一种药蜀葵的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明属于植物快繁技术领域，具体涉及一种药蜀葵的快速繁殖方法。
【背景技术】
[0002]药蜀葵，锦葵科蜀葵属，多年生直立草本，高I米左右。茎密被星状长糙毛。托叶小，条形状，长约0.5厘米；叶柄长I?4厘米，密生星状绒毛；叶片卵圆形或宽卵形，通常不分裂，少数3浅裂，长3?8厘米，宽1.5?6厘米，基部近心形至圆形，先端钝尖，边缘具圆锯齿，两面密被星状绒毛；总苞的小苞片9枚，披针形，长4毫米，密被星状糙毛；萼杯状，宿存，5裂，裂片披针形，较苞片为长，密被星状糙毛；花冠直径约2.5厘米，淡红色，花瓣5枚，长约1.5厘米，倒卵状长圆形；雄蕊柱长8毫米，花丝连合成筒；心皮多数。果圆肾形，直径约8毫米，外包以宿存萼，被短柔毛，分果另多数，花期6?8月，果期8?9月。药用部位主要为根部，含粘液质、果胶质、淀粉和糖类，具有解表散寒、利尿、止咳、消炎解毒之功。所以药蜀葵的种植业近几年发展得很快，但药蜀葵的种子很难得到、发芽率又不高且种植周期长，而传统的扦插繁殖又使得病毒积累严重，病毒已成为药蜀葵种性退化、产量下降、药用价值变劣的重要原因。因此近几年，药蜀葵的组织培养技术得到迅速发展，主要集中在利用葛根的根来诱导形成愈伤组织，国内外研宄表明以药蜀葵的根、茎为外植体，都可以产生愈伤组织，且每种组织愈伤组织生长周期不一样，分化率也不一样，普遍认为茎杆的诱导分化率不高，西北农林科技大学的研宄人员发现药蜀葵的根为诱导愈伤组织的最适宜外植体。另外，前人还研宄了不同激素以及不同激素组合对药蜀葵各部分诱导分化的影响，结果发现诱导及生根率都极低。还有部分研宄人员采用茎尖脱毒技术，研宄了茎尖分生组织诱导愈伤组织，并且对组织培养的最适培养基进行了研宄。他们以药蜀葵的根切取大小
0.3-0.5_分生组织为外植体，通过诱导、继代、分化和生根培养，得到了生有少量侧根的组培苗，同时他们也对不同浓度的激素组合的影响作了研宄，得到了最佳的激素组合浓度，但对此，不同的研宄人员的研宄结果差别很大，再者这种方法周期较长，不适合工业化种植和生产，因而此方法也受到限制。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是在于提供了一种药蜀葵的快速繁殖方法，方法易行，操作简便，不受季节限制，从获取外植体到成苗所需时间短，大大缩短了药蜀葵无菌苗的组培周期，减少了实验和种植成本，且幼苗的质量好，成活率高，效率可到90%左右，可满足工业化种植的需求。
[0004]为了实现上述的目的，本发明采用以下技术措施:
[0005]一种药蜀葵的快速繁殖方法，其步骤是:
[0006]I)以药蜀葵的根茎为外植体。
[0007]2)将药蜀葵根茎用去离子水浸泡1-2小时，用医用酒精(70%体积比)冲洗1-2次，再用双氧水灭菌5-10分钟，最后用去离子水冲洗5-8次。
[0008]3)将处理后的药蜀葵根茎接种到0.8mg/LNAA、0.2mg/L6_BA和100g/L香蕉泥培养基上培养3-4天，然后接种到MS+0.05-0.lmg/L6-BA+0.05-0.lmg/LNAA分化培养基上培养4-5 天。
[0009]4)待幼苗长出，转接到1/2MS+0.1-0.2mg/LNAA的生根培养基上，添加0.8?
1.0mg/Kg 6-苄氨基嘌呤、25?35g/Kg蔗糖和4?6g/Kg琼脂；培养条件为:温度23?25°C，相对湿度75?90%，光照时间10?12小时/天，光照强度3000?5000Lx。
[0010]5)培养5-10天后看到药蜀葵根生出，待根长至3-5厘米，叶片有三片以上时候，取出幼苗，用去离子水清洗3-5次，洗去培养基，最后分根移栽入土中。
[0011]所述步骤I)中药蜀葵的根茎长度大约为0.3?0.5mm。
[0012]所述步骤3)中MS培养基为植物组培培养基，含有无机盐和硝酸盐离子，能满足植物细胞的营养和生理需要，本方法中的各培养基是自制的新鲜培养基。
[0013]所述步骤3)和步骤4)中NAA为萘乙酸，6-BA为6-苄基腺嘌呤，2，4-D为2，4- 二氯苯氧醋酸。
[0014]与现有技术相比，本发明具有以下优点:
[0015]1、采用药蜀葵的根为外植体，不用经过愈伤组织的诱导以及由愈伤再分化出幼芽的步骤，而是由根茎直接发芽，这样大大缩短了育苗周期，减少了生产成本。
[0016]2、采用新型的诱导培养基和生根培养基，效率可到90%左右。
[0017]3、从幼芽分化到生根再到分根栽种，整个周期大约为10天，生产周期短，苗的品质好，成活率高。
【具体实施方式】
[0018]下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。
[0019]实施例1
[0020]一种药蜀葵的快速繁殖方法，包括以下步骤:
[0021]I)以药蜀葵的3mm的根为外植体。
[0022]2)将药蜀葵根茎用去离子水浸泡I小时，用医用酒精(70%体积比)冲洗2次，再用双氧水灭菌5分钟，最后用去离子水冲洗8次。
[0023]3)将处理后的药蜀葵根茎接种到0.8mg/LNAA、0.2mg/L6_BA和100g/L香蕉泥培养基上培养3天，然后接种到MS+0.05-mg/L6-BA+0.05/LNAA分化培养基上培养5天。
[0024]4)待幼苗长出，转接到1/2MS+0.2mg/LNAA的生根培养基上，添加0.8?1.0mg/Kg6-苄氨基嘌呤、35g/Kg蔗糖和6g/Kg琼脂；培养条件为:温度23?25°C，相对湿度75?90%，光照时间10?12小时/天，光照强度3000?5000Lx。
[0025]5)培养5天后看到药蜀葵根生出，待根长至3-5厘米，叶片有三片以上时候，取出幼苗，用去离子水清洗3-5次，洗去培养基，最后分根移栽入土中。
[0026]实施例2
[0027]种药蜀葵的快速繁殖方法，包括以下步骤:
[0028]I)以药蜀葵的5mm的根为外植体。
[0029]2)将药蜀葵根茎用去离子水浸泡2小时，用医用酒精(70%体积比)冲洗I次，再用双氧水灭菌10分钟，最后用去离子水冲洗5次。
[0030]3)将处理后的药蜀葵根茎接种到0.8mg/LNAA、0.2mg/L6_BA和100g/L香蕉泥培养基上培养4天，然后接种到MS+0.lmg/L6-BA+0.05-0.lmg/LNAA分化培养基上培养5天。
[0031]4)待幼苗长出，转接到1/2MS+0.2mg/LNAA的生根培养基上，添加0.1.0mg/Kg6-苄氨基嘌呤、35g/Kg蔗糖和4g/Kg琼脂；培养条件为:温度23?25°C，相对湿度75?90%，光照时间10?12小时/天，光照强度3000?5000Lx。
[0032]5)培养10天后看到药蜀葵根生出，待根长至3-5厘米，叶片有三片以上时候，取出幼苗，用去离子水清洗3-5次，洗去培养基，最后分根移栽入土中。
【主权项】
1.一种药蜀葵的快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤: 1)以药蜀葵的根茎为外植体。 2)将药蜀葵根茎用去离子水浸泡1-2小时，用医用酒精(70%体积比)冲洗1-2次，再用双氧水灭菌5-10分钟，最后用去离子水冲洗5-8次。 3)将处理后的药蜀葵根茎接种到0.8mg/LNAA、0.2mg/L6_BA和100g/L香蕉泥培养基上培养3-4天，然后接种到MS+0.05-0.lmg/L6-BA+0.05-0.lmg/LNAA分化培养基上培养4-5天。 4)待幼苗长出，转接到1/2MS+0.1-0.2mg/LNAA的生根培养基上，添加0.8?1.0mg/Kg6-苄氨基嘌呤、25?35g/Kg蔗糖和4?6g/Kg琼脂；培养条件为:温度23?25°C，相对湿度75?90%，光照时间10?12小时/天，光照强度3000?5000Lx。 5)培养5-10天后看到药蜀葵根生出，待根长至3-5厘米，叶片有三片以上时候，取出幼苗，用去离子水清洗3-5次，洗去培养基，最后分根移栽入土中。
【专利摘要】本发明公开了一种药蜀葵的快速繁殖方法，属于植物快繁技术领域，包括以下步骤：1)以药蜀葵的根为外植体；2)经过浸泡、清洗、消毒；3)将处理后的药蜀葵根茎经过诱导分化培养；4)待幼苗长出，经过生根培养；5)最后分根移栽。本发明解决了目前育苗周期长，生产成本高的问题，效率可到90％左右，苗的品质好，成活率高，适合大规模推广种植。
【IPC分类】A01H4-00
【公开号】CN104604679
【申请号】CN201510014733
【发明人】史萌, 史志辉, 张天
【申请人】陕西辉胜新兴农业科技发展有限公司
【公开日】2015年5月13日
【申请日】2015年1月13日