本发明涉及微生物菌剂应用技术领域，特别是涉及木霉ltr-2的应用及其菌剂和制备方法。
背景技术：
小麦是一种世界各地广泛种植的禾本科植物，小麦的颖果是人类的主食，但是叶部病害和根部病害严重威胁了小麦高产和小麦品质。通常人们以化学防治和使用抗性品种为主，辅以栽培管理的方式进行治理。化学药剂效果虽立竿见影，但易产生抗药性菌株，并且长期大量使用这些化学农药容易造成环境污染，对非靶标作物不安全。选育和使用抗病品种是一种经济有效的措施，但是生产上大面积推广具有单一抗性的品种，使得品种抗性在较短的时间内丧失，从而为抗病育种工作增加了难度。
随着生态环保意识的提高，农业可持续发展要求采取新的病害防治策略，这就要求我们寻求一种经济环保的方式进行防治。其中，生物防治作为一个新的研究领域已成为控制作物病害的重要手段之一，由于生防菌具有对环境无污染，残留量低，病菌不易产生抗药性和对非靶标植物较安全等特点，被认为一项对环境友好的绿色防控技术。而在目前已经发现的拮抗微生物中，木霉属菌已经成为一种重要的植物病害生物防治菌剂。多种菌剂的商业化势必让科研院所和企业对木霉属性进行更为深刻全面的了解。
本发明所涉及的生防木霉菌为绿色木霉trichodermavirideltr-2，保藏号为cgmccno.1498，该菌株及其在植病生防中的应用已经在授权公告号为cn100340655c的专利中公开，该菌株对麦根腐镰刀菌、麦长蠕宝孢菌等多种植物病原菌有明显的抑制作用；另外该木霉菌株对黄瓜具有促生作用，用该菌剂悬浮液浸泡黄瓜种子，整株干重比对照增加了61.5％。目前从分子生物学角度对该菌株进一步鉴定，本发明将改菌株重新定义为哈茨木霉ltr-2，以下简称木霉ltr-2。
目前现有技术中对木霉ltr-2的研究主要集中在防病及促生功能上，并未涉及对营养品质的关注。如何利用木霉ltr-2制备菌剂，在防病促生功能之外，进一步开发该菌株特性，是本发明要解决的技术问题。
技术实现要素：
本发明提供木霉ltr-2的应用及其菌剂和制备方法。本发明的菌剂可以防治小麦部分病害，减少化肥农药的使用量，保护环境，提高小麦亩产量，还能促使颖果氨基酸含量增加，提高作物营养品质。
本发明的木霉ltr-2的应用及其菌剂和制备方法技术方案为，木霉ltr-2在提高小麦蛋白质和氨基酸含量方面的应用。
将木霉ltr-2孢子粉和小麦种子进行拌种，然后进行种植。
一种提高小麦蛋白质和氨基酸含量的菌剂，所述菌剂中含有木霉ltr-2孢子粉。
该菌剂的有效浓度为，每粒小麦种子附着木霉ltr-2孢子孢子数为104-107cfu。
一种提高小麦蛋白质和氨基酸含量的菌剂，包括以下成分：木霉ltr-2孢子粉、羧甲基纤维素钠、海藻酸钠、氯化钙、麦饭石。
所述的一种提高小麦蛋白质和氨基酸含量的菌剂，由按重量份的以下成分组成：木霉ltr-2孢子粉5-10份、羧甲基纤维素钠2-5份、海藻酸钠1-4份、氯化钙1-3份、麦饭石78-91份。
氯化钙研磨过筛80目，麦饭石60-80目。
一种提高小麦蛋白质和氨基酸含量的方法，使用所述的菌剂和小麦种子进行拌种，然后进行种植。
根据菌剂中含有的有效孢子数和一亩地的小麦使用量进行换算，使每粒小麦种子的木霉ltr-2孢子数目达到104-107cfu/每粒。
优选的，本发明中，使每粒小麦种子的木霉ltr-2孢子数目达到105-106cfu/每粒。
木霉菌剂的使用并不是浓度越大越好，并且不同作物，木霉菌用量也不尽相同。室内实验中，将小麦籽粒浸种木霉菌孢子液，使之每粒粘附104-108木霉菌孢子，结果发现在10的8次方浓度下小麦萌发率反而下降，因此大田中我们一般选择104-107cfu/每粒，本发明选择105-106cfu/每粒。这个浓度范围在大田中效果是最为理想的。
本发明的有益效果为：
1.可以防治小麦部分病害，减少化肥农药的使用量，保护环境；
2.提高小麦亩产量，增加小麦产出比；
3.提高小麦颖果蛋白质和氨基酸含量，提升小麦品质。
具体实施方式：
为了更好地理解本发明，下面用具体实例来详细说明本发明的技术方案，但是本发明并不局限于此。
本发明所涉及的绿色木霉trichodermavirideltr-2，保藏号为cgmccno.1498,该菌株及其孢子粉的制备方法已经在授权公告号为cn100340655c的专利中公开。目前从分子生物学角度对该菌株的进一步鉴定，本发明将改菌株重新定义为哈茨木霉ltr-2，以下简称木霉ltr-2。
实施例1
一种提高小麦蛋白质和氨基酸含量的菌剂，所述菌剂中含有木霉ltr-2孢子粉。使用所述的菌剂和小麦种子进行拌种，然后进行种植。根据菌剂中含有的有效孢子数和一亩地的小麦使用量进行换算，使每粒小麦种子的木霉ltr-2孢子数目达到104-107cfu/每粒。
实施例2
一种提高小麦蛋白质和氨基酸含量的菌剂，由按重量份的以下成分组成：
木霉ltr-2孢子粉8份
羧甲基纤维素钠3份
海藻酸钠3份
氯化钙2份
麦饭石84份。
1.菌剂田间使用方法：
将实施例1-3制得的菌剂和小麦种子进行拌种，根据木霉菌剂中含有的有效孢子数和一亩地的小麦使用量进行换算，使每粒小麦种子的木霉活孢子数达到105cfu/每粒(标记为l-5的意思是小麦种子的木霉活孢子为105)，106cfu/每粒(标记为l-6的意思是小麦种子的木霉活孢子为106)。
大田试验设置3个不同处理：空白处理：未添加任何菌剂；添加本发明菌剂，设置不同浓度梯度(使每粒小麦种子分别附着105和106浓度的菌剂)。
2.水解氨基酸测定方法(17种氨基酸，加上色氨酸共18种)：
小麦十七种氨基酸是指天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸和脯氨酸；再加上色氨酸，共计测定18种水解氨基酸含量。
(1)样品预处理方法：为保证样品的均匀度和水解效果，将收获后的小麦种子进行粉粹，过80目筛子。
(2)17种氨基酸测定方法
盐酸水解法，参照gb7649-87(1987)
氨基酸分析仪：英国百康氨基酸分析仪biochrom30
(3)色氨酸测定方法
碱水解法，参照gb7650-87(1987)
色氨酸分析仪：紫外分光光度计722
3.蛋白质测定方法
样品前置处理与水解氨基酸测定一样，样品磨碎过筛，保证均匀度和测试效果。
凯式定氮法，参照gb/t5511-2008规定
仪器名称：凯氏定氮仪skd-1000。
表1是应用本发明实施例2菌剂后小麦亩产量示意表；
表2是应用本发明实施例2菌剂后小麦蛋白质含量示意表；
表3是应用本发明实施例2菌剂后小麦氨基酸含量示意表。
表1应用菌剂处理后，收获后小麦亩产量
表2小麦蛋白质含量测定
表3小麦18种水解氨基酸测定结果
实施例3
一种提高小麦蛋白质和氨基酸含量的菌剂，由按重量份的以下成分组成：
木霉ltr-2孢子粉5份
羧甲基纤维素钠2份
海藻酸钠1份
氯化钙1份
麦饭石91份。
菌剂田间使用方法和水解氨基酸、蛋白质测定方法同实施例1，
表4是应用本发明实施例3菌剂后小麦亩产量示意表；
表5是应用本发明实施例3菌剂后小麦蛋白质含量示意表；
表6是应用本发明实施例3菌剂后小麦氨基酸含量示意表。
表4应用菌剂处理后，收获后小麦亩产量
表5小麦蛋白质含量测定
表6小麦18种水解氨基酸测定结果
实施例4
一种提高小麦蛋白质和氨基酸含量的菌剂，由按重量份的以下成分组成：
木霉ltr-2孢子粉10份
羧甲基纤维素钠5份
海藻酸钠4份
氯化钙3份
麦饭石78份。
菌剂田间使用方法和水解氨基酸测定方法同实施例1，
表7是应用本发明实施例4菌剂后小麦亩产量示意表；
表8是应用本发明实施例4菌剂后小麦蛋白质含量示意表；
表9是应用本发明实施例4菌剂后小麦氨基酸含量示意表。
表7应用菌剂处理后，收获后小麦亩产量
表8小麦蛋白质含量测定
表9小麦18种水解氨基酸测定结果