复配抑菌剂及其评价方法和应用与流程

文档序号:17243413发布日期:2019-03-30 08:41阅读:765来源:国知局

本发明涉及农药领域,具体而言,涉及一种复配抑菌剂及其评价方法和应用。



背景技术:

农药残留在农业生产中施用农药后一部分农药直接或间接残存于谷物、蔬菜、果品、畜产品、水产品中以及土壤和水体中的现象。农药进入粮食、蔬菜、水果、鱼、虾、肉、蛋、奶中,造成食物污染,危害人的健康。随着人们生活水平的提高,人们越来越关注食品安全,农药残留成为消费者尤为关注的问题之一。

目前,解决农药残留问题主要有几种方法。

第一种是采用合理的栽培措施,例如选用抗病虫品种、合理轮作,减少土壤病虫积累;培育壮苗,合理密植,清洁田园,合理灌溉施肥;采用种子消毒和土壤消毒,杀灭病菌;采用灯诱、味诱等物理方法,诱杀害虫。

第二种是生物防治,选用适合天地生存和繁殖的栽培方式,保持天敌生存的环境。

第三种是慎选农药;尽量避免使用对天敌杀伤力大的化学农药,优选用生物农药,选对口农药、适时使用农药。

这三种方法对技术要求比较高,要求使用者对农药、作物及病害虫比较了解,对广大农户不适用。

靓果安是依据中医中药杀菌理论,结合病原菌的结构、生活史及致病机理,利用先进的超临界萃取技术,从十余味中草药中提取的生物碱、栀子甙等多种生物活性成分,复配而成一种高效生物杀菌剂,具有较强的触杀、渗透作用。可通过干扰病原菌细胞壁的生物合成,抑制孢子的萌发、菌丝的发育,达到杀菌的目的,同时该产品具有保花、保果的作用。属于常用的生物农药之一。

大蒜素油为淡黄色液体,具有浓烈的大蒜气味,不溶于水,部分溶于乙醇,虽然大蒜油中的主要成分属硫醚类化合物,但化学性质比较稳定,在非强酸环境中可耐120℃以上高温而不易分解,但若长期暴露于紫外线下,可诱发分解。由百合科植物大蒜的鳞茎经水蒸气蒸馏得到。为澄清苍黄色至橘红色液体,且强烈刺激气味,似硫醇。主成分为烯丙基丙基二硫化物、二烯丙基二硫化物、二烯丙基三硫化物、大蒜素等。主产于埃及、中国等。主要用于制备辛香调味料,也用于消毒剂等药品。大蒜鳞茎经有机溶剂可提取大蒜油树脂,用于食品工业。大蒜油也可化工合成(主要成分为:二烯丙基二硫醚、二烯丙基三硫醚),主要原料为氯丙烯、硫化碱等。

弄清靓果安与大蒜油结合使用是否会有协同作用,能否提高抑菌效果,确定复配之后最低完全抑菌浓度,对于深度开发靓果安和大蒜油有着积极的作用。

有鉴于此,特提出本发明。



技术实现要素:

本发明的第一目的在于提供一种复配抑菌剂,利用靓果安浓缩物和大蒜油进行复配,协同作用,提高抑菌效果,减少农药施用量,达到减少农药残留的目的。

本发明的第二目的在于提供一种所述复配抑菌剂的评价方法,操作简单、评价合理,可以获得最佳的复配配方浓度。

本发明的第三目的在于提供一种所述复配抑菌剂的应用,应用效果好,能够完全抑菌。

为了实现本发明的上述目的,特采用以下技术方案:

一种复配抑菌剂,所述复配抑菌剂包括靓果安和大蒜油,所述靓果安为浓缩7.8倍的靓果安浓缩物。

优选地靓果安浓缩物与大蒜油复配,可以提高抑菌效果,达到完全抑菌,减少农药的施用量,降低农药残留。

一种所述的复配抑菌剂的评价方法,所述评价方法包括以下步骤:

用二倍稀释法测定所述浓缩7.8倍的靓果安浓缩物、所述大蒜油的体外抗菌活性,获得所述浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的最小抑菌浓度mica组单用、所述大蒜油的最小抑菌浓度micb组单用;用棋盘法测定所述复配抑菌剂的体外抗菌活性,获得所述浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的联合最小抑菌浓度mica组联合、所述大蒜油的联合最小抑菌浓度micb组联合;

然后计算fic指数,按照判断标准评价。

优选地,所述计算fic指数的公式为:

fic指数=mica组联合/mica组单用+micb组联合/micb组单用。

更加优选地,所述判断标准为:fic指数≦0.5为协同作用,0.5<fic指数≦1为相加作用,1<fic指数≦2为无关作用,fic指数>2为拮抗作用。

经过试验获得相应参数,采用fic指数,可以正确的评价两种组分之间的相互作用,为选择最佳的配比提供理论依据。

可选地,还包括复配抑菌实验,评价其是否能够达到完全抑菌。

通过复配抑菌试验,可以验证抑菌效果。

优选地,所述复配抑菌实验中:

对于金黄色葡萄球菌,所述复配抑菌剂中,所述浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的浓度为0.3125mg/ml,所述大蒜油的浓度为0.00625mg/ml;

对于大肠杆菌,所述复配抑菌剂中,所述浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的浓度为10mg/ml,所述大蒜油的浓度为3.2mg/ml。

通过复配抑菌试验,获得最佳的、针对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的使用浓度,最大程度的减少农药的施用量,减少农药残留,保障食品安全,减少环境污染。

一种所述的复配抑菌剂的应用,应用于抑制革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

该复配抑菌剂对于革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抑制作用。常见的革兰氏阳性菌有:葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等;常见的革兰氏阴性菌有痢疾杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌及霍乱弧菌等。

优选地,所述革兰氏阳性菌为金黄色葡萄球菌,所述革兰氏阴性菌为大肠杆菌。

比较有代表性的是金黄色葡萄球菌和大肠杆菌。

更加优选地,用于抑制所述金黄色葡萄球菌时,所述复配抑菌剂中,所述浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的浓度为0.3125mg/ml,所述大蒜油的浓度为0.00625mg/ml。

进一步优选地,用于抑制所述大肠杆菌时,所述复配抑菌剂中,所述浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的浓度为10mg/ml,所述大蒜油的浓度为3.2mg/ml。

应用于金黄色葡萄球菌和大肠杆菌时,优选地复配浓度,可以获得最佳的使用配比。

与现有技术相比,本发明的有益效果为:

(1)配方简单,抑菌效果好;

(2)评价方法简单有效,评价结果准确;

(3)应用范围广,普适性强;

(4)可以有效减少农药施用量,进而减少农药残留,绿色环保。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述,但是本领域技术人员将会理解,下列实施例仅用于说明本发明,而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。

其中,靓果安购自潍坊奥丰作物病害防治有限公司,剂型为水剂,包装规格为500ml。大蒜油也购自潍坊奥丰作物病害防治有限公司,剂型为乳油,包装规格为瓶装100ml。

实施例1

将市售农药靓果安取适量,真空干燥浓缩,得到浓缩7.8倍的靓果安浓缩物。

按照抑菌对象的不同,将该浓缩7.8倍的靓果安浓缩物与大蒜油按一定比例混合,得到复配抑菌剂。

实施例2

用二倍稀释法测定所述浓缩7.8倍的靓果安浓缩物、所述大蒜油的体外抗菌活性,获得所述浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的最小抑菌浓度mica组单用、所述大蒜油的最小抑菌浓度micb组单用;用棋盘法测定所述复配抑菌剂的体外抗菌活性,获得所述浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的联合最小抑菌浓度mica组联合、所述大蒜油的联合最小抑菌浓度micb组联合。

对于金黄色葡萄球菌而言:

浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的最小抑菌浓度mica组单用为20mg/ml,大蒜油的最小抑菌浓度micb组单用为0.4mg/ml,浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的联合最小抑菌浓度mica组联合为0.3125mg/ml、大蒜油的联合最小抑菌浓度micb组联合为0.00625mg/ml。

按照fic指数=mica组联合/mica组单用+micb组联合/micb组单用计算fic指数为0.03125,依据判断标准:fic指数≦0.5为协同作用,0.5<fic指数≦1为相加作用,1<fic指数≦2为无关作用,fic指数>2为拮抗作用,评价得到浓缩7.8倍的靓果安浓缩物与大蒜油复配,对金黄色葡萄球菌的抑菌表现出协同作用。

按照浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的浓度为0.3125mg/ml、大蒜油的浓度为0.00625mg/ml配制复配抑菌剂,进行金黄色葡萄球菌抑菌实验,结果为完全抑菌。

实施例3

用二倍稀释法测定所述浓缩7.8倍的靓果安浓缩物、所述大蒜油的体外抗菌活性,获得所述浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的最小抑菌浓度mica组单用、所述大蒜油的最小抑菌浓度micb组单用;用棋盘法测定所述复配抑菌剂的体外抗菌活性,获得所述浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的联合最小抑菌浓度mica组联合、所述大蒜油的联合最小抑菌浓度micb组联合。

对于大肠杆菌而言:

浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的最小抑菌浓度mica组单用为40mg/ml,大蒜油的最小抑菌浓度micb组单用为51.2mg/ml,浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的联合最小抑菌浓度mica组联合为10mg/ml、大蒜油的联合最小抑菌浓度micb组联合为3.2mg/ml。

按照fic指数=mica组联合/mica组单用+micb组联合/micb组单用计算fic指数为0.3125,依据判断标准:fic指数≦0.5为协同作用,0.5<fic指数≦1为相加作用,1<fic指数≦2为无关作用,fic指数>2为拮抗作用,评价得到浓缩7.8倍的靓果安浓缩物与大蒜油复配,对大肠杆菌的抑菌表现出协同作用。

按照浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的浓度为10mg/ml、大蒜油的浓度为3.2mg/ml进行复配抑菌剂的配制,然后进行大肠杆菌抑菌实验,结果为完全抑菌。

比较例1

按照浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的浓度为0.3mg/ml、大蒜油的浓度为0.00625mg/ml配制复配抑菌剂,进行金黄色葡萄球菌抑菌实验,结果为部分抑菌,肉眼可见有菌落。

比较例2

按照浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的浓度为9mg/ml、大蒜油的浓度为3.2mg/ml进行复配抑菌剂的配制,然后进行大肠杆菌抑菌实验,结果为部分抑菌,肉眼可见有菌落。

比较例3

按照浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的浓度为0.3125mg/ml、大蒜油的浓度为0.006mg/ml配制复配抑菌剂,进行金黄色葡萄球菌抑菌实验,结果为部分抑菌,肉眼可见有菌落。

比较例4

按照浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的浓度为10mg/ml、大蒜油的浓度为3mg/ml进行复配抑菌剂的配制,然后进行大肠杆菌抑菌实验,结果为部分抑菌,肉眼可见有菌落。

比较例5

按照浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的浓度为0.31mg/ml、大蒜油的浓度为0.0061mg/ml配制复配抑菌剂,进行金黄色葡萄球菌抑菌实验,结果为部分抑菌,肉眼可见有菌落。

比较例6

按照浓缩7.8倍的靓果安浓缩物的浓度为9.5mg/ml、大蒜油的浓度为3.1mg/ml进行复配抑菌剂的配制,然后进行大肠杆菌抑菌实验,结果为部分抑菌,肉眼可见有菌落。

本申请提供的复配抑菌剂对除了金黄色葡萄球菌之外的其他革兰氏阳性菌也有较好的抑菌效果,如链球菌、破伤风杆菌等;对除了大肠杆菌之外的其他革兰氏阴性菌也有较好的抑菌效果,如痢疾杆菌、伤寒杆菌、霍乱弧菌等。

本申请提供的复配抑菌剂及其评价方法和应用,能够简单、准确获得配比恰当的复配抑菌剂,减少农药施用量,进而可以减少农药残留,保障食品安全,绿色环保。

尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明,然而应意识到,在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此,这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。

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