一种护肝明目的功能食品的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种护肝明目的功能食品。由海藻多酚40?60重量份、岩藻黄素30?50重量份、虾青素10?20重量份、牛磺酸10?20重量份、维生素C 0.1?1重量份、维生素E 0.1?1重量份经过调配、杀菌、制粒、压片、包装工艺制成。所述功能食品可制成胶囊、片剂、冲剂、口服液或饮料，具有显著的调节肝脏脂代谢、改善视力的功效。
【专利说明】
一种护肝明目的功能食品
技术领域
[0001] 本发明涉及保健食品技术领域，尤其涉及一种护肝明目的功能食品。
【背景技术】
[0002] 近年来，由于人们高度紧张的工作节奏，以及不合理的饮食结构和生活方式，非酒 精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)人群越来越多。调查发现， NAFLD的发病率在美国、日本及中国分别达到了33%、29%和10%，且发病年龄有年轻化的 趋势(Farrell et al.，2006) AAFLD属于代谢综合症范畴，与中心性肥胖、高血脂、高甘油 三酯血症、Π 型糖尿病、动脉粥样硬化等疾病都有密切关系(Matthew et al.，2007)。据调 查，30%的肥胖人群、50 %的Π 型糖尿病患者、100 %的中心性肥胖症患者均同时患有NAFLD (Shivakumar et al.，2011)。与此同时，患有脂肪肝的人群往往也是视健康问题较为突出 的人群。中医学认为，"肝开窍于目，若肝血不足，则易使两目干涩，视物昏花"。说明视疲劳 与肝损伤之间具有密切的联系。因此，根据中医多靶点、协同保护的辩证思想，将具有保肝 功能的膳食营养因子与视力保护营养因子进行科学组方设计，对改善当前突出的脂肪肝及 视力损伤问题能够起到事半功倍的效果。
[0003] 海藻是海洋植物多酚的主要来源，其结构与陆源植物多酚存在很大不同，现有研 究仅局限于抗氧化、抗菌活性的研究。岩藻黄素是褐藻适应海洋极端光环境的次生代谢产 物。现有研究表明，岩藻黄素不仅具有突出的抗氧化活性（其抗氧化活性达到维生素 E的 13.5倍），还具有减肥、抗肿瘤、预防心血管疾病、降血糖、抗炎等多种生理活性。但是，有关 岩藻黄素明目功能研究及相关产品开发尚未见报道。此外，牛磺酸可靶向促进呼吸链作用， 具有显著的抗疲劳功能;虾青素具有突出的促进胆固醇转运和排泄的功能;维生素 C和维生 素 E则可促进功能成分再生，提高各成分间的协同增效的效果。因此，充分利用传统中医理 论的"多途径、多靶点、协同作用"思想，将具有不同功能与作用途径的海藻多酚、岩藻黄素、 虾青素、牛磺酸、维生素 C、维生素 E进行科学组方设计，实现各成分的功效互补，从而得到兼 具清肝明目功能的、效果突出的功能食品。目前，尚未见以上成分配伍设计的功能食品。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种功效明显、绿色天然、适合广大消费群体的护肝明目 的功能食品。
[0005] 为实现上述目的，本发明提供一种护肝明目的功能食品，其特征在于，由海藻多酚 40-60重量份、岩藻黄素30-50重量份、虾青素10-20重量份、牛磺酸10-20重量份、维生素 C 0.1-1重量、维生素 E 0.1-1重量份制备得到。
[0006] 进一步，所述海藻多酚中总酚重量含量不少于20%。
[0007] 进一步，所述岩藻黄素中岩藻黄素重量含量不少于10%。
[0008] 进一步，所述海藻多酚和岩藻黄素来源于可食用海藻。
[0009] 进一步，所述可食用海藻为海带、紫菜、羊栖菜、裙带菜、鼠尾藻、红毛藻、泡叶藻、 麒麟菜、江蓠、墨角藻或微球藻。
[0010]进一步，所述清肝明目的功能食品是片剂、胶囊或冲剂。
[0011]进一步，所述清肝明目的功能食品是休闲食品或饮料。
[0012]所述海藻多酚是按本发明人前期已申请受理发明专利"一种高纯度海藻多酚的制 备方法"（专利受理公开号:CN105193863A)记载的方法进行制备的。
[0013] 所述岩藻黄素是按本发明人前期已授权发明专利"一种酶法制备褐藻岩藻聚糖与 岩藻黄素的方法"（专利号:ZL201310142757. X)记载的方法进行制备的。
[0014] 所述功能食品配方中的活性成分是由海藻多酚、岩藻黄素、虾青素、牛磺酸、维生 素 C和维生素 E按一定比例构成的。
【申请人】首先通过高脂诱导小鼠非酒精性脂肪肝动物学实 验及可见光诱导青紫蓝兔视网膜损伤动物模型证实（实验内容见实施例6,结果如表1所 示），海藻多酚不仅具有突出的调节肝脏脂代谢功能，也能适当改善视网膜功能，其有效剂 量范围为80mg/kg-120mg/kg;岩藻黄素则以突出的视网膜保护功能为主，兼具降脂保肝的 功效，有效剂量范围为60mg/kg-100mg/kg。该结果说明，海藻多酸与岩藻黄素在护肝明目功 能食品中具有良好的功效互补作用。尽管海藻多酚和岩藻黄素在有效剂量范围分别具有良 好的护肝和视力保护功能，但效果依然不够理想。
[0015] 表1海藻多酚、岩藻黄素有效剂量确定表
[0016]
[0018]因此，产品在以海藻多酚和岩藻黄素为主的基础上，进一步结合中医理论的"多靶 点、协同作用"理论，科学选取牛磺酸、虾青素、维生素 C(Vc)和维生素 E(VE)与之配伍，使产 品护肝明目功能的进一步提升。选取以上成分的理论依据在于：牛磺酸既能促进肝糖原的 从头合成，促进脂肪酸的氧化途径，减少肝脏中的脂质累积，也是促进视神经生长发育、 保护视网膜的重要营养素;虾青素不仅能够降低肝脏胆固醇的合成，对视力也有保护作用； 维生素 C和维生素 Ε也是视网膜必须的营养素，在抗氧化方面具有典型的协同增效功能。采 用前述高脂诱导小鼠非酒精性脂肪肝动物学实验及可见光诱导青紫蓝兔视网膜损伤动物 模型，灌胃剂量为200mg/kg，以海藻多酚、岩藻黄素的最低有效剂量为基础，进一步进行组 方优选，实验结果如表2所示。在海藻多酚与岩藻黄素保持最低有效剂量的基础上(40wt% 和30wt%)，进一步与牛黄酸、虾青素、维生素 C和维生素 E配伍的效果最佳，减少某种成分均 会导致功能降低。同时，结果发现牛黄酸、虾青素、维生素 C和维生素 E的最佳重量比分别为 10wt%_20wt%、10wt%_20wt%、0· lwt%_lwt%和0· lwt%_lwt%，改变上述比例均导致功 效性变差。
[0019] 表2各组分不同配比的功效对比表(剂量:200mg/kg)
[0020]
[0022]本发明的发明人将以上成分进行科学配比设计，使各组合物具有显著的协同增效 的作用，从而提高产品的功能。因此，本发明中强调这六种成分在产品中所占的比例。
【附图说明】
[0023]图1是实施例5模型对照组小鼠肝组织病理切片图（X 400)。
[0024]图2是实施例5组方干预组小鼠肝组织病理切片图（X400)。
[0025]图3是实施例5组方干预组青紫蓝兔视网膜组织病理切片图（X400)。
【具体实施方式】
[0026]下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终 相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附 图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。实施例 中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明 书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
[0027]实施例1:护肝明目的胶囊
[0028]以海藻多酚40重量份、岩藻黄素30重量份、虾青素10重量份、牛磺酸10重量份、维 生素 C 0.1重量份、维生素 E 0.1重量份的比例称取上述各提取物，组方中加入适量硬脂酸 镁和淀粉，混匀，用全自动胶囊填充机填充入硬胶囊，每粒装量0.5g，即得胶囊类护肝明目 的功能食品。
[0029]实施例2:护肝明目的片剂
[0030]以海藻多酚50重量份、岩藻黄素40重量份、虾青素15重量份、牛磺酸15重量份、维 生素 C 0.5重量份、维生素 E 0.5重量份的比例称取上述各提取物，配方加入适量的糊精、淀 粉、微晶纤维素和乳糖中的一种或几种辅料，混合均匀，用适量70% (v/v)乙醇润湿，制软 材，过30目筛制粒，于70-80°C干燥，用60目筛整粒，压片，得片剂，每片0.2g，即得片剂类护 肝明目的功能食品。
[0031]实施例3:护肝明目的冲剂
[0032]以海藻多酚55重量份、岩藻黄素45重量份、虾青素15重量份、牛磺酸15重量份、维 生素 C 0.5重量份、维生素 E 0.5重量份的比例称取上述各提取物，组方中加入适量可溶性 淀粉、糊精、蔗糖、乳糖和甘露醇其中一种或几种，用适量70%(v/v)乙醇润湿，制软材，过20 目筛制粒，70-80°C干燥，60目整粒，即得冲剂类护肝明目的功能食品。
[0033]实施例4:护肝明目的饮料
[0034]以海藻多酚60重量份、岩藻黄素50重量份、虾青素20重量份、牛磺酸20重量份、维 生素 c 1重量份、维生素 E 1重量份的比例称取上述各提取物，配方溶于适量的70%(v/v)乙 醇，加入大豆卵磷脂、硬脂酰乳酸钠、三聚甘油酯、蔗糖酯、月桂酸单甘油酯中的一种或几种 进行乳化，然后经复溶、加入适量的甜味剂和稳定剂，混匀，过滤，灌装，杀菌，即得饮料类护 肝明目的功能食品。
[0035]实施例5:效果验证实验 [0036] 1)护肝验证实验
[0037] 将实施例1中得到的配方设置为组方干预组，并设置空白对照组，模型对照组。 [0038]实验动物：SPF级雌性ICR小鼠，15-20g，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司。 小鼠基础饲料成分:碳水化合物64 %，蛋白质21 %，脂肪4 %，纤维5 %，水分6 % ;小鼠高脂饲 料成分：10 %猪油，1 %胆固醇，〇. 1 %胆酸盐和88.9 %基础饲料。上述饲料均购于上海斯莱 克实验动物有限责任公司。饲养室温度:23±2°C，相对湿度55±5%。
[0039]剂量的确定:配方灌胃的剂量为200mg/kg。
[0040] 动物分组及处理方法：小鼠适应性喂养1周后，按照体重随机分为6组，每组10只， 空白对照组给予基础饲料，模型对照组、阳性对照组及组方干预组均给予高脂饲料，自由采 食。组方干预组每日灌胃实施例1所得200mg/kg。每3天称一次体重，根据体重变化调整给药 量。给药时，将实施例1所得产品用去离子水配置成液体状后，按剂量经口灌胃。饲喂8周实 验结束时，处死小鼠摘取小鼠肝脏，一部分用于制作肝冷冻切片，其余用于测定肝脏TC、TG、 LDL和HDL含量。
[0041 ]实验结果：
[0042]从表3可以看出，经过8周的高脂饲料喂养，模型对照组小鼠肝脏中TC、TG、LDL和 HDL含量均显著高于空白对照组(P〈0.05)，这说明模型组小鼠的肝脏已经出现了明显的脂 质异常堆积，出现了非酒精性脂肪肝症状。经组方产品干预后，肝脏中TC、TG、LDL和HDL水平 出现了显著降低，说明组方产品具有明显的护肝功能。
[0043]表3配方对高脂饮食小鼠肝脏脂质指标的影响表(n = 10)
[0044]
[0046] 肝组织病理切片观察:经过8周的试验，各组小鼠肝脏进行油红0染色，观察肝细胞 脂肪沉积情况。结果显示:模型对照组肝细胞肿胀，肝窦消失，胞浆内可见大小不一的圆形 空泡，胞核居中或偏向一侧，出现散在肝细胞脂肪变性(见图1，图1是模型对照组小鼠肝组 织病理切片图）；组方干预组呈肝细胞内未见明显红染脂肪滴，肝细胞脂肪变性出现明显好 转(见图2,图2是组方干预组小鼠肝组织病理切片图）。以上说明产品具有良好的护肝功能。 [0047] 2)视力保护功能评价实验
[0048]实验动物及饲养环境:SPF级青紫蓝兔，雌雄各半，体重2.0 ± 0.2kg，由北京天坛生 物制品股份有限公司动物中心提供(合格证号为SCXK (京）2004 - 0002)。室内通风条件良 好，正常昼夜变化(8:00am-8:00pm)，相对湿度为55 ± 5 %，室温:23 ± 2°C。
[0049]剂量确定:配方灌胃的剂量为200mg/kg
[0050] 实验方法:21只青紫蓝兔适应性饲养一周，自由采食。1周后按体重随机分成3组， 即空白对照组，模型对照组，组方干预组，每组7只试验动物。按以下剂量继续饲喂2周：空白 对照组每日灌胃剂量为2.5mL水，模型组每日灌胃剂量为2.5mL水，组方干预组每日灌胃剂 量为400mg样品（实施例1所得）。2周后，进行光照实验。光照实验采用自制光照箱:光照箱尺 寸为50X40X30cm，底面和四周均为镜子，侧面四个角上各安装一根白色冷光源荧光灯管， 使得光照箱内各方向光照度均为15000±10001ux(TES-1332A照度计测定）。模型对照组、组 方干预组青紫蓝兔于60-lOOlux光环境中暗适应处理24h后，采用复方托吡卡胺滴眼液对双 眼进行散瞳，20min后置于自制光照箱中开始光照，每个光照箱中内放置一只青紫蓝兔，光 照2h，不限制青紫蓝兔活动。整个光照过程保持通风，保证光照箱内温度保持在21-24Γ的 相对恒温环境。光照处理结束后，试验动物送回动物房中进行暗适应处理。按前述灌胃剂量 及采食方式继续饲养各组动物7天，然后采用病理切片观察视网膜病变情况。
[0051] 实验结果:青紫蓝兔视网膜组织学病理切片如图3所示，其中图3是组方干预组青 紫蓝兔视网膜组织病理切片图。空白对照组视网膜细胞层次分明，感光细胞内外层排列紧 密、分界清晰；模型对照组视网膜细胞出现了大量凋亡，感光细胞内外节层次模糊，说明视 网膜受到了明显的光损伤;经组方干预后，由图可看出，青紫蓝兔视网膜组织形态正常，结 构层次清晰，内外节排列整齐规则，内外细胞层分界清晰，证明产品具有良好的保护视网膜 光损伤的功效。
[0052]采用实施例2-4所得进行效果验证，具有与实施例1同样良好的护肝功能和保护视 网膜光损伤的效果。
[0053]实施例6:高脂诱导小鼠非酒精性脂肪肝动物学实验和可见光诱导青紫蓝兔视网 膜损伤动物模型
[0054] (1)高脂诱导小鼠非酒精性脂肪肝动物学实验
[0055]实验动物：SPF级雌性ICR小鼠，15-20g，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司。 小鼠基础饲料成分:碳水化合物64 %，蛋白质21 %，脂肪4 %，纤维5 %，水分6 % ;小鼠高脂饲 料成分：10 %猪油，1 %胆固醇，〇. 1 %胆酸盐和88.9 %基础饲料。上述饲料均购于上海斯莱 克实验动物有限责任公司。饲养室温度:23±2°C，相对湿度55±5%。
[0056]给药剂量及方法：海藻多酸的灌胃的剂量分别为60mg/kg、80mg/kg、100mg/kg、 120mg/kg和 140mg/kg;岩藻黄素的灌胃的剂量分别为40mg/kg、60mg/kg、80mg/kg、100mg/kg 和120mg/kg。
[0057] 动物分组及处理方法：小鼠适应性喂养1周后，按照体重随机分为6组，每组10只， 除正常组给予基础饲料外，其余组均给予高脂饲料，自由采食。每3天称一次体重，根据体重 变化调整给药量。给药时，将海藻多酚用去离子水配置成液体状后，按剂量经口灌胃。连续8 周给药后处死小鼠，摘取小鼠肝脏，于含冰的生理盐水中快速漂洗，拭干，用于测定肝脏总 胆固醇(TC)含量。
[0058] (2)可见光诱导青紫蓝兔视网膜损伤动物模型
[0059]实验动物及饲养环境:SPF级青紫蓝兔，雌雄各半，体重2.0 ± 0.2kg，由北京天坛生 物制品股份有限公司动物中心提供(合格证号为SCXK (京）2004 - 0002)。室内通风条件良 好，正常昼夜变化(8:00am-8:00pm)，相对湿度为55 ± 5 %，室温:23 ± 2°C。
[0000]给药剂量及方法：海藻多酸的灌胃的剂量分别为60mg/kg、80mg/kg、100mg/kg、 120mg/kg和 140mg/kg;岩藻黄素的灌胃的剂量分别为40mg/kg、60mg/kg、80mg/kg、100mg/kg 和120mg/kg。
[0061]动物分组及处理方法:青紫蓝兔适应性饲养一周，自由采食。1周后按体重随机分 成12组，即正常组，模型组，5个海藻多酚不同剂量干预组，5个岩藻黄素不同剂量干预组，每 组7只试验动物。按以下剂量继续饲喂2周：正常组每日灌胃剂量为2.5mL水，模型组每日灌 胃剂量为2.5mL水;分别将海藻多酚及岩藻黄素用去离子水配置成液体状后，按剂量经口灌 胃。2周后，进行光照实验。光照实验采用自制光照箱:光照箱尺寸为50X40 X 30cm，底面和 四周均为镜子，侧面四个角上各安装一根白色冷光源荧光灯管，使得光照箱内各方向光照 度均为15000±10001ux(TES-1332A照度计测定）。模型组、海藻多酚干预组、岩藻黄素干预 组青紫蓝兔于60-lOOlux光环境中暗适应处理24h后，采用复方托吡卡胺滴眼液对双眼进行 散瞳，20min后置于自制光照箱中开始光照，每个光照箱中内放置一只青紫蓝兔，光照2h，不 限制青紫蓝兔活动。整个光照过程保持通风，保证光照箱内温度保持在21-24Γ的相对恒温 环境。光照处理结束后，试验动物送回动物房中进行暗适应处理。按前述灌胃剂量及采食方 式继续饲养各组动物7天，然后采用电视觉生理仪ERG检测各组动物视网膜最大混合反应 ERG 值。
[0062]从
【发明内容】
部分的表1数据可以看出，海藻多酚不仅具有突出的调节肝脏脂代谢 功能，也能适当改善视网膜功能，其有效剂量范围为80mg/kg-120mg/kg;岩藻黄素则以突出 的视网膜保护功能为主，兼具降脂保肝的功效，有效剂量范围为60mg/kg-100mg/kg。该结果 说明，海藻多酚与岩藻黄素在护肝明目功能食品中具有良好的功效互补作用。尽管海藻多 酚和岩藻黄素在有效剂量范围分别具有良好的护肝和视力保护功能，但效果依然不够理 想。
[0063] 尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例 性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在不脱离本发明的原理和宗旨 的情况下在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
【主权项】
1. 一种护肝明目的功能食品，其特征在于，由海藻多酚40-60重量份、岩藻黄素30-50重 量份、奸青素1〇_20重量份、牛横酸10-20重量份、维生素 C 0.1_1重量、维生素 E 0.1_1重量 份制备得到。2. 权利要求1所述护肝明目的功能食品，其特征在于，所述海藻多酚中总酚重量含量不 少于20 %。3. 权利要求1所述护肝明目的功能食品，其特征在于，所述岩藻黄素中岩藻黄素重量含 量不少于10%。4. 权利要求1所述护肝明目的功能食品，其特征在于，所述海藻多酚和岩藻黄素来源于 可食用海藻。5. 权利要求4所述护肝明目的功能食品，其特征在于，所述可食用海藻为海带、紫菜、羊 栖菜、裙带菜、鼠尾藻、红毛藻、泡叶藻、麒麟菜、江蓠、墨角藻或微球藻。6. 权利要求1所述护肝明目的功能食品，其特征在于，所述清肝明目的功能食品是片 剂、胶囊或冲剂。7. 权利要求1所述护肝明目的功能食品，其特征在于，所述清肝明目的功能食品是休闲 食品或饮料。
【文档编号】A61K31/355GK105996027SQ201610320956
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年5月14日
【发明人】刘翼翔, 刘光明, 曹敏杰, 吴永沛, 刘萌
【申请人】集美大学