一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法与流程

1.本发明属于菌类培育技术领域，尤其涉及一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法。


背景技术：

2.杏鲍菇菌肉肥厚，质地脆嫩，特别是菌柄组织致密、结实、乳白，可全部食用，且菌柄比菌盖更脆滑、爽口，被称为“平菇王”、“干贝菇”，具有愉快的杏仁香味和如鲍鱼的口感，适合保鲜、加工，深得人们的喜爱。
3.营养学专家经过反复实验得出，人体中血硒的含量标准值为0.10mg/kg，低于此值就会发生缺硒症。而中国有29％地区人均含硒量在0.02mg/kg以下，定为极度缺硒地区，有43％的地区人体含硒值在0.03-0.04mg/kg之间，为缺硒地区，换而言之，中国有72％的地区共15个省区受到缺硒的威胁。目前，培育的杏鲍菇含硒量很少，人们不能通过食用杏鲍菇补充硒元素。


技术实现要素：

4.本发明提供一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，旨在解决现有技术存在的问题。
5.本发明是这样实现的，一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，包括以下步骤：
6.s1、制备活化培养基：按照质量分数计称取如下原料：马铃薯18～20份、葡萄糖1～2份、琼脂1.5～3份、蒸馏水80～120份；
7.首先将马铃薯切成小块，加水煮烂，然后过滤、加热，接着添加琼脂，继续加热搅拌混匀，待琼脂溶解完后，加入葡萄糖，搅拌均匀，冷却5～10min后再将剩余的水全部加入，分装；最后灭菌15～30min后取出试管，冷却后将试管摆斜面贮存备用；
8.s2、活化杏鲍菇菌种：将杏鲍菇菌种转接到试管培养基的斜面，并放置在20～30℃恒温培养环境中，培养8～12天，获得斜面菌种；
9.s3、制备种子液培养基：按质量称取如下原料：马铃薯200～240g、蛋白胨4～5g、琼脂2～4g、kh2po40.8～1.2g、mgso40.4～0.6g、cacl20.2～0.4g；将上述原料均匀混合，加水至1l，灭菌处理20～35min；获得种子液培养基；
10.s4、制备杏鲍菇种子液：将斜面菌种切碎，并接种到种子液培养基中，培养6～10天后，振荡摇匀，获得杏鲍菇种子液；
11.s5、杏鲍菇液体发酵：将杏鲍菇种子液按照12～15％的接种量，接种到250ml液体发酵培养基，振荡培养6～8天，获得杏鲍菇发酵液；
12.s6、制备富硒发酵培养基：按质量称取如下原料：花生粕35～40g、玉米粉15～20g、糙米粉10～15g、红糖35～40g、kh2po45～6g、mgso43～5g、蛋白胨3～4g、富硒酵母粉3～4g、na2seo30.02～0.04g；将上述原料均匀混合，加水至1l，装入发酵罐中；
13.s7、液体富硒发酵杏鲍菇：按照12～15％的接种量将杏鲍菇发酵液从接种口接入
发酵罐内；发酵培养6～8天，获得富硒杏鲍菇菌种。
14.优选的，所述种子液培养基的制备方法包括以下步骤：
15.按照质量称取如下原料：按照质量称取如下原料：马铃薯200g、蛋白胨4g、琼脂2g、kh2po40.8～1.2g、mgso40.4g、cacl20.2g；将上述原料均匀混合，加水至1l，灭菌处理20～35min；获得种子液培养基。
16.优选的，在步骤s3中，灭菌温度均为115～122℃。
17.优选的，在步骤s7中，发酵参数为：发酵温度为22～24℃、搅拌机转速120～130r/min。
18.优选的，在步骤s7中，发酵参数为：在前3～4天，通气量为1：1(v/v/min)；后4～5天通气量为1:0.5(v/v/min)。
19.优选的，在步骤s7中，当杏鲍菇子实体的菌盖平展，表面微现绒毛，且孢子尚未弹射时是收获富硒杏鲍菇的时期。
20.与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明的一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，通过依次制备活化培养基、活化杏鲍菇菌种、制备种子液培养基、制备杏鲍菇种子液、杏鲍菇液体发酵、制备富硒发酵培养基和液体富硒发酵杏鲍菇，从而获得富硒杏鲍菇菌种，本发明可以把无机硒变成具有生物活性有机硒，本发明的方法步骤简单、容易操作，且富硒效果明显。
附图说明
21.图1为本发明的一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法的流程示意图。
具体实施方式
22.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
23.实施例1
24.请参阅图1，本实施例提供一种技术方案：一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，包括以下步骤：
25.s1、制备活化培养基：按照质量分数计称取如下原料：马铃薯190g、葡萄糖15g、琼脂20g、蒸馏水1000g。
26.首先将马铃薯切成小块，加水煮烂，然后过滤、加热，接着添加琼脂，继续加热搅拌混匀，待琼脂溶解完后，加入葡萄糖，搅拌均匀，冷却5～10min后再将剩余的水全部加入，分装；最后灭菌15～30min后取出试管，冷却后将试管摆斜面贮存备用；
27.s2、活化杏鲍菇菌种：将杏鲍菇菌种转接到试管培养基的斜面，并放置在20～30℃恒温培养环境中，培养8～12天，获得斜面菌种；
28.s3、制备种子液培养基：按质量称取如下原料：马铃薯200g、蛋白胨4g、琼脂2g、kh2po40.8g、mgso40.4g、cacl20.2g；将上述原料均匀混合，加水至1l，灭菌处理20～35min；获得种子液培养基，灭菌温度为115～122℃；
29.s4、制备杏鲍菇种子液：将斜面菌种切碎，并接种到种子液培养基中，培养6～10天
后，振荡摇匀，获得杏鲍菇种子液；
30.s5、杏鲍菇液体发酵：将杏鲍菇种子液按照12～15％的接种量，接种到250ml液体发酵培养基，振荡培养6～8天，获得杏鲍菇发酵液；
31.s6、制备富硒发酵培养基：按质量称取如下原料：花生粕35g、玉米粉15g、糙米粉10g、红糖35g、kh2po45g、mgso43g、蛋白胨3g、富硒酵母粉3g、na2seo30.02g；将上述原料均匀混合，加水至1l，灭菌后装入发酵罐中，灭菌温度为115～122℃；
32.s7、液体富硒发酵杏鲍菇：按照12～15％的接种量将杏鲍菇发酵液从接种口接入发酵罐内；发酵培养6～8天，获得富硒杏鲍菇菌种。发酵参数为：发酵温度为22～24℃、搅拌机转速120～130r/min；在前3～4天，通气量为1：1(v/v/min)；后4～5天通气量为1:0.5(v/v/min)。
33.当杏鲍菇子实体的菌盖平展，表面微现绒毛，且孢子尚未弹射时是收获富硒杏鲍菇的时期。
34.实施例2
35.请参阅图1，本实施例提供一种技术方案：一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，包括以下步骤：
36.s1、制备活化培养基：按照质量分数计称取如下原料：马铃薯200g、葡萄糖15g、琼脂20g、蒸馏水1000g。
37.首先将马铃薯切成小块，加水煮烂，然后过滤、加热，接着添加琼脂，继续加热搅拌混匀，待琼脂溶解完后，加入葡萄糖，搅拌均匀，冷却5～10min后再将剩余的水全部加入，分装；最后灭菌15～30min后取出试管，冷却后将试管摆斜面贮存备用；
38.s2、活化杏鲍菇菌种：将杏鲍菇菌种转接到试管培养基的斜面，并放置在20～30℃恒温培养环境中，培养8～12天，获得斜面菌种；
39.s3、制备种子液培养基：按质量称取如下原料：马铃薯240g、蛋白胨5g、琼脂4g、kh2po41.2g、mgso40.6g、cacl20.4g；将上述原料均匀混合，加水至1l，灭菌处理20～35min；获得种子液培养基，灭菌温度为115～122℃；
40.s4、制备杏鲍菇种子液：将斜面菌种切碎，并接种到种子液培养基中，培养6～10天后，振荡摇匀，获得杏鲍菇种子液；
41.s5、杏鲍菇液体发酵：将杏鲍菇种子液按照12～15％的接种量，接种到250ml液体发酵培养基，振荡培养6～8天，获得杏鲍菇发酵液；
42.s6、制备富硒发酵培养基：按质量称取如下原料：花生粕35g、玉米粉15g、糙米粉10g、红糖35g、kh2po45g、mgso43g、蛋白胨3g、富硒酵母粉3g、na2seo30.02g；将上述原料均匀混合，加水至1l，灭菌后装入发酵罐中，灭菌温度为115～122℃；
43.s7、液体富硒发酵杏鲍菇：按照12～15％的接种量将杏鲍菇发酵液从接种口接入发酵罐内；发酵培养6～8天，获得富硒杏鲍菇菌种。发酵参数为：发酵温度为22～24℃、搅拌机转速120～130r/min；在前3～4天，通气量为1：1(v/v/min)；后4～5天通气量为1:0.5(v/v/min)。
44.当杏鲍菇子实体的菌盖平展，表面微现绒毛，且孢子尚未弹射时是收获富硒杏鲍菇的时期。
45.实施例3
46.请参阅图1，本实施例提供一种技术方案：一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，包括以下步骤：
47.s1、制备活化培养基：按照质量分数计称取如下原料：马铃薯200g、葡萄糖15g、琼脂20g、蒸馏水1000g。
48.首先将马铃薯切成小块，加水煮烂，然后过滤、加热，接着添加琼脂，继续加热搅拌混匀，待琼脂溶解完后，加入葡萄糖，搅拌均匀，冷却5～10min后再将剩余的水全部加入，分装；最后灭菌15～30min后取出试管，冷却后将试管摆斜面贮存备用；
49.s2、活化杏鲍菇菌种：将杏鲍菇菌种转接到试管培养基的斜面，并放置在20～30℃恒温培养环境中，培养8～12天，获得斜面菌种；
50.s3、制备种子液培养基：按质量称取如下原料：马铃薯220g、蛋白胨4.5g、琼脂3g、kh2po41g、mgso40.5g、cacl20.3g；将上述原料均匀混合，加水至1l，灭菌处理20～35min；获得种子液培养基，灭菌温度为115～122℃；
51.s4、制备杏鲍菇种子液：将斜面菌种切碎，并接种到种子液培养基中，培养6～10天后，振荡摇匀，获得杏鲍菇种子液；
52.s5、杏鲍菇液体发酵：将杏鲍菇种子液按照12～15％的接种量，接种到250ml液体发酵培养基，振荡培养6～8天，获得杏鲍菇发酵液；
53.s6、制备富硒发酵培养基：按质量称取如下原料：花生粕35g、玉米粉15g、糙米粉15g、红糖40g、kh2po46g、mgso43g、蛋白胨3g、富硒酵母粉4g、na2seo30.04g；将上述原料均匀混合，加水至1l，灭菌后装入发酵罐中，灭菌温度为115～122℃；
54.s7、液体富硒发酵杏鲍菇：按照12～15％的接种量将杏鲍菇发酵液从接种口接入发酵罐内；发酵培养6～8天，获得富硒杏鲍菇菌种。发酵参数为：发酵温度为22～24℃、搅拌机转速120～130r/min；在前3～4天，通气量为1：1(v/v/min)；后4～5天通气量为1:0.5(v/v/min)。
55.当杏鲍菇子实体的菌盖平展，表面微现绒毛，且孢子尚未弹射时是收获富硒杏鲍菇的时期。
56.实施例4
57.请参阅图1，本实施例提供一种技术方案：一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，包括以下步骤：
58.s1、制备活化培养基：按照质量分数计称取如下原料：马铃薯200g、葡萄糖15g、琼脂20g、蒸馏水1000g。
59.首先将马铃薯切成小块，加水煮烂，然后过滤、加热，接着添加琼脂，继续加热搅拌混匀，待琼脂溶解完后，加入葡萄糖，搅拌均匀，冷却5～10min后再将剩余的水全部加入，分装；最后灭菌15～30min后取出试管，冷却后将试管摆斜面贮存备用；
60.s2、活化杏鲍菇菌种：将杏鲍菇菌种转接到试管培养基的斜面，并放置在20～30℃恒温培养环境中，培养8～12天，获得斜面菌种；
61.s3、制备种子液培养基：按质量称取如下原料：马铃薯220g、蛋白胨4.5g、琼脂3g、kh2po41g、mgso40.5g、cacl20.3g；将上述原料均匀混合，加水至1l，灭菌处理20～35min；获得种子液培养基，灭菌温度为115～122℃；
62.s4、制备杏鲍菇种子液：将斜面菌种切碎，并接种到种子液培养基中，培养6～10天
后，振荡摇匀，获得杏鲍菇种子液；
63.s5、杏鲍菇液体发酵：将杏鲍菇种子液按照12～15％的接种量，接种到250ml液体发酵培养基，振荡培养6～8天，获得杏鲍菇发酵液；
64.s6、制备富硒发酵培养基：按质量称取如下原料：花生40g、玉米粉18g、糙米粉12g、红糖38g、kh2po45.5g、mgso44g、蛋白胨3.5g、富硒酵母粉3.5g、na2seo30.04g；将上述原料均匀混合，加水至1l，灭菌后装入发酵罐中，灭菌温度为115～122℃；
65.s7、液体富硒发酵杏鲍菇：按照12～15％的接种量将杏鲍菇发酵液从接种口接入发酵罐内；发酵培养6～8天，获得富硒杏鲍菇菌种。发酵参数为：发酵温度为22～24℃、搅拌机转速120～130r/min；在前3～4天，通气量为1：1(v/v/min)；后4～5天通气量为1:0.5(v/v/min)。
66.当杏鲍菇子实体的菌盖平展，表面微现绒毛，且孢子尚未弹射时是收获富硒杏鲍菇的时期。
67.本发明的一种液态发酵生产富硒杏鲍菇菌种的方法，通过依次制备活化培养基、活化杏鲍菇菌种、制备种子液培养基、制备杏鲍菇种子液、杏鲍菇液体发酵、制备富硒发酵培养基和液体富硒发酵杏鲍菇，从而获得富硒杏鲍菇菌种，本发明可以把无机硒变成具有生物活性有机硒，本发明的方法步骤简单、容易操作，且富硒效果明显。
68.以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。