一种蛇婆子微乳剂及其制备方法和应用

1.本发明涉及植物源农药领域，特别涉及一种蛇婆子微乳剂及其制备方法和应用。


背景技术：

2.农药在人类防治农作物病虫草害等诸方面起到了巨大的贡献，由于农药的快速发展和人类对生存环境的保护意识不断增强以及化学农药自身存在的缺点，化学农药的发展越来越困难。农药的滥用严重威胁了农业的可持续性和全球粮食安全，因此迫切需要安全、无毒副作用、不污染环境的新型农药。从植物中提取的天然产物及其类似物在控制各种植物病原体中起着非常重要的作用。生物农药具有生物可降解性，并且对哺乳动物和其他非目标生物的残留毒性低。
3.荔枝是海南重要水果之一，在国内市场具有较大的需求。但荔枝霜疫霉病在花期、果实转色至成熟期均易于发生和流行，防治不力，会造成重大损失。寻求效果佳的植物源防效药剂具有重大意义。
4.蛇婆子(waltheria indica l.sterculiaceae)属于梧桐科(sterculiaceae)蛇婆子属waltheria)，为一种略直立或匍匐状半灌木，广泛分布于非洲、南美和东南亚等热带和亚热带地区。主要分布于福建、台湾、广东、海南、广西、云南等地。蛇婆子具抗炎、抗菌、抗锥虫病、抗癌等作用。研究发现蛇婆子含黄酮类化合物、生物碱和萜类等60多种化合物。蛇婆子提取物在环境中易降解，对人、畜低毒。本发明致力研制蛇婆子植物源药剂，提高其对荔枝霜疫霉防效水平。


技术实现要素：

5.鉴于此，本发明提出一种蛇婆子微乳剂及其制备方法和应用，解决上述问题。
6.本发明的技术方案为这样实现的：
7.一种蛇婆子微乳剂的应用，应用于防治荔枝霜疫霉；
8.所述微乳剂包括以下原料制得：蛇婆子提取物、有机溶剂、乳化剂和水；所述蛇婆子提取物为取蛇婆子的地上部粉碎后经乙酸乙酯和甲醇提取制得；所述有机溶剂为质量比1：0.8
‑
1.2：4
‑
6的乙酸乙酯、乙醇和甲醇的混合物；所述乳化剂为质量比2：0.8
‑
1.2：0.8
‑
1.2的蓖麻油聚氧乙烯醚40、油酸聚氧乙烯酯和十二胺聚氧乙烯醚的混合物；所述蛇婆子提取物、有机溶剂、乳化剂和水的质量比为1：1.9
‑
2.1：1.9
‑
2.1：14.8
‑
15.2。
9.进一步的，所述蛇婆子提取物的制备方法：采集蛇婆子的地上部，剪取茎叶，洗净阴干，粉碎，得到粉状物；将粉碎物用体积比为1：4
‑
6乙酸乙酯和甲醇浸泡提取18
‑
36h；粉碎物与乙酸乙酯和甲醇的料液比kg/l为1：5
‑
7，然后过滤取清液，旋转蒸发仪蒸干，将提取液浓缩成膏状，即可得到蛇婆子提取物。
10.进一步的，所述有机溶剂为质量比1：1：5的乙酸乙酯、乙醇和甲醇的混合物；所述乳化剂为质量比2：1：1的蓖麻油聚氧乙烯醚40、油酸聚氧乙烯酯和十二胺聚氧乙烯醚的混合物。
11.进一步的，所述蛇婆子提取物、有机溶剂、乳化剂和水的质量比为1：2.0：2.0：15.0。
12.进一步的，所述微乳剂由以下质量百分比原料制得：蛇婆子提取物5％，有机溶剂10％，乳化剂10％，水75％。
13.进一步的，所述蛇婆子微乳剂的制备方法包括以下步骤：
14.1)取蛇婆子粗提物于西林瓶中，将有机溶剂加入到西林瓶，将粗提物溶于溶剂，得混悬液1；
15.2)将步骤1)得到的混悬液1搅拌均匀；
16.3)将乳化剂加入西林瓶，制成混悬液2；
17.4)将步骤3)得到的混悬液2搅拌均匀；
18.5)最后加入水，搅拌，即得蛇婆子微乳剂。
19.进一步的，在步骤2)、步骤5)中，所述搅拌的条件为：在25
±
5℃条件下，采用磁力搅拌器中以500～1000r
·
min
‑1中搅拌1～3h。
20.与现有技术相比，本发明的有益效果为：
21.(1)本发明针对荔枝霜疫霉，以蛇婆子提取物为活性成分，加入特定比例复配的有机溶剂、乳化剂，并加入水制成蛇婆子微乳剂，对荔枝霜疫霉的防效达到94％以上，能够显著抑制荔枝霜疫霉恶化。
22.(2)而且相比现有技术，本发明制备的蛇婆子微乳剂使用较少的有机溶剂和乳化剂，不但降低成本，而且更有利于环保要求。
23.(2)本发明蛇婆子微乳剂符合微乳剂质量标准，不含化学农药成分，对人、畜、环境安全，不易产生抗药性；同时具有稳定、高效、低成本的优点。本发明制备蛇婆子微乳剂具有低毒、无残留、对环境安全、不产生抗性等综合功效，符合绿色或有机生产标准要求。
具体实施方式
24.为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
25.本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
26.本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
27.实施例1蛇婆子微乳剂制备
28.1.1蛇婆子提取物的制备
29.将蛇婆子地上部粉碎后过40目筛得到粉状物；将粉碎物用体积比为1：5乙酸乙酯和甲醇浸泡提取24h；粉碎物与乙酸乙酯和甲醇的料液比kg/l为1：6，然后过滤取清液，用旋转蒸发仪50℃蒸干，将提取液浓缩成膏状，即可得到蛇婆子提取物。重复三次，即得蛇婆子提取物。
30.1.2配方
31.蛇婆子提取物5％，有机溶剂10％，乳化剂10％，水75％。
32.以质量比1：1：5的乙酸乙酯、乙醇和甲醇为有机溶剂、以质量比2：1：1的蓖麻油聚氧乙烯醚40、油酸聚氧乙烯酯和十二胺聚氧乙烯醚为乳化剂，水质选择自来水。
33.1.3制备方法
34.1)按照上述配方，称取蛇婆子粗提物于西林瓶中，将有机溶剂(乙酸乙酯、乙醇和
甲醇)加入到西林瓶，将粗提物完全溶于溶剂，得混悬液1；
35.2)将步骤1)得到的混悬液1，在25
±
5℃条件下，采用磁力搅拌器中以800r
·
min
‑1中搅拌2h；
36.3)将乳化剂(蓖麻油聚氧乙烯醚40、油酸聚氧乙烯酯和十二胺聚氧乙烯醚)加入西林瓶，制成混悬液2；
37.4)将步骤3)得到的混悬液2搅拌均匀；
38.5)最后加入水，在25
±
5℃条件下，采用磁力搅拌器中以800r
·
min
‑1中搅拌2h，即得蛇婆子微乳剂。
39.实施例2蛇婆子微乳剂制备
40.1.1蛇婆子提取物的制备
41.将蛇婆子地上部粉碎后过40目筛得到粉状物；将粉碎物用体积比为1：4乙酸乙酯和甲醇浸泡提取36h；粉碎物与乙酸乙酯和甲醇的料液比kg/l为1：5，然后过滤取清液，用旋转蒸发仪50℃蒸干，将提取液浓缩成膏状，即可得到蛇婆子提取物。重复三次，即得蛇婆子提取物。
42.1.2配方
43.蛇婆子提取物5％，有机溶剂10％，乳化剂10％，水75％。
44.以质量比1：0.8：6的乙酸乙酯、乙醇和甲醇为有机溶剂、以质量比2：0.8：1.2的蓖麻油聚氧乙烯醚40、油酸聚氧乙烯酯和十二胺聚氧乙烯醚为乳化剂，水质选择自来水。
45.1.3制备方法
46.1)按照上述配方，称取蛇婆子粗提物于西林瓶中，将有机溶剂(乙酸乙酯、乙醇和甲醇)加入到西林瓶，将粗提物完全溶于溶剂，得混悬液1；
47.2)将步骤1)得到的混悬液1，在25
±
5℃条件下，采用磁力搅拌器中以800r
·
min
‑1中搅拌2h；
48.3)将乳化剂(蓖麻油聚氧乙烯醚40、油酸聚氧乙烯酯和十二胺聚氧乙烯醚)加入西林瓶，制成混悬液2；
49.4)将步骤3)得到的混悬液2搅拌均匀；
50.5)最后加入水，在25
±
5℃条件下，采用磁力搅拌器中以800r
·
min
‑1中搅拌2h，即得蛇婆子微乳剂。
51.实施例3蛇婆子微乳剂制备
52.1.1蛇婆子提取物的制备
53.将蛇婆子地上部粉碎后过40目筛得到粉状物；将粉碎物用体积比为1：6乙酸乙酯和甲醇浸泡提取18h；粉碎物与乙酸乙酯和甲醇的料液比kg/l为1：7，然后过滤取清液，用旋转蒸发仪50℃蒸干，将提取液浓缩成膏状，即可得到蛇婆子提取物。重复三次，即得蛇婆子提取物。
54.1.2配方
55.蛇婆子提取物5％，溶剂10％，乳化剂10％，水75％。
56.以质量比1：1.2：4的乙酸乙酯、乙醇和甲醇为溶剂、以质量比2：1.2：0.8的蓖麻油聚氧乙烯醚40、油酸聚氧乙烯酯和十二胺聚氧乙烯醚为乳化剂，水质选择自来水。
57.1.3制备方法
58.1)按照上述配方，称取蛇婆子粗提物于西林瓶中，将有机溶剂(乙酸乙酯、乙醇和甲醇)加入到西林瓶，将粗提物完全溶于溶剂，得混悬液1；
59.2)将步骤1)得到的混悬液1，在25
±
5℃条件下，采用磁力搅拌器中以800r
·
min
‑1中搅拌2h；
60.3)将乳化剂(蓖麻油聚氧乙烯醚40、油酸聚氧乙烯酯和十二胺聚氧乙烯醚)加入西林瓶，制成混悬液2；
61.4)将步骤3)得到的混悬液2搅拌均匀；
62.5)最后加入水，在25
±
5℃条件下，采用磁力搅拌器中以800r
·
min
‑1中搅拌2h，即得蛇婆子微乳剂。
63.对比例1
64.在实施例1基础上，将蛇婆子地上部粉碎后过40目筛得到粉状物；将粉碎物用二氯甲烷浸泡提取三天；粉碎物与二氯甲烷的料液比w/w为1：10，然后过滤取清液，用旋转蒸发仪50℃蒸干，将提取液浓缩成膏状，即可得到蛇婆子提取物。重复三次，即得蛇婆子提取物。微乳剂配方以及制备方法与实施例1一致。
65.对比例2
66.在实施例1基础上，微乳剂由以下质量百分比原料制得：蛇婆子提取物5％，有机溶剂15％，乳化剂15％，水65％；有机溶剂选用质量比2：1的乙酸乙酯和乙醇的混合物，乳化剂选用质量比2：1的蓖麻油聚氧乙烯醚40(el
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40)苯乙基苯酚聚氧乙烯醚(601)的混合物。蛇婆子提取物、微乳剂制备方法与实施例1一致。
67.试验例：药效试验
68.1、供试药剂：5％蛇婆子微乳剂。
69.2、供试作物：荔枝(litchi chinensis sonn.)，选自海南省海口市永兴镇火山口荔枝王。
70.3、防治对象：荔枝霜疫霉。
71.4、试验处理方法
72.共设6个处理，空白组(ck，自来水)、试验组1(5％蛇婆子微乳剂，实施例1)、试验组2(5％蛇婆子微乳剂，实施例2)、试验组3(5％蛇婆子微乳剂，实施例3)、试验组4(5％蛇婆子微乳剂，对比例1)、试验组5(5％蛇婆子微乳剂，对比例2)，使用前稀释浓度为500μg/ml。
73.挑选大小一致健康的荔枝分成6组，依次为空白组和试验组1
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5，每组20颗(每组3个重复)。将荔枝放入荔枝霜疫霉病菌液中浸泡3分钟后放入封闭容器中，果实表层铺一层蘸有菌液的棉花，6h后去掉棉花。并用上述相应药剂进行充分涂抹荔枝。处理后置于24℃培养箱中，2d后记录果实发病面积。并根据病情指数计算防治效果。
74.荔枝霜疫霉病情分级标准：
75.0级：果实表皮无病斑；
76.1级：有零星病斑，占果实面积的10％以下；
77.2级：有少量病斑，占果实面积的10％～25％；
78.3级：有中量病斑，占果实面积的25％～50％；
79.4级：有大量病斑，占果实面积的50％以上。
80.防治效果(％)＝(空白对照病情指数－处理病情指数)/空白对照病情指数
×
100％
81.6、结果与分析：
82.各处理防治荔枝霜疫霉防效结果如表1，在蛇婆子微乳剂500μg/ml条件下，蛇婆子微乳剂对荔枝霜疫霉的防效达到94％以上，蛇婆子微乳剂对荔枝霜疫霉具有良好的防治效果，有效抑制荔枝霜疫霉病害恶化。
83.表1防治荔枝霜疫霉防效结果
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以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。