一种太子参离体快繁技术的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种太子参离体快繁技术。
【背景技术】
[0002]太子参又名孩儿参，是石竹科多年生草本植物，传统的中医常用药物，具有益气健脾、生津润肺、增强免疫功能、抗疲劳、抗应激、延长寿命、清除超氧自由基等功效，也常用于糖尿病、冠心病、肝炎等病症治疗。此外，太子参还具有一定的观赏价值。其近地面的花较小，花梗呈紫色且有短柔毛，萼片背面呈紫色，边缘白色而呈薄膜质，无花瓣，而茎顶上的花大而呈白色，盆栽种植无疑是家庭绿化装饰的良好选择。
[0003]目前，市场上对太子参的需求量日益增大。长期以来，太子参以块根进行无性繁殖，导致体内积累了大量病毒，严重影响其产量。此外，受生态环境等多方面因素的影响，太子参品种单一、繁殖系数低、种性退化、产量下降、品质变逆等问题也日益突出，难以满足国内外强大的市场需求。因此，通过植物组织培养技术获得无菌植株并建立一套完整的优质种苗繁育体系已经成为当务之急。本发明以太子参带腋芽茎段为外植体，通过外植体消毒、诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程成功获得了太子参离体再植株，建立太子参组织培养快速繁殖技术体系，以促进太子参产业长效、稳定发展。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于提供出一种太子参离体快繁技术，本发明以太子参带腋芽茎段为外植体，通过外植体消毒、诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程成功获得了太子参离体再植株，建立太子参组织培养快速繁殖技术体系，从而实现了本发明的目的。
[0005]本发明的一种太子参离体快繁技术，包括以下的步骤:
Cl)外植体消毒:取2cm带顶端的茎置于烧杯中，用3%?5%洗衣粉溶液浸泡10?30min,再用自来水以滴水的形式冲洗60?90min。在无菌条件下，以70%?80%乙醇溶液浸泡20s?60s,无菌水冲洗4?6次,再用0.1%?0.5%升萊溶液消毒5?15min,然后用无菌水冲洗外植体至无泡沫为止。用无菌滤纸吸干表面的水分后备用。
[0006](2)丛生芽的诱导:剪取步骤(I)获得的外植体的Icm左右的茎段(带有茎节)并接种到诱导培养基进行诱导培养。接种后置于每天光照12?14小时，光照强度为2000?30001x,置于培养温度为25?28°C，空气相对湿度为75%?80%的条件下培养30天后统计诱导情况。
[0007](3)增殖培养:将步骤(2)诱导培养得到的丛生芽切成0.5cm大的小块并接种至增殖培养基进行继代培养。接种后置于每天光照12?14小时，光照强度为2000?30001x，置于培养温度为25?28°C，空气相对湿度为75%?80%的条件下培养45天后统计增殖情况。
[0008](4)生根培养:从基部切取步骤(3)增殖培养中获的植株并以垂直方式插入至生根培养基中进行诱导生根。接种后置于每天光照12?14小时，光照强度为2000?30001x，置于培养温度为25?28°C，空气相对湿度为75%?80%的条件下培养30天后统计生根情况。
[0009](5)炼苗移栽:将生根培养基上获得的具备移栽条件的瓶苗进行炼苗，瓶苗移至常温下4?5天后，打开瓶盖2?3天，然后洗去附着于苗根系上的培养基，移栽至盛有由泥炭土:蛭石=1:1组成的移栽培养基质的容器袋中进行培养，移栽前5天用0.3%?0.5%高猛酸钾溶液对基质喷淋消毒并加盖薄膜，3天后打开薄膜，翻动基质，移栽前I天将基质淋透水。移栽时需将基质压实，并进行单株套袋，早晚喷雾，保证生长环境潮湿。移栽7天后剪去塑料袋两角，14天后完全脱袋，移栽30天后统计成活率。
[0010]上述步骤(2)所述的诱导培养基为:MS+0.1?1.0mg/L NAA+1.0?3.0mg/L6-BA+15 ?30g/L 蔗糖 +3.5 ?6.0g/L 琼脂，pH 为 5.4 ?5.8。
[0011]上述步骤(3)所述的增殖培养基为:MS+1.0?3.0mg/L 6-BA+0.1?1.0mg/LIBA+15 ?30g/L 蔗糖 +3.5 ?6.0g/L 琼脂，pH 为 5.4 ?5.8。
[0012]上述步骤(4)所述的生根培养基为:MS+1.0?3.0mg/L ΑΒΤ5+0.I?1.0mg/LNAA+15 ?30g/L 蔗糖 +3.5 ?6.0g/L 琼脂，pH 为 5.4 ?5.8。
[0013]本发明的优点是:太子参是传统的中医常用药物，太子参品种单一、繁殖系数低、种性退化、产量下降、品质变逆等问题也日益突出，难以满足国内外强大的市场需求。通过植物组织培养技术获得无菌植株并建立一套完整的优质种苗繁育体系已经成为当务之急。以太子参带腋芽茎段为外植体，通过外植体消毒、诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程成功获得了太子参离体再植株，建立太子参组织培养快速繁殖技术体系，以促进太子参产业长效、稳定发展。
【具体实施方式】
[0014]以下实施例是对本发明的进一步说明，不是对本发明的限制。
[0015]实施例1
(I)外植体消毒:取2cm带顶端的茎置于烧杯中，用3%洗衣粉溶液浸泡lOmin，再用自来水以滴水的形式冲洗60min。在无菌条件下，以70%乙醇溶液浸泡60s，无菌水冲洗4次，再用0.1%升汞溶液消毒5min，然后用无菌水冲洗外植体至无泡沫为止。用无菌滤纸吸干表面的水分后备用。
[0016](2)丛生芽的诱导:剪取步骤(I)获得的外植体的Icm左右的茎段(带有茎节)并接种到诱导培养基进行诱导培养。接种后置于每天光照13小时，光照强度为20001χ，置于培养温度为25°C，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后诱导率为86.7%。所述的诱导培养基为:MS+0.6mg/L NAA+1.5mg/L 6_BA+18g/L 蔗糖 +5.0g/L 琼脂，pH 为 5.5。
[0017](3)增殖培养:将步骤(2)诱导培养得到的丛生芽切成0.5cm大的小块并接种至增殖培养基进行继代培养。接种后置于每天光照13小时，光照强度为20001χ，置于培养温度为25°C，空气相对湿度为75%的条件下培养45天后增殖系数为9.3。所述的增殖培养基为:MS+2.5mg/L 6-BA+0.3mg/L IBA+30g/L 蔗糖 +6.0g/L 琼脂，pH 为 5.5。
[0018](4)生根培养:从基部切取步骤(3)增殖培养中获的植株并以垂直方式插入至生根培养基中进行诱导生根。接种后置于每天光照12小时，光照强度为20001χ，置于培养温度为25°C，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后生根率为100%，平均生根数达到4.5条。所述的生根培养基为:MS