含中生菌素的生物杀菌组合物及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种含中生菌素的生物杀菌组合物及其应用，于生物农药防治技术领 域。
【背景技术】
[0002] 目前，化学防治是控制日益严重的植物病害的重要措施，具有见效快、杀菌谱广、 成本低、使用简便等优点，对保障农业生产发挥了重要作用，但化学杀菌剂的长期大量使用 导致农药抗药性、农药残留、环境污染、农产品安全等一系列严重的生态问题和社会问题。 近年来，随着人们对农产品的质量安全及环境污染问题的关注，化学杀菌剂的使用受到越 来越严格的限制。因此，人们开始更多的着眼于更低毒、环保、无污染的生物源农药。生物源 农药是利用微生物之间的拮抗性质来防治病原菌，这比现有的化学农药更高效和环保。目 前，开发生物源农药新品种以及复配制剂越来越受到人们的重视。
[0003] 中生菌素是一种新型农用抗生素，其杀菌谱广，对农作物的细菌性病害及真菌性 病害均具有较好的防效，能够抑制细菌菌体蛋白质的合成，导致菌体死亡；对真菌孢子萌发 有强烈的抑制作用，引起菌丝细胞内原生质凝聚，改变丝状菌丝的形态。
[0004] 申嗪霉素是由荧光假单胞菌经生物培养分泌的一种抗菌素，主要成分是吩 嘆-1-羧酸（phenazine-1-carboxylic acid)，同时具有广谱抑制植物病原菌并促进植物 生长作用的双重功能，该生物杀菌剂具有广谱、高效的特点，能有效防治水稻、小麦、蔬菜、 果树等作物上的枯萎病、蔓枯病、疫病、纹枯病、稻曲病、稻瘟病、霜霉病、条锈病、菌核病、赤 霉病、炭疽病、灰霉病、黑星病、叶斑病、青枯病、溃疡病、姜瘟病及土传病害土壤处理。
[0005] 在农业生产的实际过程中，长期连续单一的使用一种药剂，病原菌很快就会产生 抗药性，导致防效降低，农药使用量增加，加剧农产品农药残留和生态环境的破坏。通过与 作用机理完全不同的杀菌剂品种进行复配，是延缓病原菌产生抗药性，扩大杀菌谱，延长使 用寿命，降低农药使用量的有效途径。
[0006] 现有技术中，尚未见有关于中生菌素与申嗪霉素复配及应用的相关报道。
【发明内容】
[0007] 针对上述现有技术，本发明提供了一种含中生菌素的生物杀菌组合物，其有效成 分为中生菌素和申嗪霉素，均为生物源农药，中生菌素、申嗪霉素作用机理完全不同，复配 可对病原菌多位点作用，扩大杀菌谱，提高防效，降低农药使用量，延缓抗药性的产生。本发 明还提供了该含中生菌素的生物杀菌组合物的应用。
[0008] 本发明是通过以下技术方案实现的：
[0009] -种含中生菌素的生物杀菌组合物，有效成分为中生菌素和申嗪霉素，中生菌素 与申嗪霉素的重量比为1:1~35,优选的，为1:5~30。
[0010] 所述含中生菌素的生物杀菌组合物中，可以含有农药学中允许使用和可以接受的 辅料。 toon] 进一步地，所述含中生菌素的生物杀菌组合物是由以下重量份的组分组成的：中 生菌素1 %~80%，申嗪霉素1 %~80%，余量为农药学中允许使用和可以接受的辅料。
[0012] 所述农药学中允许使用和可以接受的辅料选自溶剂、分散剂、乳化剂、稳定剂、润 湿剂、消泡剂等及其它有助于有效成分药效的稳定和发挥的允许使用助剂。
[0013] 所述含中生菌素的生物杀菌组合物，可以用现有技术中已知的加工方法制备成适 合农业生产使用的任意一种剂型，优选剂型为：可湿性粉剂、悬浮剂、乳油、水乳剂、水分散 粒剂、微乳剂。
[0014] 本发明的含中生菌素的生物杀菌组合物，用于防治果树、蔬菜上的多种病害，尤其 适用于果树根癌病、姜瘟病、根腐病等土传真菌性、细菌性病害，同时可防治水稻纹枯病、葡 萄霜霉病、苹果斑点落叶病等多种作物和果树病害。优选的，在防治果树根癌病时，中生菌 素与申嗪霉素二者的重量比以1:1~35为佳，1:5~25更佳，1:10最佳。在防治姜瘟病时， 中生菌素与申嗪霉素二者的重量比以1:1~35为佳，1:10~30更佳，1:20最佳。在防治 根腐病时，中生菌素与申嗪霉素二者的重量比以1:10~20为佳，1:10~15更佳，1:10最 佳。在防治苹果斑点落叶病时，中生菌素与申嗪霉素二者的重量比以1:1~15为佳，1:5~ 15更佳，1:15最佳。在防治水稻纹枯病时，中生菌素与申嗪霉素二者的重量比以1:5~20 为佳，1:10~15更佳，1:10最佳。
[0015] 本发明的含中生菌素的生物杀菌组合物，有效成分中生菌素和申嗪霉素的作用机 理完全不同，复配可对病原菌多位点作用，协同增效，扩大杀菌谱，提高防效，降低农药使用 量，延缓抗药性的产生，降低抗性风险。
[0016] 本发明的含中生菌素的生物杀菌组合物，可以成品制剂形式提供，也可以单剂形 式提供，使用前直接混合，然后兑水混匀配成所需浓度，植株根部灌施。具体应用时，也可以 与其它药剂如杀虫剂、生长调节剂、土壤调节剂、除草剂、杀线虫剂等混合使用。
[0017] 本发明的含中生菌素的生物杀菌组合物，具有以下优点：1、具有协同增效作用，提 高防治效果；2、扩大杀菌谱，田间病害多混合发生，中生菌素、申嗪霉素混用使用能兼治真 菌和细菌病害；3、两种有效成分作用机理不同，混配使用延缓病原菌抗药性的产生；4、降 低施药量，减少使用次数，降低使用成本。
【具体实施方式】
[0018] 下面结合实施例对本发明作进一步的说明。下述实验、实施例中所涉及的药物原 料、辅料、菌种等，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规药物原料、辅料、菌种，可通过 常规商业途径购买得到。下述实验、实施例中所涉及的试验方法、制备方法等，若无特别说 明，均为现有技术中的常规技术。
[0019] 实验中生菌素与申嗪霉素复配对病害的防治作用研宄（室内毒力测定）
[0020] -、供试药剂：中生菌素原药，申嗪霉素原药，以及春雷霉素原药，井闪霉素原药， 农用链霉素原药。原药直接用水溶解配成10000 μ g/mL的母液，以0. 2%的体积分数加入乳 化剂Tween-80,于冰箱中4°C下IC藏备用，使用时以无菌水稀释至适当浓度。
[0021] 二、供试病原菌：细菌病原菌：楼桃根癌病菌（Agrobacterium tumefaciens (Smith&Town) Conn)、姜瘟病菌（Ralstonia solanacearum) 〇 真菌病原菌：苹 果根腐病菌（Fusarium oxysporum)、水稻纹枯病菌（Rhizoctorzia solani)、苹果斑点落叶 病菌（Alternaria mali) ο
[0022] 三、测定方法：
[0023] (1)细菌毒力测定方法
[0024] 病原细菌毒力测定以樱桃根癌病菌、姜瘟病菌为试验材料，采用抑菌圈法对中生 菌素、申嗪霉素及其混配制剂进行毒力测定。
[0025] 单剂毒力测定方法：
[0026] 先将供试药剂（包括中生菌素、申嗪霉素、春雷霉素、井闪霉素、农用链霉素）配制 成7个浓度梯度（中生菌素：0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.011^/1^等7个浓度梯度；申嗪 霉素 L 0、2· 0、4· 0、8· 0、16· 0、32· 0、64· Omg/kg 等 7 个浓度梯度；春雷霉素 5· 0、10· 0、20· 0、 40. 0、80· 0、160· 0、320· Omg/kg 等 7 个浓度梯度；井冈霉素 3· 0、6· 0、12· 0、24· 0、48· 0、96· 0、 192. Omg/kg 等 7 个浓度梯度；农用链霉素 0、1(λ 0、2(X 0、4(X 0、8(X 0、16(X 0、32(X Omg/kg 等7个浓度梯度），取稀释备用的菌悬液2mL (含菌量约为106CFU/mL)至直径为90mm的培养 皿中，加入已灭菌溶化的NA培养基15mL(40~50°C )，充分混匀，待其冷却凝固后，用直径 为5mm的打孔器在每皿培养基的直径线上1/4和3/4处分别打1个孔，每孔中各加入50 μ L 营养琼脂培养基铺底；待其凝固后，在每个培养皿的其中1个孔分别加入70yL上述配制药 剂，另1孔加入无菌水作对照，每处理浓度5个重复；后将培养基在28°C下培养24~36h， 量取抑菌圈直径，取有效的3个重复的平均值为测定结果，计算相对抑制率，后将抑制率转 换为几率值，用最小二乘法计算出抑菌几率值与供试药剂浓度对数的毒力回归式，求出各 药剂对菌株的有效抑制中浓度EC 5tl。试验数据均由Microsoft Excel 2003、DPS数据处理 工作平台进行统计分析。
[0027] 混配剂联合毒力测定：
[0028] 在单剂毒力测定的基础上，将供混配的中生菌素、申嗪霉素分别按其EC5tl值剂量 按质量比例分别设置 5 : 1、2 : 1、1 : 1、1 : 2、1 : 5、1 : 10、1 : 15、1 : 20、1 : 25、 1 : 30、1 :