一种耐硒浮萍的养殖方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物技术领域，尤其是指一种浮萍的养殖方法。
【背景技术】
[0002] 硒是人体和其他哺乳动物必需微量元素之一。研宄证明硒具有保护生物膜、清除 自由基、抗癌、抗衰老、增进免疫力等重要的生理功能。硒（主要是亚硒酸钠）能防治多种 疾病，如克山病、大骨节病、肿瘤、心血管疾病等。目前世界上有许多个国家缺硒。我国有22 个省、市、自治区的部分或大部分地区缺硒，因此人工补硒具有重要的现实意义。硒盐的毒 理分析表明，无机硒均为剧毒，使用范围和剂量受到限制。许多研宄表明，有机硒化合物 毒性低于无机硒化合物，且吸收效率更高。另外，有机硒在激发免疫反应、抑制肺癌方面 也较无机硒化合物效果显著。目前国内尚不能人工合成有机硒，因而利用生物技术来获取 有机硒有食用和保健价值。市场上多种含硒、富硒的产品相继问世，如富硒酵母、富硒蘑菇、 富硒多糖、富硒茶等，但是这些产品存在硒含量低或成本高等问题。
[0003] 浮萍的生物质主要包含蛋白质、糖类、脂类、粗纤维和矿物质。浮萍具有非常广泛 的应用前景，设计领域包括动物饲料、生物制品、生物燃料、富营养化废水处理等。浮萍生长 速度快，易于大规模培养，若能使浮萍富集一定浓度的硒，并制作成含硒产品，将具有优异 的应用价值。
【发明内容】
[0004] 为解决现有技术问题，本发明提供一种耐硒浮萍的养殖方法，包括如下步骤：
[0005] 将浮萍（Landoltiapunctata)母株置入含硒培养基中，20?25°C下在光生物反应 器中光照12?16小时/天进行培养；其中，所述含硒培养基中硒的物质的量浓度不高于 160ymol/L〇
[0006] 进一步地，所述含硒培养基中还包括：水、2. 46g/L的MgSO4 ? 7H20、54. 28g/ L的Ca(NO3)2 ? 4H20、0. 68g/L的KH2P04、2. 525g/L的KN03、2. 86g/L的H3BO3U. 82g/L的 MnCl2 ? 4H20、0. 22g/L的ZnSO4 ? 7H20、0. 09g/L的Na2MoO4 ? 2H20、0. 09g/L的CuSO4 ? 5H20、 20.OmL/L的Fe-EDTA;其中，所述Fe-EDTA是由 0? 121g/250mL的FeCl3 ? 6H20 和 0? 375g/250mL的EDTA配制获得。
[0007] 进一步地，所述光照强度为3000?5000Lux。
[0008] 进一步地，所述浮萍母株来自经过预处理后的野生浮萍；所述浮萍母株的种植密 度为10株。
[0009] 进一步地，所述耐硒浮萍的养殖期为4?8天。
[0010] 进一步地，控制所述耐硒浮萍的养殖期内含硒培养基的pH在5. 8?6之间。
[0011] 进一步地，所述硒来自水溶性亚硒酸盐或硒酸盐。
[0012] 有益效果：本发明选用浮萍作为富硒的载体，并配合合适的培养基，使得浮萍在培 养基增殖过程中吸收亚硒酸钠盐效率高，将无机硒转化为有机硒的能力强，对低浓度硒具 有十分显著的富集效应，避免了增加高硒所造成的浪费，降低了富硒浮萍的成本，而且对环 境绿色友好，这种优越性是十分显著的。同时，在本发明培养基中生长，各种元素能完全满 足浮萍生长需要，简化了养殖配方，节省大量营养盐，降低了成本。富硒后的耐硒浮萍提高 了浮萍的经济价值及应用范围
【具体实施方式】
[0013] 本发明提供一种浮萍富硒培养方法，包括如下步骤：选择野外采集的浮萍 (Landoltiapunctata)作为母株；然后以人工淡水为基础，然后加入硒元素，硒元素的物质 的量浓度不高于160ymol/L，以此作为含硒培养基将所述母株接种至含有所述培养基的光 生物反应器中进行培养，最后对培养好的浮萍进行收集得到耐硒浮萍。其中，所述野外采 集的浮萍优先进过实验室的筛选和预培养，使由野外生长环境向室内生长环境的适应性转 变。
[0014] 所述含硒培养基的配制分两步进行：
[0015]首先，配制人工淡水培养基，即采用：MgSO4 .7H20 2. 46g/L、Ca(NO3)2 .44054. 28g/ L、KH2PO4O. 68g/L、KN032. 525g/L、H3B032. 86g/L、MnCl2 ? 4H20I. 82g/L、ZnSO4 ? 7H20 0? 22g/ L、Na2MoO4 ? 2H20 0? 09g/L、CuSO4 ? 5H20 0? 09g/L、20.OmL/LFe-EDTA(其中，所述Fe-EDTA 来自0. 121g/250mLFeCl3 ? 6H20, 0. 375g/250mLEDTA加水后配制获得），将上述组分混合 均匀溶解在水中，配成溶液，即为人工淡水培养基。
[0016] 然后，以硒化合物的形式加入硒元素。所述的含硒化合物优选为亚硒酸盐或硒酸 盐，所述的亚硒酸盐进一步优选为亚硒酸钠或亚硒酸钾。本实施例中，具体是在300ml的 培养盆中加入80ml的人工淡水培养基，再加入不同体积浓度为luM/L的亚硒酸钠水溶液， 获得不同浓度的含硒培养基（参见表1所示），最后补加人工淡水培养基使其总体积达到 100ml，即为养殖浮萍用的含硒培养基。
[0017] 将经过实验室筛选与预培养的浮萍，接种至含有培养基的光生物反应器中进行培 养，种植密度为10株。其培养条件优选为温度20?25°C，光照强度3000?5000LUX，光 照12?16h/天，4?8天养殖期。其中，在所述养殖期内，控制含硒培养基的pH为5. 8? 6. 0〇
[0018] 下面，通过不同实施例获得不同含硒量的浮萍产品（每个实施例做三次平行实 验），具体参数参见表1所示：
[0019] 表1不同实施例获得不同含硒量的浮萍产品
[0020]
【主权项】
1. 一种耐硒浮萍的养殖方法，其特征在于，包括如下步骤： 将浮萍母株置入含硒培养基中，20?25°C下在光生物反应器中光照12?16小时/天 进行培养；其中，所述含硒培养基中硒的物质的量浓度不高于160ymol/L。
2. 根据权利要求1所述耐硒浮萍的养殖方法，其特征在于，所述含硒培养基中还包括： A、2.46g/lJ9MgS04.7H20、54.28g/lJ9Ca(N03)2.4H20、0.68g/lJ9KH2P04、2.525g/lJ9KN03、 2. 86g/L的H3B03、I. 82g/L的MnCl2 .4H20、0. 22g/L的ZnSO4.7H20、0. 09g/L的Na2MoO4.2H20、 0? 09g/L的CuSO4 ? 5H20、20.OmL/L的Fe-EDTA;其中，所述Fe-EDTA是由 0? 121g/250mL的 FeCl3 ? 6H20 和 0? 375g/250mL的EDTA配制获得。
3. 根据权利要求1或2所述耐硒浮萍的养殖方法，其特征在于，所述含硒培养基中硒的 物质的量浓度为20?40ym〇l/L〇
4. 根据权利要求1或2所述耐硒浮萍的养殖方法，其特征在于，所述硒来自水溶性亚硒 酸盐或硒酸盐。
5. 根据权利要求1或2所述耐硒浮萍的养殖方法，其特征在于，所述光照强度为 3000 ?5000Lux〇
6. 根据权利要求1或2所述耐硒浮萍的养殖方法，其特征在于，所述浮萍母株来自经过 预处理后的野生浮萍。
7. 根据权利要求1或2所述耐硒浮萍的养殖方法，其特征在于，所述耐硒浮萍的养殖期 为4?8天。
8. 根据权利要求6所述耐硒浮萍的养殖方法，其特征在于，控制所述耐硒浮萍的养殖 期内含硒培养基的pH在5. 8?6之间。
【专利摘要】本发明涉及生物技术领域，尤其是提供一种耐硒浮萍的养殖方法，包括如下步骤：以野外采集经过实验室预培养的浮萍(Landoltia？punctata)为母株，置入含硒培养基中，20～25℃下在光生物反应器中光照12～16h/天进行培养；其中，所述含硒培养基中硒的物质的量浓度不高于160μmol/L。本发明选用经过实验室预培养与筛选的浮萍作为富硒的载体，具有更好的适应强光、高温和高硒等优良特性；浮萍在增殖过程中吸收亚硒酸钠盐效率高，转化能力强，对低浓度硒具有十分显著的富集效应。
【IPC分类】A01G31-00, A01G1-00, C05G1-00
【公开号】CN104541897
【申请号】CN201510027050
【发明人】钟钰, 张善发, 成家杨
【申请人】北京大学深圳研究生院
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2015年1月20日