冠突散囊菌ls1菌株发酵葛根产物在樱桃蕃茄保鲜中的应用
【专利摘要】一种茯砖茶冠突散囊菌(EurotiumCristatum)LS1菌株在樱桃蕃茄保鲜中的应用，该菌株LS1的保藏号为CCTCC NO：M 2015379。在温度为20℃，湿度为75％的条件下，以无菌水为空白对照，经本发明菌株LS1发酵葛根的产物作为保鲜液处理樱桃番茄，贮藏16d进行保鲜试验，通过记录贮藏期间果实腐烂率、失重率、VC、可滴定酸、还原糖的含量，分析评价其对樱桃番茄保鲜效果。结果显示，贮藏结束时，与无菌水相比，发酵液组能显著降低了果实的腐烂率、失重率，维持较高的VC、可滴定酸、还原糖的含量。说明本发明菌株LS1发酵葛根后的发酵产物对樱桃番茄具有保鲜作用，为制备天然食品保鲜剂提供了依据。CCTCC NO：M 201537920150617
【专利说明】
冠突散囊菌LS1菌株发酵葛根产物在樱桃蕃茄保鲜中的应用
技术领域
[0001] 本发明涉及樱桃番茄的采后保鲜技术，具体涉及一种茯砖茶冠突散囊菌LSI菌株 在樱桃蕃茄保鲜中的应用。
【背景技术】
[0002] 樱桃番茄，也称微型番茄、迷你番茄、圣女果、小番茄等，属于番茄半栽培亚种中的 一个变种。樱桃番茄酸甜可口，富含类胡萝卜素和维生素C和矿物质，是一般番茄的3倍以上， 具有营养与药用双重价值，适宜加工成干果、水果罐头、生熟食等，深受人们的喜爱。但樱桃 番茄皮薄、含水量高，采后营养素流失速度非常快，极易因缺水而变软、腐败，导致果实有机 物分解，营养成分破坏，商品价值受到严重影响。
[0003] 目前，国内外对樱桃番茄的采后保鲜技术主要有以下几种:低温冷藏技术、气调贮 藏技术、涂膜保鲜技术、热处理保鲜技术、化学保鲜技术、辐射贮藏技术等。随着人们经济水 平的不断提高，对食品的要求不仅仅满足于传统上的色、香、味，更注重于食品的健康与安 全。而化学保鲜剂都具有一定的毒性，对人体健康和生态环境都有破坏作用。低温贮藏、气 调贮藏等物理保鲜方法又因受到操作、成本等因素的限制，在实际贮藏中难以得到广泛的 应用。因此，急需寻找一类新的低成本、操作简单、安全健康的樱桃番茄保鲜方法，而开发出 新型、安全、高效的生物保鲜剂成为当务之急。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是针对上述现有技术的不足，提供一种茯砖茶冠突散囊菌LSI菌株 在樱桃蕃茄保鲜中的应用，该茯砖茶冠突散囊菌LSI菌株转化葛根的发酵产物处理樱桃番 茄后，能显著降低果实的腐烂率、失重率，维持较高的V C、可滴定酸、还原糖的含量，从而延 缓樱桃番茄的后熟及衰老，对其起到采后保鲜效果。
[0005] 上述提及的茯砖茶冠突散囊菌LSI菌株，其分类命名为冠突散囊菌LSI 化111'〇1:;[111110丨8七31：11111)1^1，已于2015年6月17日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址 为中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC Ν0:Μ 2015379。
[0006] 光学显微镜下，本发明菌株LSI呈现大量菌丝，有隔，且呈不对称分支;子囊果大 量，呈球形，光滑。
[0007] 提取本发明菌株LSI基因组DNA，进行PCR扩增、测序，根据本发明菌株LSI的序列全 长通过BLAST进行同源性比对，结果表明与冠突散囊菌(Eurotiumcristatum)同源性最高， 相似性为1 0 0 %。结合该菌株的形态学特征，确定本发明菌株为冠突散囊菌 Eurotiumcristatum，命名为冠突散囊菌（Eurotiumcr is tatum) LSI。
[0008] 在温度为20°C，湿度为75%的条件下，以无菌水为空白对照，葛根及其经本发明菌 株LSI发酵后的产物作为保鲜液处理樱桃番茄，贮藏16d进行保鲜试验，通过记录贮藏期间 果实腐烂率、失重率、V e、可滴定酸、还原糖的含量，分析评价其对樱桃番茄保鲜效果。结果 显示，贮藏结束时，与无菌水相比，葛根及其发酵产物组显著降低了果实的腐烂率 (53.33%、45·00%)、失重率(4.86%、4· 31%)，维持较高的Vc(ll.95%、14.71%)、可滴定 酸(0.26 %、0.30 % )、还原糖（1.12%、1.32%)的含量。葛根经本发明菌株LSI转化后对樱桃 番茄的保鲜作用更强，说明本发明菌株LSI发酵葛根的发酵产物对樱桃番茄具有保鲜作用， 为制备天然食品保鲜剂提供了依据。
【附图说明】
[0009] 图1是樱桃番茄失重率的变化图。
[0010] 图2是樱桃番茄VC含量的变化图。
[0011] 图3是樱桃番茄可滴定酸含量的变化图。
[0012] 图4是樱桃番茄还原糖含量的变化图。
【具体实施方式】 [0013] 实施例1
[0014] 取用湖南黔阳采集的茶叶制作的茯砖茶，有"发花现象"。挑取茯砖茶上的金黄色 闭囊壳接种于PDA培养基上，28 °C恒温培养5天，挑取菌丝作平板划线，重复3次纯化，得本发 明菌株LSI。
[0015] 实施例2
[0016] 孢子悬浮液的制备：以现有技术制备本发明菌株LSI的孢子悬浮液，浓度为3 X107 个/mL，待用。
[0017]葛根发酵液的制备:吸取lmL浓度为3 X107个/mL的上述孢子悬浮液接至葛根发酵 培养基(组成:2.5g葛根及10mL水)上，28°C恒温培养发酵。7天后，用95 %质量浓度的乙醇超 声萃取发酵物，取上清液，经旋转蒸发仪至恒重，得发酵产物，将发酵产物加水稀释，至发酵 液浓度为〇. lmg/mL。
[0018] 葛根未发酵液的制备:取2.5g葛根粉碎成粉后，加水至浓度为0. lmg/mL。
[0019] 实施例3本发明菌株LS转化葛根的发酵产物对樱桃番茄采后的保鲜效果
[0020] 1.樱桃番茄保鲜方法
[0021] 以实施例2中制备的葛根发酵液作为保鲜剂对樱桃番茄进行保鲜试验，故设葛根 未发酵液、葛根发酵液和无菌水(空白对照)3个处理组。将采后新鲜的樱桃番茄洗净，晾干， 分别在不同的处理液中浸泡5min，自然晾干后，装入保鲜袋内，封口，20°C、75%的温度和湿 度下恒温贮藏，每隔5天测一次指标。每个处理20个果实，3次重复。
[0022] 2.樱桃番茄果实品质指标测定
[0023]①果实腐烂率的测定:腐烂率（％ )=腐烂果实的个数/处理的总个数X 100% ; [0024]②质量损失率的测定：质量损失率的测定参照靳敏等[8()]的方法，W( % ) = [ (m0-mn)/mO] X 100%，其中W为处理η天后的质量损失率，mO为原质量，mn为处理η天后的质量； [0025]③Vc含量的测定：采用2，6-二氯靛酚法（李合生.植物生理生化实验原理和技术 [M].北京:高等教育出版社，2000.);
[0026]④可滴定酸的测定:参照李合生的酸碱滴定法(李合生.植物生理生化实验原理和 技术[M].北京:高等教育出版社，2000.);
[0027] ⑤还原糖的测定：参照GB/T5009 · 7-2003测定。
[0028] 3.结果
[0029] 3.1葛根及其发酵产物对樱桃番茄果实腐烂率的影响
[0030] 从下表1可知，与无菌水组相比，葛根发酵液及未发酵液对樱桃番茄的腐烂率有明 显的降低作用。贮藏至第5d，无菌水组腐烂率为13.33%，而葛根发酵液及未发酵液组腐烂 率为〇;贮藏至第l〇d，葛根发酵液及未发酵液处理组才开始出现烂果，腐烂率均为11.67 %， 此时无菌水组腐烂率为21.67%;贮藏结束至第25d时，无菌水、葛根未发酵液及发酵液处理 组的腐烂率依次为78.33%、53.33%、45.00%。葛根发酵液及未发酵液处理组腐烂率均显 著低于空白对照组(P<〇.05)，可见葛根及其经本发明菌株LSI的发酵产物对樱桃番茄保鲜 效果良好，均可延长其贮藏期。
[0031]表1对樱桃番茄腐烂率的影响 [0032]
[0033] 注：同一浓度数据比较，字母不同表示差异显著(P<0.05)。
[0034] 3.2葛根及其发酵产物对樱桃番茄质量损失率的影响
[0035] 樱桃番茄失重率变化见图1，由图可知，随着贮藏时间的延长，樱桃番茄的失重率 呈上升趋势。贮藏5-15d，三个处理组的失重率上升较缓慢，第25d贮藏结束后，无菌水、未发 酵液、发酵液三个处理组的失重率依次为6.44%、4.86%、4.31 %。实验结果表明，葛根未发 酵液及发酵液组的失重率均低于无菌水组(P<〇.05)，而其中葛根经本发明菌株LSI发酵后 抑制效果最佳。
[0036] 3.3葛根及其发酵产物对樱桃番茄Vc含量的影响
[0037] 由图2可知，贮藏5d后，无菌水组Vc含量迅速下降，而葛根未发酵液和发酵液处理 组下降速度较为缓慢。贮藏至第25d结束后，无菌水、葛根未发酵液、葛根发酵液三个处理组 的Vc含量依次为3.63%、11.95 %、14.71 %，葛根未发酵液和发酵液处理组VC含量下降率均 显著低于无菌水组(P<〇.05)。实验结果显示，相比无菌水组，葛根未发酵液及发酵液处理 组均可延缓樱桃番茄中Vc含量的下降，较好的保持了果实的营养品质。
[0038] 3.4葛根及其发酵产物对樱桃番茄可滴定酸含量的影响
[0039] 参见图3,葛根未发酵液及发酵液处理组变化总趋势与无菌水组一致，在贮藏期间 均呈下降趋势。贮藏结束第25d，可滴定酸总量明显低于第5d，无菌水、葛根未发酵液、发酵 液处理组的可滴定酸含量依次为0.16%、0.26%、0.30%。实验结果显示葛根发酵液组及未 发酵液处理组均具有延缓樱桃番茄可滴定酸含量降低的效果，其中葛根经本发明菌株LSI 发酵后对减缓可滴定酸含量的降低要优于发酵前。
[0040] 3.5葛根及其发酵产物对樱桃番茄还原糖含量的影响
[0041] 由图4可知，无菌水组在贮藏第5-10d内还原糖显著下降，葛根未发酵液及发酵液 处理组在整个贮藏期内还原糖同样呈整体下降的趋势。贮藏期第25d结束后，无菌水、葛根 未发酵液、发酵液处理组的还原糖含量依次为〇.72%、1.12%、1.32%。试验结果表明，葛根 发酵液组还原糖糖变化趋势最小，表明其最有利于维持草莓中可溶性糖含量，极大地保持 樱桃番茄原有风味。
[0042] 4.结论
[0043]保鲜试验表明，用葛根、葛根发酵液处理樱桃番茄，相比无菌水组在降低腐烂率、 失重率，更好的保护VC、可滴定酸、还原糖不被损耗有显著效果，而葛根经本发明菌株LSI转 化后的发酵液对樱桃番茄的保鲜作用明显增强，能更好地延缓樱桃番茄的后熟及衰老，对 其起到采后保鲜效果。
【主权项】
1. 保藏号为CCTCC NO:M 2015379的茯砖茶冠突散囊菌(EurotiumCristatum)LSl菌株 在樱桃蕃茄保鲜中的应用。2. 如权利要求1所述的应用，其中，该应用是指在降低樱桃蕃茄的腐烂率中的应用。3. 如权利要求1所述的应用，其中，该应用是指在降低樱桃蕃茄的失重率中的应用。4. 如权利要求1所述的应用，其中，该应用是指在延缓Vc含量减少中的应用。5. 如权利要求1所述的应用，其中，该应用是指在延缓可滴定酸含量减少中的应用。6. 如权利要求1所述的应用，其中，该应用是指在延缓还原糖含量减少中的应用。
【文档编号】A23B7/155GK105994611SQ201610423829
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年6月16日
【发明人】易有金, 肖靓, 夏菠, 曹熙, 胡谢欣
【申请人】湖南农业大学