本发明涉及昆虫标本制作方法，具体涉及一种蓟马类昆虫永久玻片标本制作方法。
背景技术：
蓟马是是一个与人类关系密切的昆虫类群，其种类繁多，数量丰富。蓟马的一些种类喜在花间栖息，具备较强的传粉能力；很多植食性种类是重要的作物害虫，少量捕食性和菌食性种类可作为天敌资源。
蓟马个体较小，大部分种类体长0.5-5mm，因此清晰透明的玻片标本是蓟马种类准确鉴定的前提条件。蓟马永久玻片标本制作一般需要经过脱色、脱水、透明、封片等步骤，各个步骤所需试剂和时间的控制是影响标本优劣的重要因素。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种蓟马类昆虫永久玻片标本制作方法，该方法能够解决现有永久玻片标本制作低浓度碱液脱色不彻底和酒精脱水步骤繁琐、耗时长的问题，所做标本透明度高，存放时间久，制作标本所需时间短的效果。
为了达到上述目的，本发明提供了一种蓟马类昆虫永久玻片标本制作方法，该方法包含：
(1)脱色：将蓟马类昆虫从酒精溶液中取出，放入碱液中，室温浸泡脱色；
(2)脱水：将蓟马类昆虫从所述碱液中取出，置于蒸馏水中让昆虫体内的内容物排出，用浓度递增的酒精溶液逐级浸泡以脱水；
(3)透明：将蓟马类昆虫吸出放置于滤纸上，让昆虫表面的酒精自然风干至滤纸上没有溶剂，将昆虫在二甲苯中浸泡；
(4)封片：在载玻片上滴中性树胶或加拿大树胶，将昆虫置于所述中性树胶或加拿大树胶上，摆好昆虫身体各部位，盖上盖玻片，晾干，获得永久玻片标本。
优选地，在步骤(1)中，所述碱液包含：naoh溶液。
优选地，所述碱液为6％naoh溶液。
优选地，在步骤(1)中，室温浸泡脱色时间为：8～24h或4～6h，该时间根据昆虫的颜色深浅确定。
优选地，在步骤(2)中，所述蓟马类昆虫置于蒸馏水中2h。
优选地，在步骤(2)中，所述酒精溶液浓度在30％～100％逐渐递增。
优选地，所述酒精溶液浓度为30％、60％、85％、95％、100％。
优选地，在所述酒精溶液30％、60％、85％、95％浓度下分别浸泡5～10min，在100％浓度下浸泡30min。
优选地，在步骤(3)中，在所述二甲苯中浸泡30min。
优选地，在步骤(3)中，在解剖镜下，用昆虫针挑拨昆虫身体各部位，盖上盖玻片，自然晾干，获得永久玻片标本。
本发明的蓟马类昆虫永久玻片标本制作方法，解决了现有永久玻片标本制作低浓度碱液脱色不彻底和酒精脱水步骤繁琐、耗时长问题，具有以下优点：
本发明的方法所做标本透明度高，存放时间久，脱水仅设置了5个酒精梯度，节约了时间。而且，以往的方法中，在进行酒精自然风干时，在滤纸上的时间不容易把握，时间长造成虫体内部有气泡，时间短则虫体表面有酒精而标本浑浊，而本发明的方法明确了在滤纸上的时间，以没有“明水”为准。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明的技术方案做进一步的说明。
一种蓟马类昆虫永久玻片标本制作方法，该方法包含：
(1)脱色：将蓟马类昆虫从酒精溶液中取出，放入碱液中，室温浸泡脱色；
(2)脱水：将蓟马类昆虫从碱液中取出，置于蒸馏水中让昆虫体内的内容物排出，用浓度递增的酒精溶液逐级浸泡以脱水；
(3)透明：将蓟马类昆虫吸出放置于滤纸上，让昆虫表面的酒精自然风干至滤纸上没有溶剂，即没有“明水”，将昆虫在二甲苯中浸泡；
(4)封片：在载玻片上滴中性树胶或加拿大树胶，将昆虫置于中性树胶或加拿大树胶上，摆好昆虫身体各部位，盖上盖玻片，晾干，获得永久玻片标本。
中性树胶或加拿大树胶的作用是将载玻片和盖玻片粘合在一起，用于长久保留生物组织切片封存。
进一步地，在步骤(1)中，碱液包含：naoh溶液。更进一步地，碱液为6％naoh溶液，该浓度最为适宜，浓度过低时脱色不彻底，浓度过高时会造成虫体变形。
进一步地，在步骤(1)中，室温浸泡脱色时间为8～24h或4～6h，如果脱色时间太短会造成脱色不彻底，脱色时间长也会造成虫体变形。昆虫颜色深脱色时间长，为8～24h；昆虫颜色浅脱色时间短，为4～6h。
进一步地，在步骤(2)中，蓟马类昆虫置于蒸馏水中2h，以便昆虫内容物充分排出，否则会影响玻片观察的清晰度。
进一步地，在步骤(2)中，酒精溶液浓度在30％～100％逐渐递增。具体地，酒精溶液浓度为30％、60％、85％、95％、100％。更加具体地，在酒精溶液30％、60％、85％、95％浓度下分别浸泡5～10min，虫体较大者浸泡时间稍长，在100％浓度下浸泡30min。酒精浓度的选择是经过大量实践最后确定的，梯度太多会浪费时间，太少会引起虫体扭曲变形，而且对于容易酥脆的组织要从低浓度的酒精开始脱水，否则组织容易变脆变硬。
进一步地，在步骤(3)中，在二甲苯中浸泡30min，二甲苯作为透明剂。
进一步地，在步骤(3)中，在解剖镜下，用昆虫针挑拨昆虫身体各部位，盖上盖玻片，自然晾干，获得永久玻片标本。
实施例1
(1)脱色：将20头左右的蓟马类昆虫从酒精溶液中挑出直接放入6％naoh溶液中，室温放置8～24小时；浸泡时间根据虫体大小和体色而定，个体大、色深的浸泡时间要长；少数颜色很浅的标本可以不经过脱色直接脱水；
(2)脱水：将蓟马类昆虫从碱液中取出，置于蒸馏水中2个小时，让身体内容物自然排出，接着用不同浓度的酒精溶液逐级脱水，即用30％、60％、85％、95％酒精溶液分别浸泡5～10分钟，然后将标本转移至100％酒精中，放置30分钟；
(3)透明：用吸管将蓟马类昆虫吸出吐在普通滤纸上，让虫体表面的酒精自然风干，时间不要太久，以滤纸上没有“明水”为准，否则制成的玻片虫体内会有气泡，然后用昆虫针将虫轻轻挑拨入二甲苯中，浸泡30分钟；
(4)封片：在载玻片中央滴一滴加拿大胶，将蓟马一头放在胶液上，在解剖镜下，用昆虫针小心挑拨虫体的各个部位，轻轻盖上盖玻片，玻片制好后，置于平板上，自然晾干，在玻片上注明采集时间、采集地点、采集人等信息，获得永久玻片标本。
综上所述，本发明的蓟马类昆虫永久玻片标本制作方法所做标本透明度高，存放时间久，制作标本所需时间短的效果。
尽管本发明的内容已经通过上述优选实施例作了详细介绍，但应当认识到上述的描述不应被认为是对本发明的限制。在本领域技术人员阅读了上述内容后，对于本发明的多种修改和替代都将是显而易见的。因此，本发明的保护范围应由所附的权利要求来限定。