml邻苯三酚(0.2mm)，混匀后25℃水浴5min，加1ml8mhcl终止反应，在320nm下测吸光度。
a3：4.5mltris(ph8.2，50mm)25℃水浴20min，加1ml样品，0.5ml去离子水，混匀后25℃水浴5min，加1ml8mhcl终止反应，在320nm下测吸光度。
实施例1
黄豆浸泡：秤取1千克黄豆，将黄豆浸入2.5升水中，浸泡3小时，然后用自来水冲洗3遍。在黄豆浸泡水中添加1毫克壳寡糖，壳寡糖的分子量为1000da。
发芽：浸泡后的黄豆置于豆芽机中，温度保持在25℃，每隔12h淋水一次，暗培养3天。
由表1可知，此方法制备的黄豆芽，维生素c、总多酚，以及包含没食子酸、原儿茶酸、丁香酸、香草酸、鞣花酸、对香豆酸、阿魏酸、对羟基苯甲酸、肉桂酸在内的九种酚类物质；总黄酮，以及包含大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、染料木素、大豆苷元、黄豆黄素在内的六种黄酮类物质的含量明显增加；同时dpph清除率、羟自由基清除率、超氧阴离子清除率显著增加，黄豆芽的抗氧化品质显著提高。
实施例2
黄豆浸泡：秤取1千克黄豆，将黄豆浸入2.5升水中，浸泡3小时，然后用自来水冲洗3遍。在黄豆浸泡水中添加10毫克壳寡糖，壳寡糖的分子量为3000da。
发芽：浸泡后的黄豆置于豆芽机中，温度保持在25℃，每隔12h淋水一次，暗培养3天。
由表1可知，此方法制备的黄豆芽，维生素c、总多酚，以及包含没食子酸、原儿茶酸、丁香酸、香草酸、鞣花酸、对香豆酸、阿魏酸、对羟基苯甲酸、肉桂酸在内的九种酚类物质；总黄酮，以及包含大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、染料木素、大豆苷元、黄豆黄素在内的六种黄酮类物质的含量明显增加；同时dpph清除率、羟自由基清除率、超氧阴离子清除率显著增加，黄豆芽的抗氧化品质显著提高。
实施例3(空白样)
黄豆浸泡：秤取1千克黄豆，将黄豆浸入2.5升水中，浸泡3小时，然后用自来水冲洗3遍。
发芽：浸泡后的黄豆置于豆芽机中，温度保持在25℃，每隔12h淋水一次，暗培养3天。
表1壳寡糖对黄豆芽抗氧化品质参数的影响
对于任何熟悉本领域的技术人员而言，在不脱离本发明技术方案范围情况下，都可利用上述揭示的技术内容对本发明技术方案作出许多可能的变动和修饰，或修改为等同变化的等效实施例。因此，凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同变化及修饰，均应仍属于本发明技术方案保护的范围内。