一种白及无菌播种一次成苗方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种白及无菌播种一次成苗方法，属于植物组织培养领域。
【背景技术】
[0002] 兰科植物白及是《中华人民共和国药典》规定的中药材白及的基源植物。目前白及 野生资源已溯临枯竭，药材白及的主要来源均为人工种植所得，兰科植物白及的种子属于 无胚乳种子，在自然条件下发芽率很低，生产中主要采用无菌播种的办法，在传统无菌播种 中，需要经历发芽-生根或原球茎-分化出苗-生根的步骤，传统的无菌播种一般需要6-8个 月的时间才能使白及种子发育成苗，至少需要经历一次的转接工作，耗费大量的人力和资 源。
[0003] 传统白及无菌播种均需要转接，一次成苗法属于首创。传统无菌播种需要6-8个月 时间，需要至少转接一次，耗费大量的人工和资源成本。
【发明内容】
[0004] 为解决上述问题，本发明提供一种白及无菌播种一次成苗方法，克服现有技术中 白及无菌播种工序繁琐，无菌培养时间长，成本高的缺陷。
[0005] 本发明采用如下技术方案： 一种白及无菌播种一次成苗方法，包括如下步骤： (1) 培养基配置:培养基为改良MS基本培养基和附加不同成份的物质，改良MS基本培 养基为，单位:mg/L，硝酸锭1650、硝酸钟1900、氯化巧770、屯水合硫酸儀185、憐酸二氨钟 85、屯水合硫酸铁27.8、氯化钻0.025、四水合硫酸儘22.1、屯水合硫酸锋8.3、五水合硫酸铜 0.025、二水合钢酸钢0.025、舰化钟0.75、棚酸0.15、乙二胺四乙酸二钢37.3、肌醇200、烟 酸0.5、甘氨酸3、附加成份为6-节氨基嚷岭3mg/L、糞乙酸O.lmg/L、吗I噪下酸0.5mg/L、琼脂 7000111旨/1、糖30000111旨/1、活性炭0.5%混配； (2) 种芙脱毒:用75%酒精浸泡白及种芙3分钟，拱出种芙，用无菌水清洗3遍，用0.15%升 隶溶液浸泡漂洗过的种芙5分钟，拱出种芙，无菌水漂洗5遍； (3) 播种:将脱毒后的种芙在培养皿中用灭菌过的手术刀切开，用綴子夹取白及种子， 均匀的播撒于灭菌过的培养基中； (4) 无菌培养:在溫度为25°C，光强2800LX，每天光照12小时的条件下培养S个月，期 间注意观察，炼出污染瓶； 巧）自然光福射炼苗:无菌培养=个月后，将培养瓶转移到遮光率为85%的溫室大棚中 培养45天即可。
[0006] 本发明的有益技术效果在于： 本发明提供一种白及无菌播种一次成苗方法，是在传统白及无菌播种模式上的一种创 新，采用改良MS培养基作为基础培养基，附加不同成分的物质在溫度为25°C，光强28001X， 每天光照12小时，无菌培养=个月，在遮光率为85%溫室大棚中培养45天，本发明较传统方 法减少了无菌播种工序，缩短了无菌培养时间，节约了成本，操作方法简便，操作方便，工作 效率高，成本低，具体为：1、减少了传统方法的工序，操作简便;2、缩短了无菌培养时间，减 少了资源投入;3、降低了成本，提高了工作效率。
【具体实施方式】
[0007] 下面结合本发明的优选实施例进一步说明本发明。
[000引实施例1 一种白及无菌播种一次成苗方法。包括如下实施步骤： (1) 培养基配置:培养基为改良MS基本培养基和附加不同成份的物质，改良MS基本培 养基为，单位:mg/L，硝酸锭1650、硝酸钟1900、氯化巧770、屯水合硫酸儀185、憐酸二氨钟 85、屯水合硫酸铁27.8、氯化钻0.025、四水合硫酸儘22.1、屯水合硫酸锋8.3、五水合硫酸铜 0.025、二水合钢酸钢0.025、舰化钟0.75、棚酸0.15、乙二胺四乙酸二钢37.3、肌醇200、烟 酸0.5、甘氨酸3、附加成份为6-节氨基嚷岭3mg/L、糞乙酸O.lmg/L、吗I噪下酸0.5mg/L、琼脂 7000111旨/1、糖30000111旨/1、活性炭0.5%混配； (2) 种芙脱毒:用75%酒精浸泡白及种芙3分钟，拱出种芙，用无菌水清洗3遍，用0.15%升 隶溶液浸泡漂洗过的种芙5分钟，拱出种芙，无菌水漂洗5遍； (3) 播种:将脱毒后的种芙在培养皿中用灭菌过的手术刀切开，用綴子夹取白及种子， 均匀的播撒于灭菌过的培养基中； (4) 无菌培养:在溫度为25°C，光强2800LX，每天光照12小时的条件下培养S个月，期 间注意观察，炼出污染瓶； 巧）自然光福射炼苗:无菌培养=个月后，将培养瓶转移到遮光率为85%的溫室大棚中 培养45天即可。
[0009] 本实施例的实施效果为下表：
本发明提供一种白及无菌播种一次成苗方法，是在传统白及无菌播种模式上的一种创 新，较传统方法减少了无菌播种工序，缩短了无菌培养时间，节约了成本，操作方法简便，操 作方便，工作效率高，成本低。
[0010] W上所述，仅为本发明较佳实施例而已，故不能依此限定发明实施的范围，即依发 明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属于本发明覆盖的范围内。
【主权项】
1. 一种白及无菌播种一次成苗方法，其特征在于，包括如下步骤： (1) 培养基配置:培养基为改良MS基本培养基和附加不同成份的物质，灌装在培养瓶 中，灭菌备用； (2) 种荚脱毒:利用酒精、升汞对白及种荚进行脱毒； (3) 播种:将脱毒后的种荚在培养皿中用灭菌过的手术刀切开，用镊子夹取白及种子， 均匀的播撒于灭菌过的培养基中； (4) 无菌培养:播种后将培养瓶置于培养室中培养，期间注意观察，拣出污染瓶； (5 )自然光辐射炼苗：无菌培养三个月后，将培养瓶转移到温室大棚中培养至可以移 栽。2. 根据权利要求1所述的白及无菌播种一次成苗方法，其特征在于，步骤（1)中所述的 培养基的配方为:单位:mg/L，硝酸铵1650、硝酸钾1900、氯化钙770、七水合硫酸镁185、磷 酸二氢钾85、七水合硫酸铁27.8、氯化钴0.025、四水合硫酸锰22.1、七水合硫酸锌8.3、五水 合硫酸铜0.025、二水合钼酸钠0.025、碘化钾0.75、硼酸0.15、乙二胺四乙酸二钠37.3、肌 醇200、烟酸0.5、甘氨酸3、附加成份为6-苄氨基嘌呤3mg/L、萘乙酸0.1mg/L、吲哚丁酸 0· 5mg/L、琼脂7000mg/L、糖30000mg/L、活性炭0· 5%混配。3.根据权利要求1所述的白及无菌播种一次成苗方法，其特征在于，步骤(2)中所述种 荚脱毒，工序为：用75%酒精浸泡白及种荚3分钟，捞出种荚，用无菌水清洗3遍，用0.15%升汞 溶液浸泡漂洗过的种荚5分钟，捞出种荚，无菌水漂洗5遍。4.根据权利要求1所述的白及无菌播种一次成苗方法，其特征在于，步骤(4)中所述无 菌培养，温度为25°C，光强2800Lx，每天光照12小时的条件下培养三个月。5.根据权利要求1所述的白及无菌播种一次成苗方法，其特征在于，步骤(5)中所述辐 射炼苗，温室大棚的遮光率为85%，时间为45天。
【专利摘要】本发明提供一种白及无菌播种一次成苗方法，是在传统白及无菌播种模式上的一种创新，采用改良MS培养基作为基础培养基，附加不同成分的物质在温度为25℃，光强2800lx，每天光照12小时，无菌培养三个月，在遮光率为85%温室大棚中培养45天，本发明较传统方法减少了无菌播种工序，缩短了无菌培养时间，节约了成本，操作方法简便，操作方便，工作效率高，成本低，具体为：1、减少了传统方法的工序，操作简便；2、缩短了无菌培养时间，减少了资源投入；3、降低了成本，提高了工作效率。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105475131
【申请号】CN201510841574
【发明人】尹琼仙, 李科, 崔践中
【申请人】普洱力品生物科技开发有限公司
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2015年11月28日