一种低温等离子体协同佐剂清除作物重茬病害菌的方法与流程

技术领域：

本发明涉及一种低温等离子体协同佐剂清除作物重茬病害菌的方法，此外，本发明还涉及于人参、蓝莓、向日葵、三七、水稻、小麦、百合、瓜果等重茬地的应用。

背景技术：

重茬，连作障碍指同一作物或近缘作物在同一地块连续种植，即使在正常管理措施下，也会导致作物产量降低、品质变劣、生长状况变差的现象。福建师范大学林茂兹，黄少华，陈巧巧发现，将太子参-水稻-太子参”轮作和“太子参-太子参”的连作，发现土壤中都有尖孢镰刀菌，只是数量的多少问题(林茂兹,黄少华,陈巧巧.太子参连作障碍及其根际土壤尖孢镰刀菌数量变化.云南农业大学学报，2012，27(5)716-721)；【申请号】201810260874.9南京农业大学的研究者发现，镰刀菌引起的植物病害还涉及小麦赤霉病、水稻恶苗病、瓜类枯萎病等，【申请号】201911426442.1的浙江农林大学将与中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所申请号】201910288479.6浙江大学宋智勇等基于纳米材料在细菌，病毒等方面的化学生物学效应研究，近年来在small，chemicalcommunications等国际学术期刊上发表论文2篇；现有技术中，申请号为“201711152132.6”的一种带电机风扇的便携式等离子体治疗仪，解决了以往等离子体发生器采用空压机、气泵、气瓶等提供工作介质气的弊端，减小了设备空间、简化了设备结构，提高了安全度，但在使用过程中，仍然存在该装置在使用时仍需要外接电源，缺少内部储电供电的装置，在无电的环境下不能工作等环境适应有限的问题。低温等离子体作为物质固、液、气三态之外的第四态，在能量传递过程中也可以形成激发态的的原子、分子、离子、自由基等，改变细菌、病毒依附的保护层蛋白膜或器官，使得活化的小分子醇、有机酸类等可以进入，并诱发一系列的附加反应，达到灭菌抗重茬病害的效果。

技术实现要素：
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本发明针对低温等离子体在上述技术领域的局限性，提供一种低温等离子体协同技术清除作物重茬病害菌的方法。

所述的一种低温等离子体协同清除作物重茬病害菌的方法，由试剂盒和生物显微镜测定确定病害菌种类，再将带羧基、甲氧基、醇羟基、酚羟基、醌类的黄腐酸钾、黄腐酸钠、黄腐酸钙、黄腐酸铁、黄芪、黄酮、皂苷、甘草酸、吲哚酸的纳米复合制剂，经离子体器械的佐剂口喷出，通过移动射频微电磁场激发，作用于病害菌蛋白膜和器官，使其解体或变异，对人参、蓝莓、向日葵、三七、水稻、小麦、百合、瓜果等重茬镰刀菌、菌核菌等病害菌的清除率达98.00·99.90％。所述的病害菌蛋白膜和器官检测运用自制的试剂盒法(对照标样保藏在华东理工大学生物工程室)，其中溶酶菌浓度5-50mg/l、溶酶菌缓冲液浓度0.5-5mg/l、溶酶菌裂解液0.2-1.0mg/l、溶酶菌沉淀液0.1-0.5mg/l，离心分离速度12000-15000r/min,琼脂糖凝胶浓度为0.3-0.7％质量百分浓度，电泳检测操作温度25-35℃，总时间25-60min进行dna测定，得出病害菌类型。

所述的病害菌生物显微镜检测，为双目生物显微镜，用考马斯亮兰g250染色，作病害菌形态鉴定，并通过酶标仪，确定镰刀菌、菌核菌、软腐菌等病害菌。

所述的由试剂盒和生物显微镜测定确定病害菌种类，再将带羧基、甲氧基、醇羟基、酚羟基、醌类的黄腐酸钾、黄腐酸钠、黄腐酸钙、黄腐酸铁、黄芪、黄酮、皂苷、甘草酸、吲哚酸的纳米复合制剂中的5种或8种，经纳米复合制剂通过离子体器械的佐剂口喷出，优先的浓度为0.001-0.005％：0.001-0.010％：0.002-0.150％：0.003-0.300％：0.003-0.500％，或者0.010-0.300％，0.005-0.100％：0.010-0.200％：0.015-0.3000：.001-0.005％：0.001-0.010％：0.002-0.150％：0.003-0.300％％，其余为水剂，形成不同功效的纳米复合制剂。

所述的不同功效的纳米复合制剂，通过低温等子体移动射频微电磁场(南京苏曼等离子科技有限公司订制)，由3.50-10.00mhz激发形成1-100w、放电气压0.1-50pa的等离子体佐剂的等电点3.0-8.5，喷施量1-50l/亩，优化的为1-10l/亩使病害混蛋白解体或变异，在人参、蓝莓、向日葵、三七、水稻、小麦、百合、瓜果等重茬病害清除率达95.00·99.90％。

附图说明：

图1是采用nikon尼康e100双目生物显微镜检测到的吉林白山人参土壤地中的镰刀菌图

图2是采用nikon尼康e100双目生物显微镜检测到的吉林农安向日葵土壤地中的镰刀菌图

实施例1

取溶酶菌浓度5mg/l、溶酶菌缓冲液浓度0.5mg/l、溶酶菌裂解液0.2mg/l、溶酶菌沉淀液0.1mg/l，离心分离速度12000r/min,琼脂糖凝胶浓度为0.3％质量百分浓度，电泳检测操作温度25℃，总时间25min进行dna测定，得出病害菌为镰刀菌(对照标样保藏在华东理工大学生物工程室)，采用nikon尼康e100双目生物显微镜检测，并做考马斯亮兰g250染色，进行形态鉴定(见附图)，且通过酶标仪法确定含量，由等离子体器械中的佐剂口喷出带羧基、甲氧基、醇羟基、酚羟基、醌类的黄腐酸钾、黄腐酸钠、黄腐酸钙、黄腐酸铁、黄芪、黄酮、皂苷、甘草酸、吲哚酸等纳米复合成分浓度为0.001％：0.001％：0.002％：0.003％：0.003％，其余为水剂纳米复合制剂。在南京苏曼等离子科技有限公司订制的低温子体移动射频微电磁场，在3.50mhz激发形成1w、放电气压0.1pa的等离子体功能佐剂，等电点4.0，喷施量1l/亩，在人参等重茬病害清除率达98.00％。

实施例2

取溶酶菌浓度50mg/l、溶酶菌缓冲液浓度5mg/l、溶酶菌裂解液1mg/l、溶酶菌沉淀液0.5mg/l，离心分离速度15000r/min,琼脂糖凝胶浓度为0.7％质量百分浓度，电泳检测操作温度35℃，总时间60min进行dna测定，得出病害菌为镰刀菌(对照标样保藏在华东理工大学生物工程室)，采用nikon尼康e100双目生物显微镜检测，并用考马斯亮兰g250染色，作菌形态鉴定，且通过酶标仪法确定含量。由等离子体器械中的佐剂口喷出带羧基、甲氧基、醇羟基、酚羟基、醌类的黄腐酸钾、黄腐酸钠、黄腐酸钙、黄腐酸铁、黄芪、黄酮、皂苷、甘草酸、吲哚酸等纳米复合成分浓度为0.005％：0.010％：0.150％：0.300％：0.500％：0.300％，0.100％：0.200％，其余为水剂，在南京苏曼等离子科技有限公司制作的低温子体移动射频微电磁场，在10.00mhz激发形成100w、放电气压50pa的等离子体，在功能佐剂作用下，在等电点6.6，喷施量10l/亩，在人参等重茬病害清除率达99.00％。

本发明在国家农药零增长的方针下，通过吉林白山市、农安县的不同作物、不同土质的取样分析鉴定，并配合重金属离子检测等，结合佐剂的改变，协同智能化的等离子体技术解决镰刀菌、菌核菌、软腐菌等在人参、向日葵、水稻、小麦百合、三七、瓜果等作物上的共害问题，具有显著的社会效益、经济效益和环境效益。