本发明属于微生物防治蚊媒害虫领域，具体涉及一种多菌复合增效液体灭蚊菌剂及其制备方法与应用。
背景技术：
以蚊子为媒介传播给人的疾病多达80余种，而且其中大都是致死致残率很高的烈性疾病，如疟疾、霍乱、登革热，丝虫病、黄热病、黑斑纹病、乙型脑炎等等。千百年来人类与蚊子的战斗不仅没有获得决定性的胜利，反而愈演愈烈。时至今日全世界还有约一半的人口，面临由蚊子作为媒介传播的烈性疾病的威胁，每年被蚊子夺走的生命高达83万人之多。2019年世卫组织公布，仅由蚊媒传染的疟疾每年新发病例就超过2亿人，平均每一到两分钟就有一名儿童死于疟疾。全球有32亿人面临罹患虐疾的风险。蚊媒如此肆虐，是对当代科技和人类文明进步的严重挑战。用什么办法既能大面积大规模彻底灭杀蚊媒，消除这些重大疾病的传染源，又不对生态环境造成破坏，不影响人类的生存与健康，这是摆在人们面前迫切需要解决的重大课题。
由于蚊媒对化学杀虫剂抗性的增加，化学杀虫剂在制造和使用过程中对生态环境的污染和破坏，以及化学杀虫剂对非标把生物的危害，使化学杀虫剂大规模灭蚊受到了极大限制。
蚊香和驱蚊剂含有拟除虫菊脂类毒素，可导致人吸入性危害，伤及人的健康，不便于对蚊虫的持久性大量灭杀。
灭蚊灯中的长波紫外线，可穿透人皮肤的真皮层，长时间使用会加速皮肤的老化，还会引起人的眼部损伤；经灭蚊灯电击或风干的蚊虫碎片以及病菌扩散到空气中，对人体不利。
当前的微生物液体灭蚊制剂中，单一菌制剂寄主有限，浸染灭杀蚊媒的种类不全；多菌混合的制剂多菌混合而发生菌菌拮抗，有效期短，效果不佳；个别经过基因改造或嫁接的菌种，其变异的菌种对人类健康及生态环境的影响在加以科学验证前也难以大面积推广。而且以上这些液体制剂都存在因好氧菌互相争夺氧气养分，互相拮抗，饱和态畸形增长而出现的有效期短，性能不稳定，效果不佳的共性问题。
常规的微生物好氧菌（包括细菌、真菌、放线菌）剂在液态条件下，菌株数分钟至数小时就繁殖一世代，由于不断繁殖形成饱和性增长，菌株在争夺养分氧气的竞争过程中发生拮抗，很快就会畸形死亡，菌剂就会变黑发臭，这种菌剂在稀释后，多数菌群已经变得畸形乏力，无法发挥其有效功能，在常温条件下有效期很短，一般细菌只有数月，真菌只有数天。若采用好氧菌多菌株混配，在氧气、养分的争夺消耗过程中，多种好氧菌相互拮抗更加激烈，菌剂腐败衰亡地更快。
技术实现要素：
针对现有技术中的不足之处，本发明的目的是提供一种多菌复合增效液体灭蚊菌剂及其制备方法与应用。该发明选用灭蚊各有专长的五种好氧菌组合，目的是解决菌种单一效果不佳的问题；该发明还选用可抑制好氧菌畸形增长的四种厌氧菌，与五种好氧菌复合，目的是解决液体菌剂中好氧菌互相拮抗有效期短容易腐败失效的问题；该发明还设计与多种诱蚊剂结合使用及单独应用的方法，目的是为蚊媒的多渠道大规模灭杀提供了实际应用的可能。
为了达到上述目的，本发明技术方案如下：
一种多菌复合增效液体灭蚊菌剂，包括杀灭蚊子的五种好氧菌组成的a菌液和抑制拮抗的四种厌氧菌组成的b菌液；
a菌液由以下五种好氧菌组成：
苏云金芽孢杆菌以色列亚种，
灭蚊链霉菌，
球孢白僵菌，
金龟子绿僵菌，
玫烟色棒束孢；
b菌液由以下四种厌氧菌组成：
保加利亚乳杆菌，
嗜酸乳杆菌，
植物乳杆菌，
德氏乳杆菌。
上述五种好氧菌菌种的安全级别均为四级，对人畜禽和生态环境安全无伤害，对蚊媒及幼虫各菌有不同的侵染杀灭作用：
1.菌种名称：苏云金芽孢杆菌以色列亚种，拉丁学名：bacillusthuringiensisisraelensis，bti，细菌，好氧菌；菌种保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，编号：cgmcc1.1754，功能：对38种蚊子及库蚊幼虫有很强的毒杀作用；
2.菌种名称：灭蚊链霉菌，拉丁学名：streptomycesculiciclicus，细菌，放线菌，好氧菌；菌种保藏于中国农业微生物菌保中心，编号：accc41132，功能：对按蚊、库蚊、阿蚊幼虫有显著毒杀效果；
3.菌种名称：球孢白僵菌，拉丁学名：beauveriabassiana，真菌，好氧菌；菌种保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，编号：accc30110，功能：对库蚊、伊蚊及幼虫具有良好的杀灭作用；
4.菌种名称：金龟子绿僵菌，拉丁学名：metarhiziumanisopliae，真菌，好氧菌；菌种保藏于中国农业微生物菌种保藏中心，编号：accc30798，功能：对伊蚊及幼虫具有良好的灭杀作用；
5.菌种名称：玫烟色棒束孢，拉丁学名：fumosoroseawize，真菌，好氧菌；菌种保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，编号：accc37775，功能：可侵染蚊子等同翅目昆虫。
上述四种厌氧菌菌种的安全级别均为四级，对人畜禽和生态环境安全无伤害，可抑制好氧菌饱和性增长；
1.菌种名称：保加利亚乳杆菌，拉丁学名：lactobacillusbulgaricus，细菌，厌氧菌；菌种保藏于中国农业微生物菌种保藏中心，编号：accc19940；
2.菌种名称：嗜酸乳杆菌，拉丁学名：lactobacillusacidophilus，细菌，厌氧菌；菌种保藏与中国普通微生物菌种保藏中心，编号：atcc4357；
3.菌种名称：植物乳杆菌，拉丁学名：lactobacillusplantarum，细菌，厌氧菌；菌种保藏与中国农业微生物菌种保藏中心，编号：accc1101；
4.菌种名称：德氏乳杆菌，拉丁学名：lactobacillusdelbrueckiisubsp，细菌，厌氧菌；菌种保藏与中国普通微生物菌种保藏中心，编号：accc05468。
一种多菌复合增效液体灭蚊菌剂的制备方法，包括以下步骤：
第一步：将a菌液中的五种好氧菌，分别发酵培养成五种液体好氧菌液，
（1）分别配制苏云金芽孢杆菌、灭蚊链霉菌、球孢白僵菌、金龟子绿僵菌、玫烟色棒束孢五种液体培养基，向五种培养基中接种各自对应的菌种；然后在25-37℃、120-140r/min、好氧发酵的条件下进行菌种的一级扩大培养，得到五种一级扩大培养的好氧菌液；
（2）再分别取五种一级发酵的好氧菌液，向五种所述液体好氧菌培养基中接种各自对应的菌液，在同上的条件下，进行菌剂的二级扩大培养，得到五种二级扩大好氧发酵的菌液，其中每种一级菌液的接种量为其培养基质量的2-10%；
（3）再分别取五种二级发酵的好氧菌液，向五种所述液体好氧菌培养基中接种各自对应的菌液，在同上的条件下，进行菌剂的三级扩大培养，得到五种三级扩大好氧发酵的菌液，其中每一种二级菌液的接种量为其培养基质量的2-10%；
（4）五种经三级培养的菌液，按各10-30%的比例混合并静置均质24小时后，即做为a菌液，五种灭蚊好氧菌液所占的实际比例，可在具体实施中依据蚊子的种类和灭蚊菌的专长适当调整；
第二步：将b菌液中的四种厌氧菌剂，发酵培养成四种液体混合的厌氧菌液，
（1）分别配制保加利亚乳杆菌，嗜酸乳杆菌，植物乳杆菌以及德氏乳杆菌的液体厌氧菌培养基，再分别向四种液体厌氧菌培养基中接种各自对应的菌种，在25-37℃条件下静置密闭发酵10-30天，进行菌种的一级扩大培养，得到四种一级厌氧菌液；
（2）把四种一级培养的厌氧菌液按各25%的比例混合在一起，密闭、静置24小时，即为一级发酵的厌氧混合菌液；
（3）配制混合发酵的液体厌氧菌培养基，将经一级发酵的厌氧混合菌液，接种到混合发酵的液体厌氧菌培养基中，接种量为培养基质量的5-10%，在30-37℃条件下静置密闭厌氧发酵10-30天，进行菌种的二级扩大培养，得到混合发酵的二级厌氧菌液；
（4）重复步骤（3），得到混合发酵的三级厌氧菌液，测定ph值小于等于5后，得到混合b菌液；
第三步：配比：按a菌液50-70%、b菌液50-30%的配比，把五种a菌液缓慢注入到混合b菌液中，搅拌均匀，静置24小时均质稳定后，得到多菌复合增效液体灭蚊菌剂。
上述技术方案中，组成a菌液的五个菌液的发酵培养基配方如下：
（a1）苏云金芽孢杆菌培养基配方：
蔗糖20g，蛋白胨5g，酵母膏5g，磷酸氢二钾0.3g，磷酸氢二钠1g，硫酸镁1g，硫酸亚铁0.02g，氯化钙0.02g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值7.2，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧震荡发酵60-80小时；
（a2）灭蚊链霉菌培养基配方：
可溶性淀粉20g，硝酸钾1g，磷酸氢二钾0.5g，硫酸镁0.5g，氯化钠0.5g，硫酸亚铁0.01g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值7.0，遮光，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧震荡发酵72-96小时；
（a3）球孢白僵菌培养基配方：
蔗糖50g，磷酸氢二钾1g，1%玉米浸提液补足1l；培养条件：初始ph值7.0，遮光，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧震荡发酵72-96小时；
（a4）金龟子绿僵菌培养基配方：
蔗糖50g，磷酸氢二钾1g，1%玉米浸提液补足1l；培养条件：初始ph值7.0，遮光，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧震荡发酵72-96小时；
（a5）玫烟色棒束孢培养基配方：
20%马铃薯提取液1l，蔗糖20g；培养条件：初始ph值7.0，遮光，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧发酵5-7天。
进一步的，1%玉米浸提液采用鲜玉米粒10g加水1l，煮沸30分钟，滤除渣，无菌水补足1l；20%马铃薯提取液采用去皮马铃薯200g，切小块，加水1l煮沸30分钟，滤除渣，无菌水补足1l。
上述技术方案中，组成b菌液的四个菌液的发酵培养基配方如下：
（b1）保加利亚乳杆菌培养基配方：
蔗糖20g，蛋白胨35g，碳酸钙1.5g，酵母膏30g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁1.5g，碳酸钙1g，硫酸锰0.02g，磷酸氢氨1.5g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天；
（b2）嗜酸乳杆菌培养基配方：
蔗糖20g，蛋白胨20g，氯化钠1g，硫酸锰0.01g，硫酸镁0.02g，乙酸钠0.5g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天；
（b3）植物乳杆菌培养基配方：
蔗糖20g，酵母膏25g，磷酸氢二钾2g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天；
（b4）德氏乳杆菌培养基配方：
蔗糖20g，蛋白胨35g，碳酸钙1.5g，酵母膏30g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁1.5g，碳酸钙1g，硫酸锰0.02g，磷酸氢氨1.5g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天。
上述技术方案中，b菌液四个菌液混合发酵培养基配方如下：
蔗糖20g，蛋白胨35g，碳酸钙1.5g，酵母膏30g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁1.5g，碳酸钙1g，硫酸锰0.02g，磷酸氢氨1.5g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天。
本发明还提供了多菌复合增效液体灭蚊菌剂在与诱蚊剂中的应用，具体为：
（c1）与多种诱蚊剂复配，制成微生物诱杀灭蚊剂；
（c2）单独使用作灭蚊菌剂。
相应的，本发明请求保护一种包含所述的多菌复合增效液体灭蚊菌剂的微生物诱杀灭蚊剂，按重量比，红糖、白糖或蜂蜜6-12%，酵母粉3-6%，多菌复合增效液体灭蚊菌剂1-3%，余量以清水补足。
相应的，本发明请求保护一种包含所述的多菌复合增效液体灭蚊菌剂的微生物诱杀灭蚊剂，按重量比，红糖、白糖或蜂蜜6-12%，酵母粉3-6%，多菌复合增效液体灭蚊菌剂1-3%，啤酒30-50%，余量以清水补足。
相应的，本发明请求保护一种包含所述的多菌复合增效液体灭蚊菌剂的微生物诱杀灭蚊剂，按重量比，红糖、白糖或蜂蜜6-12%，酵母粉3-6%，多菌复合增效液体灭蚊菌剂1-3%，剩菜汤汁10-30%，余量以清水补足。
相应的，本发明请求保护一种包含所述的多菌复合增效液体灭蚊菌剂的微生物菌诱杀灭蚊剂，按重量比，红糖或白糖2-20%，芝麻酱10-20%，谷氨酸钠1-3%，多菌复合增效液体灭蚊菌剂1-3%，余量以清水补足。
所述多菌复合增效液体灭蚊菌剂与多种诱蚊剂复配，制成微生物诱杀灭蚊剂的应用过程，包括以下两种：
（d1）在灭蚊灯的储蚊盒中选择加入上述微生物诱杀灭蚊剂中的一种；
（d2）在盆、盘等容器中加注上述微生物诱杀灭蚊剂中的一种，浸蘸黑色棉布并平整悬挂于容器上方，棉布下边缘浸在制剂液体中，保持黑棉布的湿润，蚊子只要触碰就会感染灭蚊菌而被灭杀。
所述多菌复合增效液体灭蚊菌剂单独使用作灭蚊菌剂的应用过程，包括以下两种：
（d3）单独用本菌剂兑水稀释100至1000倍喷洒或飞机喷淋，可实施大规模灭蚊；
（d4）单独用本菌剂兑水稀释100至1000倍，泼洒至水系，可以大面积杀灭蚊子幼虫。
与现有技术相比，本发明具有以下益效果：
（1）本发明提供的菌剂采用灭蚊各有专长的五株好氧菌（a菌液）与四株产酸厌氧菌（b菌液）复配，a、b两类菌液分别发酵然后再按比例复配，复配后在弱酸性的环境下，菌群的增长条件受到了抑制，同时养分与代谢能又得到了互补，菌群间形成了依存共生、互不拮抗的优良共生环境。由此，本制剂菌群的饱和增长得到抑制，同样在液态常温的条件下，菌群生长减慢，多数菌株形成芽孢状态，菌株活力得到保持并暂时处于休眠状态。在常温条件下，本发明的多菌复合增效液体灭蚊菌剂保存有效期可以达到12个月以上，在4摄氏度保存有效期可以达到18个月以上。稀释后，菌株能很快恢复活力并发挥作用。
（2）本发明a菌液中的五种好氧菌采用分别发酵复配共生的方法，克服了单一菌种灭蚊在品种、条件和程度不同的缺陷，使多菌灭蚊专长共同发挥，功能互补，组合增效。
（3）由于化学诱蚊剂中添加的杀虫剂多是碱性，其气味对引诱蚊子不利，许多还需蚊子口器吸入才能中毒，因此往往效果不佳。本发明的制剂还组合添加了b菌剂，制剂的ph值处于4-6的弱酸范围，弱酸气味能吸引蚊子，有利于诱蚊剂作用的发挥。
（4）本发明所述多菌复合增效液体灭蚊菌剂采用的菌种，都是从存在于自然环境的天然菌中筛选提纯并保存于国家认证的微生物菌保中心或科研机构，其安全类别都已被确定为四类，对人畜禽和蚊子的天敌及生态环境无伤害，蚊媒不产生抗性，可以在室内外广泛使用及大面积喷洒。而化学杀虫剂会使蚊媒产生抗性，且对非标靶生物造成伤害。那些用经过基因改造或人工嫁接的菌种所研制的变异的微生物灭蚊菌剂，还应在保障人类健康和生态环境的前提下，对所变异的菌种作出科学的论证和检验之后才可以推广使用。
（5）本发明制剂在诱蚊剂中只微量添加，蚊子稍有沾染就能侵染发病，在中毒致死前还能带菌存活1-7天，这期间被侵染的蚊子则成为我们微生物菌剂的蚊媒，将灭蚊菌传染给更多的蚊子；而化学杀虫剂多是猝死类的制剂，不能在蚊子之间互相传染。
具体实施方式
以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围。
实施例1
一种多菌复合增效液体灭蚊菌剂，包括杀灭蚊子的五种好氧菌组成的a菌液和抑制拮抗的四种厌氧菌组成的b菌液；
a菌液由以下五种好氧菌组成：苏云金芽孢杆菌以色列亚种，灭蚊链霉菌，球孢白僵菌，金龟子绿僵菌，玫烟色棒束孢，各占a菌液的20%；
b菌液由以下四种厌氧菌组成：保加利亚乳杆菌，嗜酸乳杆菌，植物乳杆菌，德氏乳杆菌，各占b菌液的25%。
一种多菌复合增效液体灭蚊菌剂的制备方法，包括以下步骤：
第一步：将a菌液中的五种好氧菌，分别发酵培养成五种液体好氧菌液，
（1）分别配制苏云金芽孢杆菌、灭蚊链霉菌、球孢白僵菌、金龟子绿僵菌、玫烟色棒束孢五种液体培养基，向五种培养基中接种各自对应的菌种；然后在25-37℃、120-140r/min、好氧发酵的条件下进行菌种的一级扩大培养，得到五种一级扩大培养的好氧菌液；
（2）再分别取五种一级发酵的好氧菌液，向五种所述液体好氧菌培养基中接种各自对应的菌液，在同上的条件下，进行菌剂的二级扩大培养，得到五种二级扩大好氧发酵的菌液，其中每种一级菌液的接种量为其培养基质量的2-10%；
（3）再分别取五种二级发酵的好氧菌液，向五种所述液体好氧菌培养基中接种各自对应的菌液，在同上的条件下，进行菌剂的三级扩大培养，得到五种三级扩大好氧发酵的菌液，其中每一种二级菌液的接种量为其培养基质量的2-10%；
（4）五种经三级培养的菌液，按苏云金芽孢杆菌以色列亚种，灭蚊链霉菌，球孢白僵菌，金龟子绿僵菌，玫烟色棒束孢，各占a菌液的20%混合并静置均质24小时后，即做为a菌液；
第二步：将b菌液中的四种厌氧菌剂，发酵培养成四种液体混合的厌氧菌液，
（1）分别配制保加利亚乳杆菌，嗜酸乳杆菌，植物乳杆菌以及德氏乳杆菌的液体厌氧菌培养基，再分别向四种液体厌氧菌培养基中接种各自对应的菌种，在25-37℃条件下静置密闭发酵20天，进行菌种的一级扩大培养，得到四种一级厌氧菌液；
（2）把四种一级培养的厌氧菌液按各25%的比例混合在一起，密闭、静置24小时，即为一级发酵的厌氧混合菌液；
（3）配制混合发酵的液体厌氧菌培养基，将经一级发酵的厌氧混合菌液，接种到混合发酵的液体厌氧菌培养基中，接种量为培养基质量的5-10%，在25-37℃条件下静置密闭厌氧发酵20天，进行菌种的二级扩大培养，得到混合发酵的二级厌氧菌液；
（4）重复步骤（3），得到混合发酵的三级厌氧菌液，测定ph值小于等于5后，得到混合b菌液；
第三步：配比：按a菌液占50%、b菌液占50%的配比，把五种a菌液缓慢注入到混合b菌液中，搅拌均匀，静置24小时均质稳定后，得到多菌复合增效液体灭蚊菌剂。
其中，（一）组成a菌液的五个菌液的发酵培养基配方如下：
（a1）苏云金芽孢杆菌培养基配方：蔗糖20g，蛋白胨5g，酵母膏5g，磷酸氢二钾0.3g，磷酸氢二钠1g，硫酸镁1g，硫酸亚铁0.02g，氯化钙0.02g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值7.2，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧震荡发酵60-80小时；
（a2）灭蚊链霉菌培养基配方：可溶性淀粉20g，硝酸钾1g，磷酸氢二钾0.5g，硫酸镁0.5g，氯化钠0.5g，硫酸亚铁0.01g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值7.0，遮光，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧震荡发酵72-96小时；
（a3）球孢白僵菌培养基配方：蔗糖50g，磷酸氢二钾1g，1%玉米浸提液补足1l；培养条件：初始ph值7.0，遮光，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧震荡发酵72-96小时；其中，1%玉米浸提液采用鲜玉米粒10g加水1l，煮沸30分钟，滤除渣，无菌水补足1l；
（a4）金龟子绿僵菌培养基配方：蔗糖50g，磷酸氢二钾1g，1%玉米浸提液补足1l；培养条件：初始ph值7.0，遮光，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧震荡发酵72-96小时；其中，1%玉米浸提液采用鲜玉米粒10g加水1l，煮沸30分钟，滤除渣，无菌水补足1l；
（a5）玫烟色棒束孢培养基配方：20%马铃薯提取液1l，蔗糖20g；培养条件：初始ph值7.0，遮光，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧发酵5-7天；其中，20%马铃薯提取液采用去皮马铃薯200g，切小块，加水1l煮沸30分钟，滤除渣，无菌水补足1l；
（二）组成b菌液的四个菌液的发酵培养基配方如下：
（b1）保加利亚乳杆菌培养基配方：蔗糖20g，蛋白胨35g，碳酸钙1.5g，酵母膏30g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁1.5g，碳酸钙1g，硫酸锰0.02g，磷酸氢氨1.5g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天；
（b2）嗜酸乳杆菌培养基配方：蔗糖20g，蛋白胨20g，氯化钠1g，硫酸锰0.01g，硫酸镁0.02g，乙酸钠0.5g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天；
（b3）植物乳杆菌培养基配方：蔗糖20g，酵母膏25g，磷酸氢二钾2g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天；
（b4）德氏乳杆菌培养基配方：蔗糖20g，蛋白胨35g，碳酸钙1.5g酵母膏30g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁1.5g，碳酸钙1g，硫酸锰0.02g，磷酸氢氨1.5g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天；
（三）b菌液四个菌液混合发酵培养基配方如下：蔗糖20g，蛋白胨35g，碳酸钙1.5g，酵母膏30g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁1.5g，碳酸钙1g，硫酸锰0.02g，磷酸氢氨1.5g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天。
本发明还提供了多菌复合增效液体灭蚊菌剂在与诱蚊剂中的应用，具体为：与多种诱蚊剂复配，制成微生物诱杀灭蚊剂。
实施例1一种多菌复合增效液体灭蚊菌剂的应用实验：
（1）实验产品：多菌复合增效液体灭蚊菌剂与诱蚊剂复配，制成微生物菌诱杀灭蚊剂，其配方按重量比，红糖9%，酵母粉4%，多菌复合增效液体灭蚊菌剂2%，清水85%；
（2）应用过程：放入在灭蚊灯的储蚊盒中；
（3）具体实施情况：
时间：2018年8月，地点：广西北海市正兴海产加工厂300平方米分拣车间；使用广东产的一款紫光灭蚊灯，把按上述配方配制的诱蚊菌剂添加到储蚊盒约50ml，将灭蚊灯挂置在车间里，从下午6点到第二天下午3点，打开灭蚊灯的储蚊盒清点，死亡及半死不活的蚊子共有116只；对比试验：在前一天相同地点和相同的测定时间，没添加上述诱蚊剂时，同样是这款灭蚊灯，捉到的蚊子仅10只。
实施例2
一种多菌复合增效液体灭蚊菌剂，包括杀灭蚊子的五种好氧菌组成的a菌液和抑制拮抗的四种厌氧菌组成的b菌液；
a菌液由以下五种好氧菌组成：苏云金芽孢杆菌以色列亚种占30%，灭蚊链霉菌占30%，球孢白僵菌占20%，金龟子绿僵菌占10%，玫烟色棒束孢占10%；
b菌液由以下四种厌氧菌组成：保加利亚乳杆菌，嗜酸乳杆菌，植物乳杆菌，德氏乳杆菌，各占25%的比例。
一种多菌复合增效液体灭蚊菌剂的制备方法，包括以下步骤：
第一步：将a菌液中的五种好氧菌，分别发酵培养成五种液体好氧菌液，
（1）分别配制苏云金芽孢杆菌、灭蚊链霉菌、球孢白僵菌、金龟子绿僵菌、玫烟色棒束孢五种液体培养基，向五种培养基中接种各自对应的菌种；然后在25-37℃、120-140r/min、好氧发酵的条件下进行菌种的一级扩大培养，得到五种一级扩大培养的好氧菌液；
（2）再分别取五种一级发酵的好氧菌液，向五种所述液体好氧菌培养基中接种各自对应的菌液，在同上的条件下，进行菌剂的二级扩大培养，得到五种二级扩大好氧发酵的菌液，其中每种一级菌液的接种量为其培养基质量的5-10%；
（3）再分别取五种二级发酵的好氧菌液，向五种所述液体好氧菌培养基中接种各自对应的菌液，在同上的条件下，进行菌剂的三级扩大培养，得到五种三级扩大好氧发酵的菌液，其中每一种二级菌液的接种量为其培养基质量的10%；
（4）五种经三级培养的菌液按以下比例配比：苏云金芽孢杆菌以色列亚种占30%，灭蚊链霉菌占30%，球孢白僵菌占20%，金龟子绿僵菌占10%，玫烟色棒束孢占10%；经混合并静置均质24小时后，即做为a菌液；
第二步：将b菌液中的四种厌氧菌剂，发酵培养成四种液体混合的厌氧菌液，
（1）分别配制保加利亚乳杆菌，嗜酸乳杆菌，植物乳杆菌以及德氏乳杆菌的液体厌氧菌培养基，再分别向四种液体厌氧菌培养基中接种各自对应的菌种，在37℃条件下静置密闭发酵10天，进行菌种的一级扩大培养，得到四种一级厌氧菌液；
（2）把四种一级培养的厌氧菌液按各25%的比例混合在一起，密闭、静置24小时，即为一级发酵的厌氧混合菌液；
（3）配制混合发酵的液体厌氧菌培养基，将经一级发酵的厌氧混合菌液，接种到混合发酵的液体厌氧菌培养基中，接种量为培养基质量的10%，在37℃条件下静置密闭厌氧发酵10天，进行菌种的二级扩大培养，得到混合发酵的二级厌氧菌液；
（4）重复步骤（3），得到混合发酵的三级厌氧菌液，测定ph值小于等于5后，得到混合b菌液；
第三步：配比：按a菌液占60%、b菌液占40%的比例配比，把五种a菌液缓慢注入到混合b菌液中，搅拌均匀，静置24小时均质稳定后，得到多菌复合增效液体灭蚊菌剂。
其中，（一）组成a菌液的五个菌液的发酵培养基配方如下：
（a1）苏云金芽孢杆菌培养基配方：蔗糖20g，蛋白胨5g，酵母膏5g，磷酸氢二钾0.3g，磷酸氢二钠1g，硫酸镁1g，硫酸亚铁0.02g，氯化钙0.02g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值7.2，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧震荡发酵60-80小时；
（a2）灭蚊链霉菌培养基配方：可溶性淀粉20g，硝酸钾1g，磷酸氢二钾0.5g，硫酸镁0.5g，氯化钠0.5g，硫酸亚铁0.01g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值7.0，遮光，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧震荡发酵72-96小时；
（a3）球孢白僵菌培养基配方：蔗糖50g，磷酸氢二钾1g，1%玉米浸提液补足1l；培养条件：初始ph值7.0，遮光，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧震荡发酵72-96小时；其中，1%玉米浸提液采用鲜玉米粒10g加水1l，煮沸30分钟，滤除渣，无菌水补足1l；
（a4）金龟子绿僵菌培养基配方：蔗糖50g，磷酸氢二钾1g，1%玉米浸提液补足1l；培养条件：初始ph值7.0，遮光，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧震荡发酵72-96小时；其中，1%玉米浸提液采用鲜玉米粒10g加水1l，煮沸30分钟，滤除渣，无菌水补足1l；
（a5）玫烟色棒束孢培养基配方：20%马铃薯提取液1l，蔗糖20g；培养条件：初始ph值7.0，遮光，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧发酵5-7天；其中，20%马铃薯提取液采用去皮马铃薯200g，切小块，加水1l煮沸30分钟，滤除渣，无菌水补足1l；
（二）组成b菌液的四个菌液的发酵培养基配方如下：
（b1）保加利亚乳杆菌培养基配方：蔗糖20g，蛋白胨35g，碳酸钙1.5g，酵母膏30g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁1.5g，碳酸钙1g，硫酸锰0.02g，磷酸氢氨1.5g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天；
（b2）嗜酸乳杆菌培养基配方：蔗糖20g，蛋白胨20g，氯化钠1g，硫酸锰0.01g，硫酸镁0.02g，乙酸钠0.5g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天；
（b3）植物乳杆菌培养基配方：蔗糖20g，酵母膏25g，磷酸氢二钾2g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天；
（b4）德氏乳杆菌培养基配方：蔗糖20g，蛋白胨35g，碳酸钙1.5g酵母膏30g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁1.5g，碳酸钙1g，硫酸锰0.02g，磷酸氢氨1.5g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天；
（三）b菌液四个菌液混合发酵培养基配方如下：蔗糖20g，蛋白胨35g，碳酸钙1.5g，酵母膏30g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁1.5g，碳酸钙1g，硫酸锰0.02g，磷酸氢氨1.5g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天。
本发明还提供了多菌复合增效液体灭蚊菌剂在与诱蚊剂中的应用，具体为：与多种诱蚊剂复配，制成微生物诱杀灭蚊剂。
实施例2多菌复合增效液体灭蚊菌剂应用实验：
（1）实验产品：多菌复合增效液体灭蚊菌剂与多种诱蚊剂复配，制成微生物菌诱杀灭蚊剂，其配方按重量比，白糖10%，酵母粉5%，多菌复合增效液体灭蚊菌剂2%，啤酒40%，清水43%；
（2）应用过程：在盆、盘等容器中加注上述微生物菌诱杀灭蚊剂中的一种，浸蘸黑色棉布并平整悬挂于容器上方，棉布下边缘浸在制剂液体中，保持黑棉布的湿润，蚊子只要触碰就会感染灭蚊菌而被灭杀；
（3）实施情况：
时间：2018年8月，地点：广西宜州市庆远镇山湾村寺贝屯，菌菇养殖户老韦的约160平方米菇房；试用前菇房里有大量蚊子，致使人无法作业，将按上述配方配制的诱蚊菌剂约1升倒到盆里，再将双层黑色棉布用诱蚊剂浸湿后悬挂于盆上方约60厘米，下边浸于盆的液体里，放置在菇房中；三天后从挂布上、盆里及周边清点到死亡的蚊子共有362只，菇房内已无蚊子。
实施例3
一种多菌复合增效液体灭蚊菌剂，包括杀灭蚊子的五种好氧菌组成的a菌液和抑制拮抗的四种厌氧菌组成的b菌液；
a菌液由以下五种好氧菌组成：苏云金芽孢杆菌以色列亚种占30%，灭蚊链霉菌占20%，球孢白僵菌占20%，金龟子绿僵菌占20%，玫烟色棒束孢占10%；
b制剂由以下四种厌氧菌组成：保加利亚乳杆菌，嗜酸乳杆菌，植物乳杆菌，德氏乳杆菌，各占25%的比例。
一种多菌复合增效液体灭蚊菌剂的制备方法，包括以下步骤：
第一步：将a菌液中的五种好氧菌，分别发酵培养成五种液体好氧菌液，
（1）分别配制苏云金芽孢杆菌、灭蚊链霉菌、球孢白僵菌、金龟子绿僵菌、玫烟色棒束孢五种液体培养基，向五种培养基中接种各自对应的菌种；然后在25℃、140r/min、好氧发酵的条件下进行菌种的一级扩大培养，得到五种一级扩大培养的好氧菌液；
（2）再分别取五种一级发酵的好氧菌液，向五种所述液体好氧菌培养基中接种各自对应的菌液，在同上的条件下，进行菌剂的二级扩大培养，得到五种二级扩大好氧发酵的菌液，其中每种一级菌液的接种量为其培养基质量的2-10%；
（3）再分别取五种二级发酵的好氧菌液，向五种所述液体好氧菌培养基中接种各自对应的菌液，在同上的条件下，进行菌剂的三级扩大培养，得到五种三级扩大好氧发酵的菌液，其中每一种二级菌液的接种量为其培养基质量的2-10%；
（4）五种经三级培养的菌液，按苏云金芽孢杆菌以色列亚种占30%，灭蚊链霉菌占20%，球孢白僵菌占20%，金龟子绿僵菌占20%，玫烟色棒束孢占10%的比例混合并静置均质24小时后，即做为a菌液；
第二步：将b菌液中的四种厌氧菌剂，发酵培养成四种液体混合的厌氧菌液，
（1）分别配制保加利亚乳杆菌，嗜酸乳杆菌，植物乳杆菌以及德氏乳杆菌的液体厌氧菌培养基，再分别向四种液体厌氧菌培养基中接种各自对应的菌种，在25-37℃条件下静置密闭发酵10-30天，进行菌种的一级扩大培养，得到四种一级厌氧菌液；
（2）把四种一级培养的厌氧菌液按各25%的比例混合在一起，密闭、静置24小时，即为一级发酵的厌氧混合菌液；
（3）配制混合发酵的液体厌氧菌培养基，将经一级发酵的厌氧混合菌液，接种到混合发酵的液体厌氧菌培养基中，接种量为培养基质量的5-10%，在25-37℃条件下静置密闭厌氧发酵10-30天，进行菌种的二级扩大培养，得到混合发酵的二级厌氧菌液；
（4）重复步骤（3），得到混合发酵的三级厌氧菌液，测定ph值小于等于5后，得到混合b菌液；
第三步：配比：按a菌液占70%、b菌液占30%的比例配比，把五种a菌液缓慢注入到混合b菌液中，搅拌均匀，静置24小时均质稳定后，得到多菌复合增效液体灭蚊菌剂。
其中，（一）组成a菌液的五个菌液的发酵培养基配方如下：
（a1）苏云金芽孢杆菌培养基配方：蔗糖20g，蛋白胨5g，酵母膏5g，磷酸氢二钾0.3g，磷酸氢二钠1g，硫酸镁1g，硫酸亚铁0.02g，氯化钙0.02g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值7.2，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧震荡发酵60-80小时；
（a2）灭蚊链霉菌培养基配方：可溶性淀粉20g，硝酸钾1g，磷酸氢二钾0.5g，硫酸镁0.5g，氯化钠0.5g，硫酸亚铁0.01g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值7.0，遮光，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧震荡发酵72-96小时；
（a3）球孢白僵菌培养基配方：蔗糖50g，磷酸氢二钾1g，1%玉米浸提液补足1l；培养条件：初始ph值7.0，遮光，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧震荡发酵72-96小时；其中，1%玉米浸提液采用鲜玉米粒10g加水1l，煮沸30分钟，滤除渣，无菌水补足1l；
（a4）金龟子绿僵菌培养基配方：蔗糖50g，磷酸氢二钾1g，1%玉米浸提液补足1l；培养条件：初始ph值7.0，遮光，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧震荡发酵72-96小时；其中，1%玉米浸提液采用鲜玉米粒10g加水1l，煮沸30分钟，滤除渣，无菌水补足1l；
（a5）玫烟色棒束孢培养基配方：20%马铃薯提取液1l，蔗糖20g；培养条件：初始ph值7.0，遮光，25-37℃，120-140r/min，不封口好氧发酵5-7天；其中，20%马铃薯提取液采用去皮马铃薯200g，切小块，加水1l煮沸30分钟，滤除渣，无菌水补足1l；
（二）组成b菌液的四个菌液的发酵培养基配方如下：
（b1）保加利亚乳杆菌培养基配方：蔗糖20g，蛋白胨35g，碳酸钙1.5g，酵母膏30g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁1.5g，碳酸钙1g，硫酸锰0.02g，磷酸氢氨1.5g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天；
（b2）嗜酸乳杆菌培养基配方：蔗糖20g，蛋白胨20g，氯化钠1g，硫酸锰0.01g，硫酸镁0.02g，乙酸钠0.5g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天；
（b3）植物乳杆菌培养基配方：蔗糖20g，酵母膏25g，磷酸氢二钾2g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天；
（b4）德氏乳杆菌培养基配方：蔗糖20g，蛋白胨35g，碳酸钙1.5g酵母膏30g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁1.5g，碳酸钙1g，硫酸锰0.02g，磷酸氢氨1.5g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天；
（三）b菌液四个菌液混合发酵培养基配方如下：蔗糖20g，蛋白胨35g，碳酸钙1.5g，酵母膏30g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁1.5g，碳酸钙1g，硫酸锰0.02g，磷酸氢氨1.5g，无菌水补足1l；培养条件：初始ph值6.0，30-37℃，遮光，密闭封口，静置厌氧培养10-30天。
本发明还提供了多菌复合增效液体灭蚊菌剂单独使用作灭蚊菌剂的应用。
实施例3的多菌复合增效液体灭蚊菌剂应用实验：
（1）实验产品：实施例3的多菌复合增效液体灭蚊菌剂；
（2）应用过程：单独用本菌剂兑水稀释100至1000倍喷洒或飞机喷淋，可实大规模的灭蚊；
（3）实施情况：
时间：2018年9月，地点：广西河池市刘三姐乡绞股蓝大棚种植户老覃约2000平方米塑钢大棚；试用前大棚里有大量蚊子，严重影响人员操作；将按上述配方配制的灭蚊菌剂约500ml稀释100倍后灌入喷雾器背壶，全大棚包括种植作物喷洒一次；7天后大棚内已无蚊子；人和作物没有受到任何伤害。